肿瘤标志物的研究历史.ppt

肿瘤标志物的研究历史肿瘤标志物的研究历史肿瘤标志物的研究历史肿瘤标志物的研究历史l l第第第第1 1 1 1阶段（阶段（阶段（阶段（1963-19781963-19781963-19781963-1978）：癌胚性抗原）：癌胚性抗原）：癌胚性抗原）：癌胚性抗原––1963196319631963年年年年 Abelev Abelev Abelev Abelev AFP AFP AFP AFP––1965196519651965年年年年 Gold & Freeman CEAGold & Freeman CEAGold & Freeman CEAGold & Freeman CEAl l第第第第2 2 2 2阶段（阶段（阶段（阶段（1979-19891979-19891979-19891979-1989）：糖链抗原为主）：糖链抗原为主）：糖链抗原为主）：糖链抗原为主––1980198019801980年年年年 Koprowski CA19-9 Koprowski CA19-9 Koprowski CA19-9 Koprowski CA19-9（（（（1116-NS-19-91116-NS-19-91116-NS-19-91116-NS-19-9））））––1981198119811981年年年年 Bast et al CA125 Bast et al CA125 Bast et al CA125 Bast et al CA125（（（（OC125OC125OC125OC125））））l l第第第第3 3 3 3阶段（阶段（阶段（阶段（1990199019901990以后）：基因标志以后）：基因标志以后）：基因标志以后）：基因标志––肿瘤基因标志肿瘤基因标志肿瘤基因标志肿瘤基因标志第四章第四章第四章第四章 癌基因与抑癌基因癌基因与抑癌基因癌基因与抑癌基因癌基因与抑癌基因1本科癌基因与抑癌基因1910 1910 RousRous 肿瘤病毒肿瘤病毒肿瘤病毒肿瘤病毒 鸡肉瘤上清鸡肉瘤上清鸡肉瘤上清鸡肉瘤上清基因肿瘤标志物研究简史基因肿瘤标志物研究简史1989 1989 EbralidzeEbralidze 肿瘤转移基因肿瘤转移基因肿瘤转移基因肿瘤转移基因 mts1 mts1 鼠乳腺肉瘤鼠乳腺肉瘤鼠乳腺肉瘤鼠乳腺肉瘤1988 1988 Steeg Steeg 肿瘤转移抑制基因肿瘤转移抑制基因肿瘤转移抑制基因肿瘤转移抑制基因 nm23 nm23 鼠黑色素瘤鼠黑色素瘤鼠黑色素瘤鼠黑色素瘤1987 1987 Lee Lee 抑癌基因抑癌基因抑癌基因抑癌基因1986 1986 DryjaDryja 抑制肿瘤生长基因抑制肿瘤生长基因抑制肿瘤生长基因抑制肿瘤生长基因RbRb1976 1976 Bishop Bishop 原癌基因（原癌基因（原癌基因（原癌基因（V-V-srcsrc) )、、、、癌基因癌基因癌基因癌基因 1989 1989 NobelNobel1970 1970 MartinMartin RousRous肉瘤肉瘤肉瘤肉瘤srcsrc基因基因基因基因1960 1960 HuebnerHuebner 病毒肿瘤基因病毒肿瘤基因病毒肿瘤基因病毒肿瘤基因2本科癌基因与抑癌基因癌的病因学曾有癌的病因学曾有癌的病因学曾有癌的病因学曾有 病毒致癌病毒致癌病毒致癌病毒致癌 化学致癌化学致癌化学致癌化学致癌 遗传因素遗传因素遗传因素遗传因素病毒癌基因病毒癌基因病毒癌基因病毒癌基因 ( ( ( (virusvirusvirusvirus oncogene oncogene oncogene oncogene，，，，v-v-v-v-onconconconc) ) ) )正常细胞癌基因正常细胞癌基因正常细胞癌基因正常细胞癌基因 ( ( ( (cellular cellular cellular cellular oncogeneoncogeneoncogeneoncogene，，，，c-c-c-c-onconconconc) ) ) ) 抑癌基因抑癌基因抑癌基因抑癌基因 ( ( ( (suppressor gene) suppressor gene) suppressor gene) suppressor gene) 3本科癌基因与抑癌基因原癌基因一类编码关键性调控蛋白质的正常细胞基因，发生恶变后转变为癌基因的基因序列。

生长因子生长因子受体GTP酶蛋白激酶  核蛋白  DNA合成siserbAmosablerbByesfmssrcrasmycmybfosjunskiros癌基因能参与或直接导致正常细胞发生恶变的任何基因序列4本科癌基因与抑癌基因正常细胞的生长增殖由两大基因调控正常细胞的生长增殖由两大基因调控正常细胞的生长增殖由两大基因调控正常细胞的生长增殖由两大基因调控 正调控信号：促进细胞生长和增殖，并且阻止正调控信号：促进细胞生长和增殖，并且阻止正调控信号：促进细胞生长和增殖，并且阻止正调控信号：促进细胞生长和增殖，并且阻止 其发生终末分化其发生终末分化其发生终末分化其发生终末分化————癌基因 负调控信号：促进细胞成熟，向终末分化，最负调控信号：促进细胞成熟，向终末分化，最负调控信号：促进细胞成熟，向终末分化，最负调控信号：促进细胞成熟，向终末分化，最 后凋亡（后凋亡（后凋亡（后凋亡（apotosisapotosisapotosisapotosis））））————抑癌基因。

抑癌基因抑癌基因抑癌基因 两种信号保持着动态平衡，对正常细胞的生长、两种信号保持着动态平衡，对正常细胞的生长、两种信号保持着动态平衡，对正常细胞的生长、两种信号保持着动态平衡，对正常细胞的生长、增殖、死亡精确地调控，当平衡被破坏，正调控信增殖、死亡精确地调控，当平衡被破坏，正调控信增殖、死亡精确地调控，当平衡被破坏，正调控信增殖、死亡精确地调控，当平衡被破坏，正调控信号基因功能过盛或负调控信号基因失活，导致细胞号基因功能过盛或负调控信号基因失活，导致细胞号基因功能过盛或负调控信号基因失活，导致细胞号基因功能过盛或负调控信号基因失活，导致细胞增殖调控的混乱而使细胞恶变增殖调控的混乱而使细胞恶变增殖调控的混乱而使细胞恶变增殖调控的混乱而使细胞恶变5本科癌基因与抑癌基因一、癌基因一、癌基因一、癌基因一、癌基因( ( ( (oncogeneoncogeneoncogeneoncogene，，，，onconconconc) ) ) )及其表达产物的作用及其表达产物的作用及其表达产物的作用及其表达产物的作用1 1 1 1、定义：、定义：、定义：、定义： 癌基因包括病毒癌基因（癌基因包括病毒癌基因（癌基因包括病毒癌基因（癌基因包括病毒癌基因（v-v-v-v-onconconconc））））和和和和细胞癌基细胞癌基细胞癌基细胞癌基因（因（因（因（c-c-c-c-onconconconc））））两种，具有潜在诱导细胞恶性转化的两种，具有潜在诱导细胞恶性转化的两种，具有潜在诱导细胞恶性转化的两种，具有潜在诱导细胞恶性转化的特征。

