综合实验七、九-橄榄油中角鲨烯的分析鉴定.doc

橄榄油中角鲨烯的分析鉴定一、 实验目的1. 了解橄榄油中角鲨烯的定性检测方法2. 掌握样品前处理的方法及步骤二、 实验原理角鲨烯是一种脂质不皂化物，最初是从鲨鱼的肝油中发现的,1914年被命名为Squalene,其化学名称为2,6,10,15,19,23-六甲基-2,6,10,14,18,22-二十四碳六烯,属开链三萜,又称鱼肝油萜具有提高体内超氧化物歧化酶(SOD)活性、增强机体免疫能力、改善性功能、抗衰老、抗疲劳、抗肿瘤等多种生理功能,是一种无毒性的具有防病治病作用的海洋生物活性物质角鲨烯在植物中分布很广，但含量不高，多低于植物油中不皂化物的5％，仅少数含量较多如橄榄油橄榄油是所有油类中唯一可不经提炼而直接以原始液态食用的油品，高质量的特级初榨橄榄油含有大量的角鲨烯物质它增加了橄榄油自身的稳定性，延长了食用有效期和保持鲜美口味橄榄油的色泽随榨油机压力的增加而加深：浅黄、黄绿、蓝绿、蓝至蓝黑色色泽深的橄榄油酸值高，酸值大于3时，油味变浓并带有刺激性，不宜食用深色橄榄油比重增大如果浅色油的相对密度(15℃／15℃)大于0.918时，说明掺杂有其它油脂 橄榄油为高级食用油脂，售价较高，所以常有掺伪现象。

为了鉴别，可用下列试验：冷冻试验、硝酸试验、测定油脂的克雷斯美尔值以及红外表征而由于橄榄油中油脂成分复杂，本实验采用氢氧化钾-乙醇溶液皂化，石油醚萃取净化，红外光谱分析检测三、实验部分3.1 材料与仪器橄榄油、角鲨烯标准品、 KOH、 NaCl、无水硫酸钠、正己烷、乙醇；旋转蒸发仪、恒温水浴锅；红外光谱仪（岛津IR Affinity-1傅立叶变换红外光谱仪）3.2 实验步骤I. 橄榄油样品前处理 称取1.0g左右橄榄油样品，放入250 mL磨口锥形瓶中，加入50 mL的2.5 moL/L KOH-乙醇溶液，置于85 oC恒温水浴锅中皂化1 h,移出冷却，转移至500 mL分液漏斗中，加入50 mL饱和NaCl溶液，再加入50 mL石油醚，震摇萃取2 min,静置，待分层后将上层有机相转入250 mL分液漏斗中，下层皂化液再分别加入50 mL、30 mL石油醚，萃取两次，合并3次的石油醚层于250 mL分液漏斗中，每次加入50 mL去离子水洗有机相，洗至中性，有机相过无水硫酸钠脱水（1~2 hr）后，于35 oC水浴中旋转蒸发浓缩至近干，用正己烷溶解并定容至10 mL，待测定II. 样品中角鲨烯的分析鉴定3.2.1冷冻试验 无水橄榄油在2℃的条件下放置5.5小时仍澄清透明。

如若在5.7℃的条件下放置24小时出现混浊，则橄榄油中一定有多量的掺杂油脂3.2.2硝酸试验 橄榄油与硝酸作用不呈显色反应其它油脂与硝酸作用呈棕色取 2 mL左右橄榄油样品放入比色管中,加入几滴硝酸进行观察3.2.3 测定油脂的克雷司美尔值 纯净橄榄油的克雷司美尔值在68.5~71.6℃之间否则其有掺杂克雷司美尔值是在给定的条件下，取5 mL橄榄油样品放入比色管中,加入5 mL等量乙醇(92％)和戊醇混合溶剂，在水浴中（80℃左右）加热溶解，逐渐冷却至溶液发生混浊时的温度数值3.2.4 红外表征 将测定的橄榄油样品IR图与标准谱图比较，并标出主要吸收带的归属，进行定性分析四、思考题1. 什么是皂化反应？试述在本实验中皂化反应的目的？ 2. 分析所测橄榄油样品中红外谱结果，标出主要吸收带的归属。