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【最新word论文】PESA结合ICSI治疗无精子症其后代安全性的回顾性研究【临床医学专业论文】.doc

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    • 1PESA 结合 ICSI 治疗无精子症其后代安全性的回顾性研究作者:靳镭,朱桂金,章汉望,李豫峰,刘群,蒋凌英【关键词】 经皮附睾穿刺取精术;无精子症;卵细胞浆内单精子注射术;并发症【摘要】 目的 在一个较大样本的基础上从孕妇和胎儿两个角度来综合评价经皮附睾穿刺取精术(PESA)结合卵细胞浆内单精子注射技术(ICSI)治疗无精子症的安全性和有效性方法 将同期因少弱精子症而行 ICSI 的患者 274 例共317 个促排卵周期设为对照组,试验组为行 PESA+ICSI 治疗的 121 例无精子症患者,共行促排卵周期 140 个比较两组的妊娠和胎儿出生情况并定期随访出生后后代的发育情况结果 妊娠率试验组显著高于对照组(51.43% vs 39.43%,P<0.05) ,流产率及妊高征发生率两者无明显统计学差异(12.5% vs 11.2%;6.94% vs 9.60%,P>0.05) 胎儿出生体重、性别比及总的畸形发生率两组间差异亦无显著性(P>0.05) 结论 PESA 结合 ICSI 方法并没有增加妊娠分娩并发症及胎儿畸形的发生率,因此是治疗男性无精子症的一种安全、有效的方法关键词】 经皮附睾穿刺取精术;无精子症;卵细胞浆内单精子注射术;并发症Retrospective study about offspring’s safety of ICSI with sperm obtained by PESA for the treatment of azoospermia【Abstract】 Objective To judge synthesizedly about the safety and effectiveness of intracytoplasmic sperm injection(ICSI) with sperm obtained by percutaneous epididymal sperm aspiration(PESA).Methods The control group was defined as ICSI aiming to treat oligoasthenozoospermia,which included 274 patients totally carrying out 317 hyper-stimulating cycles.The experimental group was 121 patients suffered from azoopermia,which accepted PESA+ICSI treatment in 140 cycles.To compare pregnancy and birth situations between experimental group and control group,then follow-up offspring’s development regularly were performed.Results The experimental group’s pregnant rates were prominently statistically higher than those of the control group (51.43% vs 39.43%,P<0.05) ,miscarriage rates and incidence of pregnancy-induced hypertension syndrome (PIH) were of no differences between the two groups (12.5% vs 11.2%;6.94% vs 9.60%,all P>0.05).No differences were found in newborn’s weight、sexual ratio and total incidence of malformation (P>0.05).2Conclusion ICSI using PESA sperm doesn’t increase the incidence of pregnanct complications and offspring’s malformation,so it is a safe and effective method to treat azoospermia.【Key words】 percutaneous epididymal sperm aspiration;azoospermia;intracytoplasmic sperm injection;complications卵细胞浆内单精子注射技术(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)与睾丸或附睾显微取精技术在临床上的联合应用解决了男性无精子症患者生育遗传学后代的难题,临床上也已取得巨大成功。

      接受 ICSI 者睾丸或附睾精子多为不成熟精子,活动力也较差,其质量较正常射出的精子是有所下降的,尽管有不少研究者证实了该技术的有效性[1,2] (大多仅从受精率、卵裂率、种植率及临床妊娠率等角度出发) ,但孕妇的妊娠结局及后代安全性的报道尚处于空白故本文欲通过对本中心 121 例无精子症患者经皮附睾穿刺抽吸术(PESA)+ICSI 治疗后孕妇妊娠分娩及胎儿发育情况的回顾性分析,从而在一个较大样本的基础上来探讨 PESA 结合 ICSI 方法治疗无精子症的安全性和有效性1 对象与方法1.1 研究对象 自 1999 年 10 月第 1 例 PESA+ICSI 病例开始,至 2004 年 8 月,共 121 对夫妇在我中心接受 PESA+ICSI 治疗,共进行 140 个促排卵周期收集同时期在本中心因少弱精子症而接受 ICSI 治疗的患者 274 例共 317 个促排卵周期无精子症的诊断标准为 3 次射精精液离心后均未发现精子少精子症和(或)弱精子症的诊断参见 WHO 的诊断标准[3] 所有患者染色体检查均正常,性激素测定在正常范围之内1.2 ICSI 前精子的获取1.2.1 经皮附睾穿刺抽吸术(percutaneous epididymal sperm aspiration,PESA) 针对无精子症患者,本中心首选 PESA 方法获取精子。

      术前准备齐备后,将附睾固定于阴囊皮下,用 1ml TB 注射器于肉眼直视下穿刺附睾头并负压抽吸,直至针管内有淡黄色浑浊附睾液体抽出如未见液体抽出,则改变穿刺点或行对侧附睾穿刺,直至所穿出的附睾液经镜检发现活动精子如 PESA 最终未穿到活精子,则改用睾丸精子抽取术(testicular sperm extraction,TESE)取精,若后者仍未找到活精,则只能考虑接受供精与此同时,为了尽可能减轻患者反复穿刺取精的痛苦,中心还将诊断性穿刺或 ICSI 后剩余的微量精子加以冷冻,以备用于以后的促排卵周期,临床上也已3取得了一定的成果[4] ,是一项值得推广的技术1.2.2 射精 至少禁欲 2 天,少弱精子症患者在采卵当日手淫法取精1.3 ICSI 前精子的准备1.3.1 PESA 精子的处理 附睾穿刺取出较多活精子后,加入 Spermrinse(美国 Vitrolife 产品)洗涤精子两次(1000r/min,5min) ,并将沉淀密度调为 2~5 个活精子/HP,后置于培养皿内待行 ICSI若取出的活精子数目极少,则不进行处理,而是直接从培养皿内挑取活精子行 ICSI若先前有 PESA 冻精,则采卵当日复苏冻精,过程参见文献[5] 。