特征第一节第一节第一节第一节 癌癌癌癌 基基基基 因因因因6本科癌基因与抑癌基因2 2 2 2、特点：、特点：、特点：、特点：（（（（1 1 1 1））））v-v-v-v-onconconconc是病毒基因组中特殊的核苷酸序列，能是病毒基因组中特殊的核苷酸序列，能是病毒基因组中特殊的核苷酸序列，能是病毒基因组中特殊的核苷酸序列，能 引起细胞转化引起细胞转化引起细胞转化引起细胞转化（（（（2 2 2 2））））c-c-c-c-onconconconc是存在于正常细胞基因组中的癌基因，是存在于正常细胞基因组中的癌基因，是存在于正常细胞基因组中的癌基因，是存在于正常细胞基因组中的癌基因， 在正常情况下处于静止或低表达的状态，不在正常情况下处于静止或低表达的状态，不在正常情况下处于静止或低表达的状态，不在正常情况下处于静止或低表达的状态，不 仅对细胞无害，而且对维持细胞正常功能具仅对细胞无害，而且对维持细胞正常功能具仅对细胞无害，而且对维持细胞正常功能具仅对细胞无害，而且对维持细胞正常功能具 有重要作用，但在异常表达时，其产物可使有重要作用，但在异常表达时，其产物可使有重要作用，但在异常表达时，其产物可使有重要作用，但在异常表达时，其产物可使 细胞无限制分裂。

细胞无限制分裂细胞无限制分裂细胞无限制分裂7本科癌基因与抑癌基因（（（（3 3 3 3）癌基因的表示）癌基因的表示）癌基因的表示）癌基因的表示 用用用用3 3 3 3个斜体小写字母表示，如个斜体小写字母表示，如个斜体小写字母表示，如个斜体小写字母表示，如rasrasrasras、、、、srcsrcsrcsrc、、、、mycmycmycmyc等等等等 病毒癌基因：在其名称前冠以前缀病毒癌基因：在其名称前冠以前缀病毒癌基因：在其名称前冠以前缀病毒癌基因：在其名称前冠以前缀““““v”v”v”v”，，，，如如如如v-v-v-v-rasrasrasras，，，，细胞癌基因：在其名称前冠以前缀细胞癌基因：在其名称前冠以前缀细胞癌基因：在其名称前冠以前缀细胞癌基因：在其名称前冠以前缀““““c”c”c”c”，，，，如如如如c-c-c-c-rasrasrasras8本科癌基因与抑癌基因( ( ( (一一一一) ) ) )病毒癌基因病毒癌基因病毒癌基因病毒癌基因 病毒癌基因是在以病毒癌基因是在以病毒癌基因是在以病毒癌基因是在以RousRousRousRous肉瘤病毒肉瘤病毒肉瘤病毒肉瘤病毒( ( ( (RousRousRousRous sarcoma sarcoma sarcoma sarcoma virusvirusvirusvirus，，，，RSV)RSV)RSV)RSV)为代表的逆转录病毒中发现的。

为代表的逆转录病毒中发现的为代表的逆转录病毒中发现的为代表的逆转录病毒中发现的9本科癌基因与抑癌基因Point mutations identified in human tumorsPoint mutations identified in human tumors10本科癌基因与抑癌基因OncogenOncogenOncogenOncogen amplification in human tumors amplification in human tumors amplification in human tumors amplification in human tumorsSCLC: small cell lung carcinoma11本科癌基因与抑癌基因Chromosomal translocations commonly occurring Chromosomal translocations commonly occurring Chromosomal translocations commonly occurring Chromosomal translocations commonly occurring in human tumorsin human tumorsin human tumorsin human tumors12本科癌基因与抑癌基因 在正常情况下，病毒癌基因无活性，一旦受在正常情况下，病毒癌基因无活性，一旦受在正常情况下，病毒癌基因无活性，一旦受在正常情况下，病毒癌基因无活性，一旦受到辐射或化学致癌剂的影响，就会全部或部分活到辐射或化学致癌剂的影响，就会全部或部分活到辐射或化学致癌剂的影响，就会全部或部分活到辐射或化学致癌剂的影响，就会全部或部分活化，诱导肿瘤的发生。

化，诱导肿瘤的发生化，诱导肿瘤的发生化，诱导肿瘤的发生正常细胞正常细胞正常细胞正常细胞肿瘤细胞肿瘤细胞肿瘤细胞肿瘤细胞13本科癌基因与抑癌基因 ( ( ( (二二二二) ) ) )细胞癌基因细胞癌基因细胞癌基因细胞癌基因 在正常细胞中存在癌基因，在正常细胞中存在癌基因，在正常细胞中存在癌基因，在正常细胞中存在癌基因，被引入正常细胞时能使正常细被引入正常细胞时能使正常细被引入正常细胞时能使正常细被引入正常细胞时能使正常细胞转化为癌细胞将细胞中的胞转化为癌细胞将细胞中的胞转化为癌细胞将细胞中的胞转化为癌细胞将细胞中的这种癌基因称为细胞癌基因这种癌基因称为细胞癌基因这种癌基因称为细胞癌基因这种癌基因称为细胞癌基因( ( ( (c-c-c-c-onconconconc) ) ) ) 或原癌基因或原癌基因或原癌基因或原癌基因( ( ( (proto-proto-proto-proto-onconconconc) ) ) )14本科癌基因与抑癌基因细胞癌基因与细胞癌基因与细胞癌基因与细胞癌基因与病毒癌基因核病毒癌基因核病毒癌基因核病毒癌基因核酸序列有同源酸序列有同源酸序列有同源酸序列有同源性即它们的性即它们的性即它们的性即它们的DNADNADNADNA序列是相序列是相序列是相序列是相对应的，表达对应的，表达对应的，表达对应的，表达产物也基本相产物也基本相产物也基本相产物也基本相同。

同15本科癌基因与抑癌基因细胞癌基因的作用：通过其表达产物蛋白质来体细胞癌基因的作用：通过其表达产物蛋白质来体细胞癌基因的作用：通过其表达产物蛋白质来体细胞癌基因的作用：通过其表达产物蛋白质来体现的，通常根据编码的表达产物的功能现的，通常根据编码的表达产物的功能现的，通常根据编码的表达产物的功能现的，通常根据编码的表达产物的功能 细胞癌基因分类细胞癌基因分类细胞癌基因分类细胞癌基因分类 16本科癌基因与抑癌基因1 1 1 1、、、、sissississis家族家族家族家族 一个基因，即一个基因，即一个基因，即一个基因，即c-c-c-c-sissississis 定位：定位：定位：定位：人类第人类第人类第人类第22222222号染色体，号染色体，号染色体，号染色体，5 5 5 5个外显子个外显子个外显子个外显子编码：编码：编码：编码：241241241241个氨基酸的蛋白质（个氨基酸的蛋白质（个氨基酸的蛋白质（个氨基酸的蛋白质（p28p28p28p28））））特点：特点：特点：特点：与人类的血小板衍生生长因子（与人类的血小板衍生生长因子（与人类的血小板衍生生长因子（与人类的血小板衍生生长因子（PDGFPDGFPDGFPDGF））））有有有有 87% 87% 87% 87%的同源性，可与的同源性，可与的同源性，可与的同源性，可与PDGFPDGFPDGFPDGF受体结合。

