农作物种子检验规程 真实性和品种纯度鉴定.doc

农作物种子检验规程一-真实性和品种纯度鉴定[作者：Wlgju 來源：丹玉种业 点击数：815 更新时间：2007-7-20 文章录入：wlgju ]【字体：△】1主题内容与适用范帀本标准规定了测定种子真实性和品种纯度的方法木标准适用于农作物种子质杲的检测2引用标准GB/T 3543. 2农作物种子检验规程 打样GB/T 3543. 4农作物种子检验规程 发芽试验3术语3. 1 种子貞实‘性 genuineness of seed供检品种与文件记录（如标签等）是否相符3. 2 品种纯度 varietal purity品种在特征特性方面典型一致的程度,用本品种的种子数占供检本作物样品种子数的Tf分率表示3. 3 变异株 off-type一个或多个性状（特征特性）4原品种育成打所描述的性状明显不同的植株3. 4 育种家种子 breeder seed育种家育成的遗传性状稳定的品种或亲本种子的最初一批种子，用于进一步繁殖原种种r-o3. 5 原种 basic seed用育种家种子繁殖的第一代至第三代，或按原种生产技术规程生产的达到原种质量标准的种子，用 于进一步繁殖良种种子3. 6 良种 certified seed用常规种原种繁殖的第一代至第三代和杂交种达到良种质景标准的种子，用于大IH生产。

4试剂苯酚，愈创木酚、过氧化氢、氢氧化钾、氢氧化钠，氯化氢5 仪器和设备其仪器设备也随方法的差异而不同a. 在实验室中测定配备适宜的仪器（如体视显微镜、扩大镜、解剖镜）与试剂，以供种子形态、生理及细胞学的检查、 化学测定及种子发芽之用b. 在温室和培养室中测定配备能调节环境条件的设备（如生长箱），以利诱导鉴别性状的发冇c. 在III间小区里鉴定需具有能使鉴定性状正常发育的气候、土壤及栽培条件，并对防治病虫害有相对的保护措施6测定程序6. 1送验样品的筑量品种纯度测定的送验样品的故小巫量应符合表1的规定表1品种纯度测定的送验样品垂量 g种 类 限于实验室测定 III间小区及实验室测定豌豆属、蚕豆属、玉米属、菜豆属、玉米属、大豆属及种于大小类似的其他属10002000水稻属、大麦属、燕麦属、小麦属、黑麦属及种子大小类似的其他5001000甜菜属及种子大小类似的其他属250500所有其他属1002506. 2种子鉴定6. 2. 1形态鉴定袪随机从送验样品中数取400粒种子，鉴定时须设JR复，毎个龙复不超过100粒种子根据种子的形态特征，必要时可借助扩大镜等迹行逐粒观察，必须备有标准样品或鉴定图片和有关 资料。

水稻种子根据谷粒形状、长宽比、大小、秤壳和秤尖色、秤毛长短、稀密、柱头夹持率等；大麦种 子根据籽粒形状、外稈基部皱褶、籽粒颜色、腹沟基刺、腹沟展开程度、外稈侧背脉纹齿状物及脉色、 外稈基部稈壳皱褶円【陷小穗轴茸毛多少、鳞被（浆片）形状及茸毛稀密等；大豆种子可根据种子大小、 形状、颜色、光泽、光滑度，蜡粉多少及种脐形状颜色等，葱类可根据种子大小、形状、颜色、表面构 适及脐部特征等6. 2. 2快速测定法随机从送验样品中数取400粒种子，鉴定时须设重复，毎个重复不超过100粒种子a. 苯酚染色法小麦、大麦、燕麦；将种子浸入清水中经18〜24 h,用滤纸吸干表面水分，放入舉有已经1%苯酚 溶液湿润滤纸的培养川I•内（腹沟朝下）在室温下，小麦保持4h,燕麦2h,大麦Zlh后即可鉴定染色深浅 小麦观察颖果架色恬况，大麦、燕麦评价种子内外稈染色恬况通常颜色分为五级即浅色、淡褐色、褐 色、深褐色和黑色将与基本颜色不同的种子収出作为异品种水稻：将种子浸入清水中经6 h,倒去清水，注入1 % （m / v）苯酚溶液，室温下浸12 h取出用清水 洗涤，放在滤纸上经24 h,观察谷粒或米粒染色程度谷粒染色分为不染色、淡茶褐色、茶褐色、黑褐 色和黑色五级，米粒染色分不染色、淡茶褐色，褐色或紫色三级。