      若发现足够活精子,则采用 PESA 冻精行 ICSI;若未找到足够活精子,则重新穿刺取精1.3.2 射精精液的处理 采用上游法处理精液,吸取其上清并置于培养皿内待行 ICSI极度少精者(如每高倍镜下仅可见数个活精子)不进行上游处理,其处理方法同上述 PESA精子的处理1.4 超促排卵及卵子获取 按本中心常规方案进行超促排卵,适时监测、取卵及卵细胞处理,最后将MⅡ期成熟卵子置入培养皿内待行 ICSI1.5 ICSI、受精、卵裂、种植及妊娠情况的观察 试验组及对照组分别对 1915、3364 个 MⅡ期成熟卵子行 ICSI[6] ,分别移植胚胎 616、1099 个(剩余优质胚胎冷冻保存) 胚胎移植后通过血 β-HCG(β-human chorionic gonadotropin,人绒毛膜促性腺激素)及 B 超检测以确定临床妊娠如宫内胚胎数目≥3 个,则行选择性减胎术妊娠 3 个月后嘱患者当地医院定期产检,定期随访记录妊娠、分娩、胎儿出生情况及其后的体质及智商发育等情况1.6 统计学方法 采用 SPSS 11.5 统计分析软件包进行统计学处理,样本均数的差异性分析采用 t 检验,率的差异性分析采用 χ2 检验。

      计数资料采用方差分析,结果采用均数±标准差(±s)来表示42 结果2.1 试验组与对照组一般情况的比较 见表 1表 1 试验组与对照组一般情况比较(略)注:*两组在男方年龄、女方年龄及不孕年限等方面均差异无显著性(P>0.05)2.2 两组间孕妇妊娠情况的比较 试验组共妊娠 72 例,其中单胎妊娠 49 例,双胎妊娠 17 例,三胎及三胎以上妊娠 6 例,流产 9 例,宫外孕 1 例对照组共妊娠 125 例,其中单胎妊娠 82例,双胎妊娠 35 例,三胎及三胎以上妊娠 8 例,流产 14 例2.3 两组间胎儿出生情况的比较 试验组中剖宫产 55 例,顺产 7 例,共出生活胎 81 例,死胎 1 例对照组中剖宫产 99 例,顺产 12 例,共出生活胎 145 例,死胎 2 例,2 例伴新生儿黄疸,活胎中有 3 例在出生后 20 天内死亡(3 例均为早产儿) 胎儿平均出生体重及性别比见表 2表 2 试验组与对照组两组间 ICSI 后情况比较(略)注:#妊娠率试验组显著高于对照组(P<0.05) ;*两组间的流产率、妊高征发生率、新生儿出生体重、性别比以及总的畸形率差异均无显著性(P>0.05)2.4 出生后的随访情况 对胎儿出生后的情况进行跟踪随访,发现了以下异常:试验组中 1 例伴尿道下裂,1 例为脐疝,1 例斜颈。

      对照组中 1 例为缺氧缺血性脑病,1 例肾积水、左肾缺如,1 例右尿道狭窄、右肾积水,1 例为先心病,1 例脐疝、阴囊疝,1 例为两性畸形总的畸形率两组间差异无显著性(见表 2) 另外,本中心还对1 岁以上儿童的体质以及智商发育情况进行了随访,亦未发现明显的异常,其体质及智商发育均与同龄儿无太大差异,仅对照组中出现 1 例两次全麻手术后智商略低于其同胞妹妹(一次疝手术,一次手指矫正手术) 研究期间内,PESA 冻精 ICSI 后共获得了 8 例妊娠且均成功分娩,无明显并发症发生,所分娩的 10 例胎儿中也未出现明显畸形3 讨论3.1 PESA 精子的 ICSI 技术 ICSI 技术实现了极少量精子使卵子受精的目的,近年来 ICSI 又与显微外科取精技术如显微外科附睾精子抽吸术(microsurgical epididymal sperm aspiration,MESA) 、PESA 及 TESE 等结合来治疗无精子症[7,8] ,使得自然情况下根本无法生育的无精子症患者看到了生育后代的希望,同时也进一步拓展了辅助生殖技术的治疗范围3.2 PESA 精子的安全性 5目前虽然 PESA 结合 ICSI 技术在临床上得到了广泛的应用,但仍有一些学者对它的安全性提出质疑。

      ICSI 结合显微取精技术未进行动物试验便直接应用到了临床,缺乏可靠的试验依据M.O′Connell 等[9]研究发现 PESA 精子的线粒体 DNA 突变率高,核 DNA 完整性差,这些均提示应谨慎地对待 PESA 精子的ICSI国内外的许多报道均证实了 PESA 结。

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