受体结合受体结合受体结合17本科癌基因与抑癌基因作用：作用：作用：作用：PDGFPDGFPDGFPDGF能促进结缔组织细胞及神经胶质细胞能促进结缔组织细胞及神经胶质细胞能促进结缔组织细胞及神经胶质细胞能促进结缔组织细胞及神经胶质细胞 的增殖，故的增殖，故的增殖，故的增殖，故c-c-c-c-sissississis作用于作用于作用于作用于PDGFRPDGFRPDGFRPDGFR，，，，可刺激细可刺激细可刺激细可刺激细 胞的生长及转化胞的生长及转化胞的生长及转化胞的生长及转化PDGF/sisPDGF/sis18本科癌基因与抑癌基因2 2 2 2．．．．erberberberb家族家族家族家族 表达产物：表达产物：表达产物：表达产物：细胞骨架蛋白细胞骨架蛋白细胞骨架蛋白细胞骨架蛋白作用：作用：作用：作用：在细胞运动、分裂、信息传递、能量转换、在细胞运动、分裂、信息传递、能量转换、在细胞运动、分裂、信息传递、能量转换、在细胞运动、分裂、信息传递、能量转换、代谢调控以及维持细胞形态方面具有重要作用。

代谢调控以及维持细胞形态方面具有重要作用代谢调控以及维持细胞形态方面具有重要作用代谢调控以及维持细胞形态方面具有重要作用 19本科癌基因与抑癌基因人人人人erberberberb-B-B-B-B编码的是编码的是编码的是编码的是““““掐头掐头掐头掐头””””的表皮生长因子的表皮生长因子的表皮生长因子的表皮生长因子( ( ( (EGF)EGF)EGF)EGF)受体，受体，受体，受体，这个这个这个这个““““截短截短截短截短””””受体和其配体受体和其配体受体和其配体受体和其配体- - - -表皮生长因子长期结合，表皮生长因子长期结合，表皮生长因子长期结合，表皮生长因子长期结合，从而可永远向细胞内传导促进生长的信号从而可永远向细胞内传导促进生长的信号从而可永远向细胞内传导促进生长的信号从而可永远向细胞内传导促进生长的信号与野生型受体与野生型受体与野生型受体与野生型受体相比，跨膜区相比，跨膜区相比，跨膜区相比，跨膜区域无变化，但域无变化，但域无变化，但域无变化，但受体的两端变受体的两端变受体的两端变受体的两端变短，尤其是全短，尤其是全短，尤其是全短，尤其是全部细胞外结构部细胞外结构部细胞外结构部细胞外结构区域都被删除。

区域都被删除区域都被删除区域都被删除20本科癌基因与抑癌基因21本科癌基因与抑癌基因3.3.3.3.srcsrcsrcsrc家族家族家族家族 定位：定位：定位：定位： c-c-c-c-srcsrcsrcsrc定位于第定位于第定位于第定位于第20202020号染色体，号染色体，号染色体，号染色体，17171717个外显子个外显子个外显子个外显子编码：编码：编码：编码： 60 60 60 60kDakDakDakDa的蛋白质的蛋白质的蛋白质的蛋白质, , , ,具酪氨酸蛋白激酶具酪氨酸蛋白激酶具酪氨酸蛋白激酶具酪氨酸蛋白激酶 ( ( ( (tyrosine proteintyrosine proteintyrosine proteintyrosine protein kinase kinase kinase kinase，，，，TPK)TPK)TPK)TPK)活性特点：特点：特点：特点：有一个有一个有一个有一个250250250250个氨基酸组成的同源结构区，个氨基酸组成的同源结构区，个氨基酸组成的同源结构区，个氨基酸组成的同源结构区， 其表达产物均具有其表达产物均具有其表达产物均具有其表达产物均具有TPKTPKTPKTPK活性。

活性 作用：作用：作用：作用：通过激酶的磷酸化作用，使其结构发生改通过激酶的磷酸化作用，使其结构发生改通过激酶的磷酸化作用，使其结构发生改通过激酶的磷酸化作用，使其结构发生改 变，增加激酶对底物的活性，加速生长信变，增加激酶对底物的活性，加速生长信变，增加激酶对底物的活性，加速生长信变，增加激酶对底物的活性，加速生长信 号在胞内的传递，与细胞无限生长关系密号在胞内的传递，与细胞无限生长关系密号在胞内的传递，与细胞无限生长关系密号在胞内的传递，与细胞无限生长关系密 切 22本科癌基因与抑癌基因 23本科癌基因与抑癌基因4 4 4 4．．．．rasrasrasras家族家族家族家族 数量：数量：数量：数量：H-H-H-H-rasrasrasras、、、、K-K-K-K-rasrasrasras、、、、N-N-N-N-rasrasrasras H H H H、、、、K-K-K-K-rasrasrasras分别来自大鼠肉瘤病毒分别来自大鼠肉瘤病毒分别来自大鼠肉瘤病毒分别来自大鼠肉瘤病毒HarveyHarveyHarveyHarvey、、、、KirstenKirstenKirstenKirsten株株株株 N-N-N-N-rasrasrasras从入神经母细胞瘤从入神经母细胞瘤从入神经母细胞瘤从入神经母细胞瘤( ( ( (neuroblastomaneuroblastomaneuroblastomaneuroblastoma) ) ) )中获得中获得中获得中获得 编码：编码：编码：编码：4 4 4 4个外显子组成，个外显子组成，个外显子组成，个外显子组成， 蛋白质为蛋白质为蛋白质为蛋白质为21212121KdKdKdKd特点特点特点特点：编码的氨基酸顺序有：编码的氨基酸顺序有：编码的氨基酸顺序有：编码的氨基酸顺序有85858585％的同源性，主要％的同源性，主要％的同源性，主要％的同源性，主要 位于细胞膜的内侧面，位于细胞膜的内侧面，位于细胞膜的内侧面，位于细胞膜的内侧面，属属属属G G G G蛋白蛋白蛋白蛋白作用：作用：作用：作用：参与细胞增殖信号的细胞内转导过程，是维参与细胞增殖信号的细胞内转导过程，是维参与细胞增殖信号的细胞内转导过程，是维参与细胞增殖信号的细胞内转导过程，是维 持细胞生长和分化的重要信号转换器。

持细胞生长和分化的重要信号转换器持细胞生长和分化的重要信号转换器持细胞生长和分化的重要信号转换器 24本科癌基因与抑癌基因rasrasrasras与与与与GTPGTPGTPGTP结合时为活化状态，结合时为活化状态，结合时为活化状态，结合时为活化状态，GTPGTPGTPGTP水解后，水解后，水解后，水解后，rasrasrasras与与与与GDPGDPGDPGDP结合形式为非活化状态结合形式为非活化状态结合形式为非活化状态结合形式为非活化状态25本科癌基因与抑癌基因26本科癌基因与抑癌基因27本科癌基因与抑癌基因5 5 5 5．．．．mycmycmycmyc家族和家族和家族和家族和mybmybmybmyb家族家族家族家族 数量：数量：数量：数量：c-c-c-c-mycmycmycmyc,N-,N-,N-,N-mycmycmycmyc、、、、L-L-L-L-mycmycmycmyc、、、、R-R-R-R-mycmycmycmyc编码：编码：编码：编码：3 3 3 3个外显子组成，个外显子组成，个外显子组成，个外显子组成，Exon1Exon1Exon1Exon1不编码，缺少不编码，缺少不编码，缺少不编码，缺少ATGATGATGATG，，，，但但但但 多个终止密码子；另外两个外显子表达多个终止密码子；另外两个外显子表达多个终止密码子；另外两个外显子表达多个终止密码子；另外两个外显子表达62-62-62-62- 64 64 64 64kDakDakDakDa或或或或66-6766-6766-6766-67kDakDakDakDa的蛋白的蛋白的蛋白的蛋白 特点：特点：特点：特点：位于核内，属于位于核内，属于位于核内，属于位于核内，属于DNADNADNADNA结合蛋白类，与结合蛋白类，与结合蛋白类，与结合蛋白类，与DNADNADNADNA复制复制复制复制 起动有关起动有关起动有关起动有关 mybmybmybmyb家族编码的产物本身就是反式作用因子，在生长家族编码的产物本身就是反式作用因子，在生长家族编码的产物本身就是反式作用因子，在生长家族编码的产物本身就是反式作用因子，在生长因子调控细胞增殖过程中起重要作用。

