临床微生物：链球菌菌属.ppt

链球菌菌属链球菌菌属2链球菌属（Streptococcus)是一大类镜下呈链状排列的革兰阳性球菌u 自然界分布广泛u 人及动物的肠道、泌尿生殖道、健康人的鼻咽部u 多为正常菌群 一、分 类1.产生溶血与否及其溶血现象不同3、 丙型 () 链球菌1、 甲型甲型 ( () ) 溶血溶血性链球菌性链球菌2、 乙型 () 溶血性链球菌5根据根据溶血现象不同分类分类溶血现象名称链球菌类别致病性草绿色溶血环溶血甲型溶血性链球菌和肺炎链球菌多为条件致病菌透明溶血环溶血乙型溶血性链球菌或化脓性链球菌致病力强不溶血 -丙型链球菌或不溶血性链球菌多无致病性金葡菌67 血清分群（C抗原）：A-HA-H、K-VK-V 20群 血清分型（M抗原）：100100个型（个型（A A群）群） 对人致病的链球菌菌株，对人致病的链球菌菌株，90%90%左右属左右属A群2.根据根据抗原结构不同分类分类 8医学常见链球菌链球菌 血清群 溶 血 诊断要点 引起常见疾病化脓性链球菌 A 群溶血；杆菌肽敏感皮肤感染，咽炎，风湿热，肾炎无乳链球菌 B 群溶血；杆菌肽不敏感水解马尿酸盐、CAMP(+)新生儿败血症和脑膜炎牛链球菌 D 群不溶血；胆汁七叶苷（+）多不致病肺炎链球菌 溶血；胆汁溶菌（+），Optochin敏感肺炎，脑膜炎，心内膜炎草绿色链球菌 溶血；胆汁溶菌（-），Optochin耐药龋齿，心内膜炎3.3.根据根据生化反应不同和对氧的需求分类分类 3、微需氧链球菌微需氧链球菌1、需氧链球菌需氧链球菌2、厌氧链球菌厌氧链球菌 对一些对一些不具有群特异性不具有群特异性抗原抗原的链球菌（如肺炎链球菌和的链球菌（如肺炎链球菌和草绿色链球菌等），需用生化反应和对氧的需要分类。

草绿色链球菌等），需用生化反应和对氧的需要分类 二、临床意义肺炎链球菌主要引起成人大叶性肺炎主要引起成人大叶性肺炎 和小儿的支气管肺炎和小儿的支气管肺炎A群链球菌有较强的侵袭力， 是最常见引起感染的链球菌B群链球菌主要与围产期母婴感染有关主要与围产期母婴感染有关二、临床意义A群链球菌1.A群链球菌的致病物质： 12侵袭力菌体成分胞外侵袭酶类外毒素131) 脂磷壁酸（lipoteichoic acid, LTA） 与生物膜有高度亲和力 是该菌定植在机体皮肤和呼吸道黏膜等表面的主要侵袭因素 菌体成分1415 分分2020个群，个群，A A群群最多最多见，致病性最强见，致病性最强根据根据MM蛋白不同蛋白不同进进进进一步分型一步分型荚膜荚膜细胞壁细胞壁蛋白质蛋白质C C多糖多糖肽聚糖肽聚糖细胞膜细胞膜细胞质细胞质1）C多糖抗原为群特异性抗原，细胞壁的多糖组分 2）表面抗原或称蛋白质抗原：壁外层的菌毛样结构含M蛋白，位于C抗原外层，具型特异性，A群有100多种血清型M抗原与致病性有关 162)M蛋白（M protein） 是A群链球菌的主要致病因子 含M蛋白的链球菌具有抗吞噬和抵抗细胞内杀菌作用； 与链球菌性变态反应疾病有关（M蛋白与心肌、肾小球基底膜、结缔组织等有共同抗原）。