b. 大豆种皮愈创木酚染色法将每粒大豆种子的种皮剥下，分别放入小试管内，然后注入1 mL蒸谓水，在3（KC下浸提lh,再在 每支试管中加入10滴0. 5%愈创木酚溶液,lOmin后,每支试管加入1滴0. 1%过氧化氢溶液1 min后, 计数试管内种皮浸出液呈现红棕色的种子数与浸出液呈无色的种子数c. 高梁种予氧氧化钾-漂白粉测定法配制1： 5（m / V）氢氧化钾和新鲜普通漂白粉（5. 25%漂口粉）的混合液［即lg氧氧化钾（KO1I）加入5. OmL漂白液），通常准备lOOniL溶液，贮于冰箱中备用将种子放入培养川L内，加入氢氧化钾一漂白液（测定前应置于室温一段时间）以淹没种子为度棕色种皮浸泡W min浸泡中定时轻轻摇晃使溶液与种子良 好接触，然后把种子倒在纱网上，用自來水慢慢冲洗，冲洗后把种子放在纸上让其气干，待种子干燥后， 记录黑色种子数与浅色种子数d. 燕麦种子荧光测定法应用波长360A紫外光照射,在暗室内鉴定将种子排列在黑纸上，置于距紫外光下10〜15cm处， 照射数秒金数分钟后即可根据内外籽有无荧光发出进行鉴定c. 燕麦种子氯化氧测定法将燕麦种子放入早已配好的氯化氧溶液［1份38% （V /V）盐酸（IIC1）和1份水］的玻璃器川I•中浸泡6 h,然后取出放在滤纸上让其气干1 ho根据棕褐色（荧光种子）或黄色（非荧光种子）來鉴别种子。

f. 小麦种子的蛊氧化钠测定法当小麦种子红白皮不易区分（尤其是经杀菌剂处理的种子）时，可用氢氧化钠测定法加以区别数取400粒或更多的种子先用95%（V/V）甲醇浸泡lomin,然后让种子干燥30min,在室温下将种子浸 泡在5M / L NaOll溶液中5min,然后将种子移至培养皿内，不可加盖，让其在室温下干燥，根据种子浅色 和深色加以讣数6. 2. 3小麦、大麦醉溶蛋白的酸性聚丙烯酰胺电泳法见附录A（参考件）6. 3幼苗鉴别随机从送验样品中数取100粒种子,鉴定时须设匝复，毎乖复为100粒种子在培养室或温室中可 以用100,二次重复幼苗鉴定可以通过两个主要途径：一种途径是提供给植株以加速发冇的条件（类似于IH间小区鉴定， 只是所需时间较短），当幼苗达到适宜评价的发育阶段时，对全部或部分幼苗进行鉴定；另一种途径是让 植株生长在特殊的逆境条件下，测定不同品种对逆境的不同反应来鉴别不同品种禾谷类：禾谷类作物的芽鞘、中胚轴有紫色与绿色两大类,它们是受遗传基因控制的将种子播在 砂中（玉米、高粱种子间隔1.0 cmX4. 5 cm,燕麦、小麦种子间隔2. 0 cmX 4. 0cm,播种深度1. 0cm）, 在25°C恒温下培养,24 h光照。