因子调控细胞增殖过程中起重要作用因子调控细胞增殖过程中起重要作用因子调控细胞增殖过程中起重要作用作用：作用：作用：作用：两个家族的癌基因产物都位于细胞核内，可两个家族的癌基因产物都位于细胞核内，可两个家族的癌基因产物都位于细胞核内，可两个家族的癌基因产物都位于细胞核内，可 与某些特定与某些特定与某些特定与某些特定DNADNADNADNA相结合，影响相结合，影响相结合，影响相结合，影响DNADNADNADNA复制的起动复制的起动复制的起动复制的起动 过程或对转录进行调控，从而实现其调节细过程或对转录进行调控，从而实现其调节细过程或对转录进行调控，从而实现其调节细过程或对转录进行调控，从而实现其调节细 胞生长、增殖、分化的目的胞生长、增殖、分化的目的胞生长、增殖、分化的目的胞生长、增殖、分化的目的28本科癌基因与抑癌基因29本科癌基因与抑癌基因30本科癌基因与抑癌基因二、原癌基因的激活机制二、原癌基因的激活机制二、原癌基因的激活机制二、原癌基因的激活机制 原癌基因具有正常的生理功能，被激活时又原癌基因具有正常的生理功能，被激活时又原癌基因具有正常的生理功能，被激活时又原癌基因具有正常的生理功能，被激活时又具有致癌能力，因此研究原癌基因如何被激活是具有致癌能力，因此研究原癌基因如何被激活是具有致癌能力，因此研究原癌基因如何被激活是具有致癌能力，因此研究原癌基因如何被激活是很重要的。

很重要的很重要的很重要的 现已证实现已证实现已证实现已证实 射线辐射射线辐射射线辐射射线辐射 化学致癌剂化学致癌剂化学致癌剂化学致癌剂 病毒感染病毒感染病毒感染病毒感染 31本科癌基因与抑癌基因( ( ( (一一一一) ) ) )原癌基因点突变原癌基因点突变原癌基因点突变原癌基因点突变( ( ( (point mutation)point mutation)point mutation)point mutation) 癌基因在编码顺序的特定位置上的某一个核癌基因在编码顺序的特定位置上的某一个核癌基因在编码顺序的特定位置上的某一个核癌基因在编码顺序的特定位置上的某一个核苷酸发生突变，使其表达蛋白质中相应的氨基酸苷酸发生突变，使其表达蛋白质中相应的氨基酸苷酸发生突变，使其表达蛋白质中相应的氨基酸苷酸发生突变，使其表达蛋白质中相应的氨基酸发生变化，从而获得了转化细胞的活性。

发生变化，从而获得了转化细胞的活性发生变化，从而获得了转化细胞的活性发生变化，从而获得了转化细胞的活性 mutationmutation32本科癌基因与抑癌基因33本科癌基因与抑癌基因( ( ( (二二二二) ) ) )原癌基因获得外源启动子而激活原癌基因获得外源启动子而激活原癌基因获得外源启动子而激活原癌基因获得外源启动子而激活 肿瘤细胞中原癌基因的表达水平可以其转录肿瘤细胞中原癌基因的表达水平可以其转录肿瘤细胞中原癌基因的表达水平可以其转录肿瘤细胞中原癌基因的表达水平可以其转录的的的的mRNAmRNAmRNAmRNA或翻译产物蛋白质的含量来表示或翻译产物蛋白质的含量来表示或翻译产物蛋白质的含量来表示或翻译产物蛋白质的含量来表示 在原癌基因的上游插入外源性启动子或增强在原癌基因的上游插入外源性启动子或增强在原癌基因的上游插入外源性启动子或增强在原癌基因的上游插入外源性启动子或增强子可激活原癌基因，使其表达产物增多子可激活原癌基因，使其表达产物增多子可激活原癌基因，使其表达产物增多子可激活原癌基因，使其表达产物增多 病毒的增强子常位于病毒的增强子常位于病毒的增强子常位于病毒的增强子常位于5’5’5’5’端的长末端重复序端的长末端重复序端的长末端重复序端的长末端重复序列列列列(1(1(1(1ongongongong terminal repeat terminal repeat terminal repeat terminal repeat，，，，LTR)LTR)LTR)LTR)内。

如果增强内如果增强内如果增强内如果增强子插入到原癌基因的附近或远处，均使之激活，子插入到原癌基因的附近或远处，均使之激活，子插入到原癌基因的附近或远处，均使之激活，子插入到原癌基因的附近或远处，均使之激活，促使癌基因的表达比正常表达增高几十甚至上百促使癌基因的表达比正常表达增高几十甚至上百促使癌基因的表达比正常表达增高几十甚至上百促使癌基因的表达比正常表达增高几十甚至上百倍 34本科癌基因与抑癌基因35本科癌基因与抑癌基因36本科癌基因与抑癌基因 ( ( ( (三三三三) ) ) )原癌基因甲基化程度降低而激活原癌基因甲基化程度降低而激活原癌基因甲基化程度降低而激活原癌基因甲基化程度降低而激活 DNADNADNADNA分子中的甲基化分子中的甲基化分子中的甲基化分子中的甲基化( ( ( (methylationmethylationmethylationmethylation) ) ) )对阻抑基对阻抑基对阻抑基对阻抑基因的转录具有重要作用因的转录具有重要作用。

因的转录具有重要作用因的转录具有重要作用37本科癌基因与抑癌基因现已发现在结肠腺癌和小细胞肺癌的细胞中，现已发现在结肠腺癌和小细胞肺癌的细胞中，现已发现在结肠腺癌和小细胞肺癌的细胞中，现已发现在结肠腺癌和小细胞肺癌的细胞中，rasrasrasras基因的基因的基因的基因的DNADNADNADNA甲基化水平比其邻近的正常细胞明甲基化水平比其邻近的正常细胞明甲基化水平比其邻近的正常细胞明甲基化水平比其邻近的正常细胞明显偏低，提示某些原癌基因是由于甲基化程度降显偏低，提示某些原癌基因是由于甲基化程度降显偏低，提示某些原癌基因是由于甲基化程度降显偏低，提示某些原癌基因是由于甲基化程度降低而激活低而激活低而激活低而激活                                                                 38本科癌基因与抑癌基因 ( ( ( (四四四四) ) ) )原癌基因的拷贝数增加原癌基因的拷贝数增加原癌基因的拷贝数增加原癌基因的拷贝数增加基因扩增基因扩增基因扩增基因扩增( ( ( (amplification)amplification)amplification)amplification)：：：： 某些癌基因通过一些机制在原来的染色体上某些癌基因通过一些机制在原来的染色体上某些癌基因通过一些机制在原来的染色体上某些癌基因通过一些机制在原来的染色体上复制多个拷贝，超出了正常细胞的癌基因剂量，复制多个拷贝，超出了正常细胞的癌基因剂量，复制多个拷贝，超出了正常细胞的癌基因剂量，复制多个拷贝，超出了正常细胞的癌基因剂量，导致基因产物的增加，从而使细胞正常功能紊乱。

