邻二氮菲分光光度法测定铁(共2页).doc

精选优质文档-----倾情为你奉上实验二 邻二氮菲分光光度法测定铁的含量一、实验目的1．掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的方法;2．了解分光光度计的构造、性能及使用方法二、实验原理邻二氮菲（又称邻菲罗啉）是测定微量铁的较好试剂，在pH=2～9的条件下，二价铁离子与试剂生成极稳定的橙红色配合物配合物的＝21.3，摩尔吸光系数＝11000 Lmol-1cm-1在显色前，用盐酸羟胺把三价铁离子还原为二价铁离子4Fe3+＋2NH2OH→4Fe2+ ＋ N2O ＋ 4H＋＋ H2O测定时，控制溶液pH＝3较为适宜，酸度高时，反应进行较慢，酸度太低，则二价铁离子水解，影响显色用邻二氮菲测定时，有很多元素干扰测定，须预先进行掩蔽或分离，如钴、镍、铜、铅与试剂形成有色配合物；钨、铂、镉、汞与试剂生成沉淀，还有些金属离子如锡、铅、铋则在邻二氮菲铁配合物形成的pH范围内发生水解；因此当这些离子共存时，应注意消除它们的干扰作用三、仪器与试剂1．醋酸 钠：l molL-1；2．氢氧化钠：0.4 molL-1；3．盐 酸：2 molL-1；、4．盐酸羟胺：10％（临时配制）；5．邻二氮菲（0.1%）：0.lg邻二氮菲溶解在100mL1:1乙醇溶液中。

6．铁标准溶液(1)10-4molL-1铁标准溶液：准确称取0.1961g（NH4）2 Fe（SO4）26H20于烧杯中，用2 molL-1盐酸15 mL溶解，移至500 mL容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀；再准确稀释10倍成为含铁10 - 4molL-l标准溶液2)10 μgmL-1（即0.01 mgmL-1）铁标准溶液：准确称取0.3511g（NH4）2 Fe（SO4）26H20于烧杯中，用2 molL-l盐酸15 mL溶解，移入500 mL容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀再准确稀释10倍成为含铁10 ugmL-1标准溶液如以硫酸铁铵NH4Fe(S04)212H20配制铁标准浴液，则需标定7．仪器 分光光度计及l cm比色皿四、实验步骤1.吸收曲线的绘制 用吸量管准确吸取10-4 mo1L-l铁标准溶液10 mL，置于50 mL容量瓶中，加人10%盐酸羟胺溶液1 mL，摇匀后加人1molL-l醋酸钠溶液5 mL和0.1％邻二氮菲溶液3 mL，以水稀释至刻度，摇匀在分光光度计上，用l cm比色皿，以水为参比溶液，用不同的波长，从430～570 nm，每隔20 nm测定一次吸光度，在最大吸收波长处附近多测定几点。

然后以波长为横坐标，吸光度为纵坐标绘制出吸收曲线，从吸收曲线上确定进行测定铁的适宜波长（即最大吸收波长）2.测定条件的选择（1）邻二氮菲与铁的配合物的稳定性 用上面溶液继续进行测定，在最大吸收波长510 nm处，从加人显色剂后立即测定一次吸光度，经15min，30 min，45 min，60 min后，各测一次吸光度以时间（t）为横坐标，吸光度（A）为纵坐标，绘制A－t曲线，从曲线上判断配合物稳定的情况2）显色剂浓度的影响 取25 mL容量瓶7个，用吸量管准确吸取10-4 mo1L-1铁标准溶液5 mL于各容量瓶中，加人10％盐酸羟胺溶液1mL摇匀，再加入l molL-1醋酸钠5 mL，然后分别加入0.1％邻二氮菲溶液0.3，0.6，1.0，l.5，2.0，3.0和4.0 mL，以水稀释至刻度，摇匀在分光光度计上，用适宜波长（510 nm），1 cm比色皿，以水为参比测定不同用量显色剂溶液的吸光度然后以邻二氮菲试剂加人毫升数为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制A一V曲线，由曲线上确定显色剂最佳加人量3）溶液酸度对配合物的影响 准确吸取10-4 molL-l铁标准溶液10 mL，置于100 mL容量瓶中，加人2 molL-1盐酸5 mL和10％盐酸羟胺溶液10 mL，摇匀经2 min后，再加人0.1％邻二氮菲溶液30 mL，以水稀释至刻度，摇匀后备用。

取25 mL容量瓶7个，用吸量管分别准确吸取上述溶液10 mL于各容量瓶中，然后在各个容量瓶中，依次用吸量管准确吸取加人0.4 molL-1氢氧化钠溶液l.0，2.0，3.0，4.0，6.0，8.0及10.0 mL，以水稀释至刻度，摇匀，使各溶液的pH从小于等于2开始逐步增加至l2以上，测定各溶液的pH值先用pH为l～14的广泛试纸确定其粗略pH值，然后进一步用精密pH试纸确定其较准确的pH值（采用pH计测量溶液的pH值，误差较小）同时在分光光度计上，用适当的波长（510 nm）l cm比色皿，以水为参比测定各溶液的吸光度最后以pH值为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制A－pH曲线，由曲线上确定最适宜的pH范围4）根据上面条件实验的结果，找出邻二氮菲分光光度法测定铁的测定条件并讨论之3．铁含量的测定（1） 标准曲线的绘制 取25 mL容量瓶6个，分别准确吸取的10μgmL-l铁标准溶液0.0，1.0，2.0，3.0，4.0和5.0 mL于各容量瓶中，各加10％盐酸羟胺溶l mL，摇匀，经2 min后再各加1molL-l醋酸钠溶液5 mL和0.1％邻二氮菲溶液3 mL，以水稀释至刻度，摇匀。

在分光光度计上用l cm比色皿，在最大吸收波长（510 nm）处以水为参比测定各溶液的吸光度，以含铁总量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线2）吸取未知液5 mL，按上述标准曲线相同条件和步骤测定其吸光度根据未知液吸光度，在标准曲线上查出未知液相对应铁的量，然后计算试样中微量铁的含量，以每升未知液中含铁多少克表示（gL-1）五、数据记录与处理1． 记录分光光度计型号，比色皿厚度，绘制吸收曲线和标准曲线；2．计算未知液中铁的含量，以每升未知液中含铁多少克表示（gL-1）六、问题与讨论1.三价铁离子溶液在显色前加盐酸羟胺的目的是什么？2.根据自己的实验结果数据，计算在最适宜波长下邻二氮菲与铁配合物的摩尔吸光系数，计算时注意单位换算（实验中所配制溶液的浓度单位为mgmL-1）3.所绘制曲线图均应有结论（即找出最佳值或最佳区间）4.注意工作曲线法定量的方式，未知物的定量应用虚线表示专心---专注---专业。