3）荚膜：化学本质多为透明质酸菌体成分17A群链球菌可产生多种侵袭酶，均是扩散因子1）透明质酸酶（hyaluronidase）：分解间质内 透明质酸，使病菌易扩散2）链激酶（streptokinase, SK）：与葡激酶类似，使血液中纤维蛋白酶原变成纤维蛋白酶，溶解血块或阻止血浆凝固，利于病菌扩散3）链道酶（streptodomase, SD）：亦称链球菌DNA酶，降解DNA，使脓液稀薄，促进病菌扩散 胞外侵袭酶类181) 致热外毒素（pyrogenic exotoxin） 是人类猩红热的主要毒性物质致热外毒素抗原性强，具有超抗原作用，对兔有致热性和致死性2 2) ) 链球菌溶素链球菌溶素（streptolysinstreptolysin） 溶解红细胞、破坏白细胞和血小板溶解红细胞、破坏白细胞和血小板 A A群群链球菌可分为两种溶血素链球菌可分为两种溶血素（hemolysinhemolysin）： 链球菌溶素链球菌溶素O O（SLOSLO）：）：对哺乳动物多对哺乳动物多 （抗原性强氧敏感） 种细胞有毒性作用种细胞有毒性作用 链球菌溶素链球菌溶素S S（SLSSLS）：）：对对红红白细胞和多种组织白细胞和多种组织 （无抗原性氧稳定） 细胞有破坏作用细胞有破坏作用 外毒素192.A群所致疾病A A群链球菌引起的疾病约群链球菌引起的疾病约占人类链球菌感染的占人类链球菌感染的90% 90% 呼吸道感染扁桃体炎产褥热丹毒（淋巴管炎）猩红热 (3) (3) 变态反应性疾病(1)(1)各种化脓性感染(2) (2) 毒素性疾病毒素性疾病风湿热急性肾小球肾炎发热、咽峡炎、全身弥漫性鲜红色皮疹和疹退后明显的脱屑 20风湿热的临床表现：发热、环形红斑、游走性关节炎等。

21急性肾小球肾炎的临床表现：水肿、血尿、蛋白尿等22致病物质荚膜抗吞噬作用抗吞噬作用所致疾病肺炎链球菌在自然界广泛分布，常寄居于正常人的鼻咽腔中，形成带菌状态，在机体抵抗力下降时引起疾病主要引起成人大叶性肺炎，约占细菌性肺炎的80%和小儿支气管肺炎 临床意义社区获得性肺炎是我国0-5岁儿童死亡首要因素肺炎链球菌寄居在正常人鼻咽部，免疫力低下时发生感染，致病物质主要为荚膜、肺炎链球菌溶血素等 -卫计委妇幼司 中国 5 岁以下儿童死亡监测组 N.中国妇幼卫生事业年度发展报告( 2015) -刘策，叶芳.我国社区获得性肺炎病原体分布特点J.中国医药导报，2016，13（15）：55-58. 肺炎链球菌我国0-5岁儿童社区获得性肺炎的最常见的细菌病原24其他链球菌所致疾病（1）B群链球菌 (group B streptococcus, GBS) 又称又称无乳链球菌可寄居于正常妇女阴道和直可寄居于正常妇女阴道和直肠，肠，条件致病，条件致病，可引起可引起： 孕妇菌血症、泌尿系感染、胎膜感染、子宫内感染菌血症、泌尿系感染、胎膜感染、子宫内感染和产褥热和产褥热 新生儿败血症败血症、肺炎、肺炎和脑膜炎。

和脑膜炎美国美国围产期围产期GBSGBS预防指南预防指南、我国、我国孕前孕期保健孕前孕期保健指南指南指出：指出：对怀孕对怀孕35-3735-37周的孕妇必须进行周的孕妇必须进行GBSGBS筛检，阳性需筛检，阳性需预防预防性治疗性治疗 25（2 2）甲型溶血性链球菌：也称也称草绿色链球菌草绿色链球菌（s streptococcus treptococcus viridiansviridians）因无多糖抗原无多糖抗原，故不属于故不属于LancefieldLancefield血清学分类的任何族包括血清学分类的任何族包括多个种，多个种，条件致病，可可引起下列两种疾病引起下列两种疾病： 龋齿（龋齿（dental dental cariescaries）：常由变形链球常由变形链球菌引起 亚急性细菌性心内膜炎亚急性细菌性心内膜炎（subacute subacute bacterial bacterial endocarditiendocarditis s, , SBESBE）由此菌引起的由此菌引起的SBESBE占全部病例占全部病例50%50%三、生物学特性271.形态与染色 球形或椭圆形，链状或成双排列，革兰染色阳性（G） ，有微荚膜，无芽胞，无鞭毛。

28 肺炎链球菌：G G，双球菌矛，双球菌矛头状：平面相头状：平面相对对，尖面相背尖面相背有荚膜有荚膜，无芽无芽胞胞，无鞭毛无鞭毛29肺炎链球菌302.培养特性 营养要求高：血平板或含血清培养基 初代培养需5%-10%CO2 液体培养为沉淀生长 血平板呈灰白色表面光滑小菌落，不同菌株溶血不一，A群有透明溶血环（溶血现象） 溶血溶血 链球菌链球菌 溶血溶血31 溶血性链球菌溶血性链球菌32肺炎链球菌营养要求较高,常用血或巧克力平板;生长需要CO2; 菌落与甲链相似，产生自溶酶能自溶肺链的肺链的 溶血（培养约溶血（培养约34h34h）肺链的菌落（培养约肺链的菌落（培养约40h40h）33肺炎链球菌“露滴样”菌落34肺炎链球菌“脐窝状”“菌落（培养48h后）35肺炎链球菌粘液样菌落肺炎链球菌粘液样菌落363.生化反应 分解葡萄糖，产酸不产气 一般不分解菊糖，不被胆汁溶解（鉴别甲型溶血性链球菌与肺炎链球菌） 触酶（-），与葡萄球菌不同 肺炎链球菌：肺炎链球菌： 分解葡萄糖分解葡萄糖、乳糖乳糖和和菊糖，胆汁菊糖，胆汁溶菌溶菌（+ +）， Optochin Optochin敏感，触酶（敏感，触酶（- -）37 4.抗原结构分分2020个群，个群，A A群群致致病性最强；病性最强；肺链肺链C C多糖可被多糖可被CRPCRP沉淀。