导致基因产物的增加，从而使细胞正常功能紊乱导致基因产物的增加，从而使细胞正常功能紊乱导致基因产物的增加，从而使细胞正常功能紊乱例如：例如：例如：例如： 人视网膜母细胞瘤：人视网膜母细胞瘤：人视网膜母细胞瘤：人视网膜母细胞瘤：N-N-N-N-mycmycmycmyc扩增了扩增了扩增了扩增了10-20010-20010-20010-200倍，倍，倍，倍，相应的相应的相应的相应的mRNAmRNAmRNAmRNA和蛋白质产物也都大量增加和蛋白质产物也都大量增加和蛋白质产物也都大量增加和蛋白质产物也都大量增加39本科癌基因与抑癌基因40本科癌基因与抑癌基因41本科癌基因与抑癌基因 ( ( ( (五五五五) ) ) )基因易位或重排使原癌基因激活基因易位或重排使原癌基因激活基因易位或重排使原癌基因激活基因易位或重排使原癌基因激活 基因易位（基因易位（基因易位（基因易位（translocationtranslocationtranslocationtranslocation））））基因重排（基因重排（基因重排（基因重排（rearrangemantrearrangemantrearrangemantrearrangemant）：）：）：）： 有些癌基因从其染色体的正常位置转移到另一染色有些癌基因从其染色体的正常位置转移到另一染色有些癌基因从其染色体的正常位置转移到另一染色有些癌基因从其染色体的正常位置转移到另一染色体的某个位置，由于调控环境发生变化，导致从相对静体的某个位置，由于调控环境发生变化，导致从相对静体的某个位置，由于调控环境发生变化，导致从相对静体的某个位置，由于调控环境发生变化，导致从相对静止状态变成激活状态，使原癌基因表达产物显著增加而止状态变成激活状态，使原癌基因表达产物显著增加而止状态变成激活状态，使原癌基因表达产物显著增加而止状态变成激活状态，使原癌基因表达产物显著增加而导致肿瘤的发生。

导致肿瘤的发生导致肿瘤的发生导致肿瘤的发生42本科癌基因与抑癌基因人人人人 c c - -c c - -m m y yc cm m y yc c基基 因因 定定 位位 于于基基 因因 定定 位位 于于8 8 8 8q q2 24 4q q2 24 4，，，，可可易易位位到到可可易易位位到到 I Ig gH HI Ig gH H ( ( ( (定定定定位位 于于位位 于于 1 14 41 14 4q q3 32 2) )q q3 32 2) )、、、、l lg gl lg gκκ ( (κκ ( (定定定定位位 于于位位 于于 2 2 2 2p p1 12 2) )p p1 12 2) )、、、、I Ig gI Ig gλλ( (λλ( (定定 位位定定 位位于于于于2 22 22 22 2q q1 11 1) )q q1 11 1) )基基因因的的高高活活性性基基因因的的高高活活性性转转录录区区，，从从而而组组成成一一个个转转录录区区，，从从而而组组成成一一个个c c - -c c - -m m y yc cm m y yc c基基因因的的高高转转录录活活基基因因的的高高转转录录活活性性的的重重排排基基因因，，启启动动性性的的重重排排基基因因，，启启动动 c c- -c c- -m m y yc cm m y yc c转转录录，，使使转转录录，，使使 c c- -c c- -m m y yc cm m y yc c基基 因因基基 因因表表达达增增强强，，促促进进细细胞胞恶恶表表达达增增强强，，促促进进细细胞胞恶恶变变，，最最终终导导致致肿肿瘤瘤的的发发变变，，最最终终导导致致肿肿瘤瘤的的发发生生。

43本科癌基因与抑癌基因 染色体易位使位于染色体易位使位于染色体易位使位于染色体易位使位于9 9 9 9q34q34q34q34的的的的c-c-c-c-ablablablabl基因转移到基因转移到基因转移到基因转移到第第第第22222222对染色体上，重排形成对染色体上，重排形成对染色体上，重排形成对染色体上，重排形成bcrbcrbcrbcr- - - -ablablablabl融合基因，融合基因，融合基因，融合基因，使表达增高，蛋白质产物也由使表达增高，蛋白质产物也由使表达增高，蛋白质产物也由使表达增高，蛋白质产物也由p145p145p145p145变成变成变成变成p210p210p210p210，，，，其其其其酪氨酸蛋白激酶活性大为增加，导致慢性粒细胞酪氨酸蛋白激酶活性大为增加，导致慢性粒细胞酪氨酸蛋白激酶活性大为增加，导致慢性粒细胞酪氨酸蛋白激酶活性大为增加，导致慢性粒细胞白血病的发生白血病的发生白血病的发生白血病的发生44本科癌基因与抑癌基因 第二节第二节第二节第二节 抑癌基因抑癌基因抑癌基因抑癌基因 抑癌基因抑癌基因抑癌基因抑癌基因( ( ( (suppresser gene)suppresser gene)suppresser gene)suppresser gene)又称抗癌基因又称抗癌基因又称抗癌基因又称抗癌基因( ( ( (anti-anti-anti-anti-onconconconc) ) ) )，，，，是存在于正常细胞内的一类可抑制细胞是存在于正常细胞内的一类可抑制细胞是存在于正常细胞内的一类可抑制细胞是存在于正常细胞内的一类可抑制细胞生长的基因，并有潜在抑癌作用。

当这类基因发生突生长的基因，并有潜在抑癌作用当这类基因发生突生长的基因，并有潜在抑癌作用当这类基因发生突生长的基因，并有潜在抑癌作用当这类基因发生突变、缺失或失活时，可引起细胞恶性转化而导致肿瘤变、缺失或失活时，可引起细胞恶性转化而导致肿瘤变、缺失或失活时，可引起细胞恶性转化而导致肿瘤变、缺失或失活时，可引起细胞恶性转化而导致肿瘤的发生 45本科癌基因与抑癌基因46本科癌基因与抑癌基因一、抑癌基因及其表达产物一、抑癌基因及其表达产物一、抑癌基因及其表达产物一、抑癌基因及其表达产物 抑癌基因与调控细胞分裂和分化过程相关，抑癌基因与调控细胞分裂和分化过程相关，抑癌基因与调控细胞分裂和分化过程相关，抑癌基因与调控细胞分裂和分化过程相关，可能与生长因子、某些蛋白激酶类活性密切相关，可能与生长因子、某些蛋白激酶类活性密切相关，可能与生长因子、某些蛋白激酶类活性密切相关，可能与生长因子、某些蛋白激酶类活性密切相关，只是抑癌基因给予细胞的信号与原癌基因相反只是抑癌基因给予细胞的信号与原癌基因相反只是抑癌基因给予细胞的信号与原癌基因相反只是抑癌基因给予细胞的信号与原癌基因相反。

47本科癌基因与抑癌基因二、抑癌基因失活机理二、抑癌基因失活机理二、抑癌基因失活机理二、抑癌基因失活机理1 1 1 1、视网膜母细胞瘤、视网膜母细胞瘤、视网膜母细胞瘤、视网膜母细胞瘤( ( ( (retinoretinoretinoretino- - - -blastomablastomablastomablastoma，，，，RbRbRbRb) ) ) )（（（（1 1 1 1））））特点：特点：特点：特点：★★★★基因组成：基因组成：基因组成：基因组成：27272727个外显子，个外显子，个外显子，个外显子，3-173-173-173-17外显于区域是基外显于区域是基外显于区域是基外显于区域是基 因重组和突变的热点因重组和突变的热点因重组和突变的热点因重组和突变的热点★★★★编码：编码：编码：编码：p105p105p105p105的蛋白质，其有结合的蛋白质，其有结合的蛋白质，其有结合的蛋白质，其有结合DNADNADNADNA的活性，可的活性，可的活性，可的活性，可 受多种激酶系统催化而发生磷酸化。

受多种激酶系统催化而发生磷酸化受多种激酶系统催化而发生磷酸化受多种激酶系统催化而发生磷酸化48本科癌基因与抑癌基因 （（（（2 2 2 2）作用：）作用：）作用：）作用： 不同程度磷酸化后，都可使不同程度磷酸化后，都可使不同程度磷酸化后，都可使不同程度磷酸化后，都可使p105p105p105p105活性缺乏或完活性缺乏或完活性缺乏或完活性缺乏或完全消失非磷酸化的全消失非磷酸化的全消失非磷酸化的全消失非磷酸化的RbRbRbRb可防止细胞增殖，当可防止细胞增殖，当可防止细胞增殖，当可防止细胞增殖，当DNADNADNADNA肿肿肿肿瘤病毒抗原结合了非磷酸化的瘤病毒抗原结合了非磷酸化的瘤病毒抗原结合了非磷酸化的瘤病毒抗原结合了非磷酸化的RbRbRbRb时，时，时，时，RbRbRbRb的活性就受的活性就受的活性就受的活性就受到抑制，使细胞转化为无限增殖状态，形成肿瘤到抑制，使细胞转化为无限增殖状态，形成肿瘤到抑制，使细胞转化为无限增殖状态，形成肿瘤到抑制，使细胞转化为无限增殖状态，形成肿瘤49本科癌基因与抑癌基因G2MG1SRBRBE2FE2FPPPRB dephospholatedE2F releasedactivates transcriptionRB binds E2F blocks G1/S transitionRBPPPRB phospholatedRB phospholationrelease cycle blockRepresses target genesRB--tumor suppressor50本科癌基因与抑癌基因对于大量来自视网膜母细胞瘤的对于大量来自视网膜母细胞瘤的对于大量来自视网膜母细胞瘤的对于大量来自视网膜母细胞瘤的RbRbRbRb基因序列进行基因序列进行基因序列进行基因序列进行分析，发现分析，发现分析，发现分析，发现RbRbRbRb基因完全或部分发生缺失；另一些基因完全或部分发生缺失；另一些基因完全或部分发生缺失；另一些基因完全或部分发生缺失；另一些RbRbRbRb肿瘤中，基因完整，但序列分析显示有一个突肿瘤中，基因完整，但序列分析显示有一个突肿瘤中，基因完整，但序列分析显示有一个突肿瘤中，基因完整，但序列分析显示有一个突变，它常发生于剪接点上变，它常发生于剪接点上变，它常发生于剪接点上变，它常发生于剪接点上，，，，由于这一变异导致由于这一变异导致由于这一变异导致由于这一变异导致Rb Rb Rb Rb mRNAmRNAmRNAmRNA组装时有外显于被漏掉，因而产生异常组装时有外显于被漏掉，因而产生异常组装时有外显于被漏掉，因而产生异常组装时有外显于被漏掉，因而产生异常RbRbRbRb蛋蛋蛋蛋白质。

白质 51本科癌基因与抑癌基因 抑癌基因又称为隐性癌基因抑癌基因又称为隐性癌基因抑癌基因又称为隐性癌基因抑癌基因又称为隐性癌基因                       基因基因基因基因1 1 1 1 基因基因基因基因2 2 2 2原癌原癌原癌原癌基因基因基因基因 M W M W M W M W 肿瘤肿瘤肿瘤肿瘤抑癌基因抑癌基因抑癌基因抑癌基因 M WM WM WM W M M M M M M M M 肿瘤肿瘤肿瘤肿瘤52本科癌基因与抑癌基因（（（（2 2 2 2））））p53p53p53p53基因基因基因基因★★★★特点：特点：特点：特点：17171717p13p13p13p13，，，，11111111个外显子，个外显子，个外显子，个外显子，10101010个内含子个内含子个内含子个内含子★★★★编码：编码：编码：编码：393393393393个氨基酸，个氨基酸，个氨基酸，个氨基酸，p53p53p53p5353本科癌基因与抑癌基因★★★★作用：产物能结合作用：产物能结合作用：产物能结合作用：产物能结合DNADNADNADNA和被磷酸化。

和被磷酸化和被磷酸化和被磷酸化1 1 1 1）抑制肿瘤细胞停滞在修复前期不能进入）抑制肿瘤细胞停滞在修复前期不能进入）抑制肿瘤细胞停滞在修复前期不能进入）抑制肿瘤细胞停滞在修复前期不能进入S S S S期期期期复制复制复制复制DNADNADNADNA而促使细胞凋亡而促使细胞凋亡而促使细胞凋亡而促使细胞凋亡54本科癌基因与抑癌基因55本科癌基因与抑癌基因56本科癌基因与抑癌基因野生型野生型野生型野生型p53p53p53p53的蛋白质的蛋白质的蛋白质的蛋白质 p53p53p53p53下调下调下调下调bclbclbclbcl-2-2-2-2而而而而上调上调上调上调baxbaxbaxbax，，，，促进细胞促进细胞促进细胞促进细胞凋亡过程向丢失凋亡过程向丢失凋亡过程向丢失凋亡过程向丢失p53p53p53p53等位基因的肿瘤等位基因的肿瘤等位基因的肿瘤等位基因的肿瘤细胞中导入野生型细胞中导入野生型细胞中导入野生型细胞中导入野生型p53p53p53p53就会使肿瘤细胞就会使肿瘤细胞就会使肿瘤细胞就会使肿瘤细胞凋亡凋亡凋亡凋亡57本科癌基因与抑癌基因肝细胞癌肝细胞癌肝细胞癌肝细胞癌p53p53p53p53基因基因基因基因249249249249位位位位G → TG → TG → TG → T58本科癌基因与抑癌基因DNA damage p53Inhibition of cyclin/Cdk complexes PCNA bax fas bcl-2Reactiveoxygen speciesCell-cycle arrest at G1ApoptosisInhibition of DNA replication p21 Gadd45Other effectsTranscriptionaleffects59本科癌基因与抑癌基因三．肿瘤发生中的基因变化三．肿瘤发生中的基因变化三．肿瘤发生中的基因变化三．肿瘤发生中的基因变化 ( ( ( (一一一一) ) ) )肿瘤发生学说肿瘤发生学说肿瘤发生学说肿瘤发生学说 多种致癌因素综合作用的结果多种致癌因素综合作用的结果多种致癌因素综合作用的结果多种致癌因素综合作用的结果 物理因素物理因素物理因素物理因素( ( ( (如紫外线、电离辐射等如紫外线、电离辐射等如紫外线、电离辐射等如紫外线、电离辐射等) ) ) ) 化学因素化学因素化学因素化学因素( ( ( (如黄曲霉毒素如黄曲霉毒素如黄曲霉毒素如黄曲霉毒素) ) ) ) 生物因素生物因素生物因素生物因素( ( ( (DNADNADNADNA或或或或RNARNARNARNA致癌病毒致癌病毒致癌病毒致癌病毒) ) ) ) 经多次打击多阶段变化便形成了肿瘤。