沉淀根据根据MM蛋白不同蛋白不同进进进进一步分型一步分型荚膜荚膜细胞壁细胞壁蛋白质蛋白质C C多糖多糖肽聚糖肽聚糖细胞膜细胞膜细胞质细胞质1）C多糖抗原；为群特异性抗原，细胞壁的多糖组分 2 2）蛋白质抗原蛋白质抗原：壁外：壁外层层的菌毛样结构含的菌毛样结构含M M蛋白蛋白，位于，位于C C抗原外层，具抗原外层，具型型特异性特异性，A A群群有有100100多多种血清型种血清型M M抗原与致病性有关抗原与致病性有关 38 肺炎链球菌：肺炎链球菌： 荚膜多糖抗原荚膜多糖抗原：具有型特异性，可将具有型特异性，可将肺炎链球菌分为肺炎链球菌分为9090多个血清多个血清型 C C多糖抗原：具有种特异性，各型均有多糖抗原：具有种特异性，各型均有，可被，可被CRPCRP沉淀 39 一般链球菌一般链球菌对热力敏感，对常用消毒剂敏感在干燥尘埃中生存数月乙型链球菌对青在干燥尘埃中生存数月乙型链球菌对青霉素、红霉素，四环素、杆菌肽和磺胺药都霉素、红霉素，四环素、杆菌肽和磺胺药都很很敏感5.抵抗力药敏试验最后鉴定 发出最终报告初步鉴定菌落特征、菌体形态直接涂片革兰染色鉴定试验 痰血平板血 液营养肉汤增菌 355%-10%CO218-24h3518-24h第一天第二天第三天 检验程序41直接涂片镜检直接涂片镜检革兰阳性链球菌革兰阳性链球菌分离培养（分离培养（初代置初代置CO2CO2环境中环境中）（脓汁、咽喉拭子）（脓汁、咽喉拭子） 血液血液与金葡菌的鉴别与金葡菌的鉴别与肺炎链球菌的鉴别与肺炎链球菌的鉴别典型链球菌形态典型链球菌形态和排列和排列典型的链球菌菌落典型的链球菌菌落 生化反应或药敏实验等生化反应或药敏实验等四、链球菌微生物学检验方法增菌增菌421.溶血链球菌属内的鉴定试验AA群化脓性链球菌群化脓性链球菌杆菌肽敏感试验（+）PYR (+)4344mmmmBB群链球菌群链球菌 CAMP试验（+）： B群链球菌与金葡菌垂直划线培养后，两种细菌交接处形成箭头状透明溶血区。

454647482.2.非非溶血链球菌鉴定溶血链球菌鉴定 菌 种 optochin敏感试验 胆汁溶菌试验 胆汁七叶苷试验 肺炎链球菌S+草绿色链球菌R牛链球菌R+491.直接涂片镜检：G G有荚膜的双球菌2.2.分离培养：分离培养：菊糖分解试验（菊糖分解试验（+ +）胆汁溶菌试验（胆汁溶菌试验（+ +）OptochinOptochin敏感试验（敏感）敏感试验（敏感）小白鼠动物试验（小白鼠动物试验（+ +）肺炎球菌荚膜肺炎球菌荚膜（10001000）“脐窝形”菌落肺炎链球菌微生物学检验方法微生物学检验方法与甲链鉴别50大叶性肺炎患者痰涂片大叶性肺炎患者痰涂片5152胆汁溶菌试验肺炎链球菌胆汁溶菌试验为阳性甲型溶血性链球菌的胆汁溶菌试验为阴性53血清学检查 抗抗O O试验（试验（ASO testASO test）：）： 链球菌侵入体内产生链球菌侵入体内产生SLOSLO，刺激机体产生，刺激机体产生相应抗体相应抗体ASOASO( (血清），加入血清），加入SLOSLO乳胶试剂，乳胶试剂，SLOSLO抗体抗体(ASO)(ASO)与乳胶试剂与乳胶试剂( (吸附有吸附有SLO)SLO)反应。