经多次打击多阶段变化便形成了肿瘤经多次打击多阶段变化便形成了肿瘤经多次打击多阶段变化便形成了肿瘤 60本科癌基因与抑癌基因 1 1 1 1、启动阶段、启动阶段、启动阶段、启动阶段 ◆◆◆◆启动因子作用：启动因子作用：启动因子作用：启动因子作用： 细胞的细胞的细胞的细胞的DNADNADNADNA分子已发生改变，但表型仍显示正常分子已发生改变，但表型仍显示正常分子已发生改变，但表型仍显示正常分子已发生改变，但表型仍显示正常◆◆◆◆剂量：剂量：剂量：剂量： 以极低剂量与细胞接触一次，即可启动细胞癌以极低剂量与细胞接触一次，即可启动细胞癌以极低剂量与细胞接触一次，即可启动细胞癌以极低剂量与细胞接触一次，即可启动细胞癌变过程，各种干细胞及处于增殖状态的细胞比静止状变过程，各种干细胞及处于增殖状态的细胞比静止状变过程，各种干细胞及处于增殖状态的细胞比静止状变过程，各种干细胞及处于增殖状态的细胞比静止状态的细胞对启动因子的作用更加敏感态的细胞对启动因子的作用更加敏感态的细胞对启动因子的作用更加敏感。

态的细胞对启动因子的作用更加敏感61本科癌基因与抑癌基因2 2 2 2、促癌阶段、促癌阶段、促癌阶段、促癌阶段 ◆ ◆ ◆ ◆癌前细胞（表型正癌前细胞（表型正癌前细胞（表型正癌前细胞（表型正常而常而常而常而DNADNADNADNA已发生变化）已发生变化）已发生变化）已发生变化） 在启动因子和促在启动因子和促在启动因子和促在启动因子和促癌因子的协同作用下，癌因子的协同作用下，癌因子的协同作用下，癌因子的协同作用下，细胞的表型发生变化，细胞的表型发生变化，细胞的表型发生变化，细胞的表型发生变化，表现出癌细胞的表型表现出癌细胞的表型表现出癌细胞的表型表现出癌细胞的表型 62本科癌基因与抑癌基因3 3 3 3、转化阶段、转化阶段、转化阶段、转化阶段 已恶变的细胞进入已恶变的细胞进入已恶变的细胞进入已恶变的细胞进入自主分裂增殖状态促自主分裂增殖状态促自主分裂增殖状态促自主分裂增殖状态促癌阶段形成的增生性病癌阶段形成的增生性病癌阶段形成的增生性病癌阶段形成的增生性病灶会进一步浸润、转移。

灶会进一步浸润、转移灶会进一步浸润、转移灶会进一步浸润、转移63本科癌基因与抑癌基因 1234564本科癌基因与抑癌基因实验证：实验证：实验证：实验证： 肿瘤是由多步骤多阶段或多次打击而发生的肿瘤是由多步骤多阶段或多次打击而发生的肿瘤是由多步骤多阶段或多次打击而发生的肿瘤是由多步骤多阶段或多次打击而发生的疾病人类结肠癌的发展需要人类结肠癌的发展需要人类结肠癌的发展需要人类结肠癌的发展需要5-65-65-65-6个步骤的顺序个步骤的顺序个步骤的顺序个步骤的顺序 ● ● ● ●rasrasrasras的突变的突变的突变的突变 ● ● ● ●抑癌基因家族性多发性腺癌（抑癌基因家族性多发性腺癌（抑癌基因家族性多发性腺癌（抑癌基因家族性多发性腺癌（FAPFAPFAPFAP）、）、）、）、结肠结肠结肠结肠 癌缺失癌缺失癌缺失癌缺失( ( ( (DCC)DCC)DCC)DCC)的丢失的丢失的丢失的丢失 ● ● ● ● c-c-c-c-mycmycmycmyc基因的过度表达基因的过度表达基因的过度表达基因的过度表达 ● ● ● ● p53p53p53p53的缺失的缺失的缺失的缺失是这些变化的积累，而不是它们之间发生的顺序是这些变化的积累，而不是它们之间发生的顺序是这些变化的积累，而不是它们之间发生的顺序是这些变化的积累，而不是它们之间发生的顺序。

65本科癌基因与抑癌基因66本科癌基因与抑癌基因67本科癌基因与抑癌基因 （二）原癌基因的激活（二）原癌基因的激活（二）原癌基因的激活（二）原癌基因的激活1 1 1 1、、、、rasrasrasras基因的变异基因的变异基因的变异基因的变异2 2 2 2．．．．mycmycmycmyc基因的变异基因的变异基因的变异基因的变异68本科癌基因与抑癌基因 ( ( ( (三三三三) ) ) )抑癌基因的失活抑癌基因的失活抑癌基因的失活抑癌基因的失活1 1 1 1、、、、RbRbRbRb基因的失活基因的失活基因的失活基因的失活2 2 2 2、、、、p53p53p53p53基因的失活基因的失活基因的失活基因的失活 3 3 3 3、其他：、其他：、其他：、其他： BRCA1BRCA1BRCA1BRCA1和和和和BRCA2BRCA2BRCA2BRCA2：：：：与遗传性高发乳腺癌相关的与遗传性高发乳腺癌相关的与遗传性高发乳腺癌相关的与遗传性高发乳腺癌相关的基因，与卵巢癌的发生也紧密相关基因，与卵巢癌的发生也紧密相关基因，与卵巢癌的发生也紧密相关。

基因，与卵巢癌的发生也紧密相关 69本科癌基因与抑癌基因第三节第三节第三节第三节 原癌基因与抑癌基因的检测及评价原癌基因与抑癌基因的检测及评价原癌基因与抑癌基因的检测及评价原癌基因与抑癌基因的检测及评价l l基因检测基因检测基因检测基因检测核酸扩增核酸扩增核酸扩增核酸扩增: : : : PCR, RT-PCRPCR, RT-PCRPCR, RT-PCRPCR, RT-PCR凝胶电泳凝胶电泳凝胶电泳凝胶电泳: : : : DGGF (DGGF (DGGF (DGGF (变性梯度凝胶电泳）变性梯度凝胶电泳）变性梯度凝胶电泳）变性梯度凝胶电泳）核酸杂交核酸杂交核酸杂交核酸杂交: : : : Southern blot , Northern blot, Southern blot , Northern blot, Southern blot , Northern blot, Southern blot , Northern blot, FISHFISHFISHFISH 基因芯片技术基因芯片技术基因芯片技术基因芯片技术l l基因产物的检测基因产物的检测基因产物的检测基因产物的检测蛋白质蛋白质蛋白质蛋白质: : : : 原位检测，原位检测，原位检测，原位检测，ELISA, RIA ELISA, RIA ELISA, RIA ELISA, RIA 70本科癌基因与抑癌基因一、检测方法：一、检测方法：一、检测方法：一、检测方法：1 1 1 1、、、、PCRPCRPCRPCR／／／／ASOASOASOASO探针法探针法探针法探针法( ( ( (PCR-allele-specific PCR-allele-specific PCR-allele-specific PCR-allele-specific oligonucleotide oligonucleotide oligonucleotide oligonucleotide 该方法快速、灵敏度高，但点突变的检出仅该方法快速、灵敏度高，但点突变的检出仅该方法快速、灵敏度高，但点突变的检出仅该方法快速、灵敏度高，但点突变的检出仅限于突变探针的探测位点，不能检出探针邻近部限于突变探针的探测位点，不能检出探针邻近部限于突变探针的探测位点，不能检出探针邻近部限于突变探针的探测位点，不能检出探针邻近部位的点突变。

位的点突变位的点突变位的点突变71本科癌基因与抑癌基因2 2 2 2、、、、限制性片段长度多态性限制性片段长度多态性限制性片段长度多态性限制性片段长度多态性( ( ( (RFLP)RFLP)RFLP)RFLP)分析分析分析分析72本科癌基因与抑癌基因3 3 3 3、、、、PCR-SSCPPCR-SSCPPCR-SSCPPCR-SSCP、、、、测序等测序等测序等测序等 突变更易于检出，扩增的突变更易于检出，扩增的突变更易于检出，扩增的突变更易于检出，扩增的DNADNADNADNA片段在非变性凝胶片段在非变性凝胶片段在非变性凝胶片段在非变性凝胶电泳中，因电泳迁移率不同，所有突变的电泳中，因电泳迁移率不同，所有突变的电泳中，因电泳迁移率不同，所有突变的电泳中，因电泳迁移率不同，所有突变的rasrasrasras基因基因基因基因均可与相应的正常基因区分开来并且，若同一均可与相应的正常基因区分开来并且，若同一均可与相应的正常基因区分开来并且，若同一均可与相应的正常基因区分开来并且，若同一位点发生不同核苷酸替代形成的点突变，或同一位点发生不同核苷酸替代形成的点突变，或同一位点发生不同核苷酸替代形成的点突变，或同一位点发生不同核苷酸替代形成的点突变，或同一核苷酸在不同位点替代形成的点突变，均可显示核苷酸在不同位点替代形成的点突变，均可显示核苷酸在不同位点替代形成的点突变，均可显示核苷酸在不同位点替代形成的点突变，均可显示不同的电泳迁移率。

不同的电泳迁移率不同的电泳迁移率不同的电泳迁移率73本科癌基因与抑癌基因4、Southern BlotDNA digestion with restriction endonucleaseTransfer of the DNA to a membraneHybridization with a specific probeautographyElectrophoresis of the DNA74本科癌基因与抑癌基因Single-color FISHdouble-color FISHDetection of the BCR, ABL and BCR-ABL genes by single- and dual-color fluorescence in situ hybridization (FISH). represents signals for ABL, for BCR. Chromosome are shown on the left and interphase nuclei on the right9 22 NormalPh1-positiveNormalPh1-positive75本科癌基因与抑癌基因基因芯片基因芯片Stanford Stanford 乳腺癌微矩阵乳腺癌微矩阵( (PerouPerou et al.1999) et al.1999)76本科癌基因与抑癌基因三、肿瘤相关基因检测的临床应用与评价三、肿瘤相关基因检测的临床应用与评价三、肿瘤相关基因检测的临床应用与评价三、肿瘤相关基因检测的临床应用与评价 只有极少数人肿瘤与其相关基因有密切特异只有极少数人肿瘤与其相关基因有密切特异只有极少数人肿瘤与其相关基因有密切特异只有极少数人肿瘤与其相关基因有密切特异性，如视网膜母细胞瘤与性，如视网膜母细胞瘤与性，如视网膜母细胞瘤与性，如视网膜母细胞瘤与RbRbRbRb基因、家族性结肠息基因、家族性结肠息基因、家族性结肠息基因、家族性结肠息肉与肉与肉与肉与APCAPCAPCAPC基因具有很高特异性，大多数肿瘤还不基因具有很高特异性，大多数肿瘤还不基因具有很高特异性，大多数肿瘤还不基因具有很高特异性，大多数肿瘤还不可能归纳出特异的基因改变。

可能归纳出特异的基因改变可能归纳出特异的基因改变可能归纳出特异的基因改变 肿瘤的基因诊断尚不能作为第一诊断手段肿瘤的基因诊断尚不能作为第一诊断手段肿瘤的基因诊断尚不能作为第一诊断手段肿瘤的基因诊断尚不能作为第一诊断手段 77本科癌基因与抑癌基因与肿瘤诊断有关的癌基因与肿瘤诊断有关的癌基因1.1.1.1.在肿瘤中较普遍表达：在肿瘤中较普遍表达：在肿瘤中较普遍表达：在肿瘤中较普遍表达：c-c-c-c-mycmycmycmyc、、、、c-c-c-c-fosfosfosfos、、、、H-H-H-H-rasrasrasras、、、、k-k-k-k-rasrasrasras2.2.2.2.在肿瘤中特异性表达：在肿瘤中特异性表达：在肿瘤中特异性表达：在肿瘤中特异性表达：c-c-c-c-ablablablabl、、、、c-sisc-sisc-sisc-sis3.3.3.3.临床意义尚不明确：临床意义尚不明确：临床意义尚不明确：临床意义尚不明确：c-c-c-c-mosmosmosmos、、、、cyescyescyescyes、、、、cfpscfpscfpscfps、、、、c-sacc-sacc-sacc-sac等等等等l l白血病：白血病：白血病：白血病：ablablablabl、、、、rasrasrasras；；；；l l多发性结肠息肉：多发性结肠息肉：多发性结肠息肉：多发性结肠息肉：c-c-c-c-mycmycmycmycl l结肠癌，胰腺癌，肺癌：结肠癌，胰腺癌，肺癌：结肠癌，胰腺癌，肺癌：结肠癌，胰腺癌，肺癌：rasrasrasrasl l乳腺癌，卵巢癌：乳腺癌，卵巢癌：乳腺癌，卵巢癌：乳腺癌，卵巢癌：BRCA1BRCA1BRCA1BRCA1、、、、c-c-c-c-erbBerbBerbBerbB-2-2-2-278本科癌基因与抑癌基因1) 1) OncogeneOncogene amplification : amplification : neuroblastomaneuroblastoma N-N-mycmyc, C-, C-erberb-B2-B2 2) 2) Oncogene overexpressionOncogene overexpression : : small cell lung carcinomasmall cell lung carcinoma C-C-mycmyc 3) 3) OncogeneOncogene mutation : mutation : bladder cancerbladder cancer H-H-rasras 4) Suppressor gene deletion : 4) Suppressor gene deletion : retinoblastoma retinoblastoma RB geneRB gene肿瘤的早期诊断和筛检肿瘤的早期诊断和筛检肿瘤的早期诊断和筛检肿瘤的早期诊断和筛检肿瘤相关基因的临床应用肿瘤相关基因的临床应用肿瘤相关基因的临床应用肿瘤相关基因的临床应用79本科癌基因与抑癌基因复习思考题复习思考题名词解释：名词解释：名词解释：名词解释：癌基因癌基因癌基因癌基因细胞癌基因细胞癌基因细胞癌基因细胞癌基因基因扩增基因扩增基因扩增基因扩增抑癌基因抑癌基因抑癌基因抑癌基因点突变点突变点突变点突变简答题：简答题：简答题：简答题：1 1 1 1、简述原癌基因的激活机制。

简述原癌基因的激活机制简述原癌基因的激活机制简述原癌基因的激活机制2 2 2 2、简述肿瘤发生机制简述肿瘤发生机制简述肿瘤发生机制简述肿瘤发生机制80本科癌基因与抑癌基因81本科癌基因与抑癌基因。