玉米、高粱每天加水,小麦、燕麦每隔4 d施加缺磷的Hoagland 1号 培养液在幼苗发育到适宜阶段时，高粱、玉米14d,小麦7d,燕麦10〜14d,鉴定芽鞘的颜色注;缺磷的Hoagland 1号培养液配方:在1 L蒸馆水中加入4mLIm/L硝酸钙溶液［Ca（N03）2］、2 mLl M /L硫酸镁溶液（MgS04）和6 mLlM / L硝酸钾溶液（KN03）大豆：把种子播于砂中（种子间隔2.5 cmX2.5 cm,播种深度2. 5 cm）,在25°C下培养,24 h光照,每隔4 d施加Iloaglandl号培养液，至幼苗各种特征表现明显时，根据幼苗下胚轴颜色（生长1074d）, 茸毛颜色(21 d)、茸毛在胚轴上着生的角度(21d)、小叶形状(21d)等进行鉴定注:Hoagland号培养液配方:在1L蒸憾水中加入1 mL 1M / L磷酸二氧钾溶液(KH2P04), 5 mLl M /L硝酸钾溶(KNO3)、5mLlM/L 硝酸钙溶液(Ca(N03) 2)和 2mLl M /L 硫酸镁溶液(MgSOI)萬苣:将萬苣种子播在砂中(种子间隔1. OcmX4. 0 cm,播种深度1 cm),在25°C恒温下培养，每隔id 施加Hoaglandl号培养液，3周后(长有3〜4片叶)根据下胚轴颜色、叶色、叶片卷|11|程度和子叶等形状 进行鉴别。

甜菜：有些栽培品种可根据幼苗颜色(白色、黃色、暗红色或红色)來区别将种球播在培养1111•湿砂 上置于温室的柔和日光下，经7d后，检查幼苗下胚轴的颜色根据白色与暗红色幼苗的比例，可在一 定程度上表明糖用甜菜及仃色饲料甜菜栽培品种的其实性6. 4田间小区种植鉴定①III间小区种植是鉴定品种真实性和测定品种纯度的最为可机 准确的方法为了鉴定品种真实性，应在鉴定的各个阶段与标准样品进行比较对照的标准样品为栽培品种提供全血的、系统的品种特 征特性的现实描述，标准样品应代表品种原有的特征特性，故好足育种家种子标准样品的数量应足够 多，以便能持续使用多年，并在低温干燥条件下贮藏，更换时址好从育种家处获取.注：①本节等效采用国际贸易中种子流通的OECD品种认证方案《小区鉴定方法指南》(0ECD1982) 0为使品种特征特性充分表现，试验的设汁和布局上要选择气候环境条件适宜的、土壤均匀、肥力一 致，前茬无同类作物和杂草的块，并有适宜的栽培管理措施行间及株间应有足够的距离，人株作物可适当增加行株距，必要时可用点播和点栽为了测定品种纯度方分率，必须与现行发布实施的国家标准种子质量标准相联系起來试验设计的 种植株数要根据国家标准种子质昴标准的要求ifU定，一般來说，若标准为(N-l)X(100%/N,种植株 数4N即可获得满意结果,如标准规定纯度为98%,即N为50,种植200株即可达到要求。

检验员应拥有丰富的经验，熟悉被检品种的特征特性，能正确判别植株是属于水品种还能变异株 变异株应是遗传变异，而不是受环境影响所引起的变异许多种在幼苗期就有可能鉴别出品种真实性和纯度，但成熟期(常规种)、花期(杂交种)和食用器官 成熟期(蔬菜种)是品种特征特性表现时期，必须进行鉴定良种品种纯度是否达到国家标准种子质戢标准、合同和标签的要求,训利用表2进行判别表2品种纯度的容许差距（5%显著水平的一尾测定）50%以上50% 以 F507510015020010060010001000000000009912. 31.91.61.31.20.80.70.59823.32. 72.31.91.21. 20.90. 79734. 03.32.82.32.01.41.20.99644.61.73.22.62.31.61.31.09555. 14.23.62.92.51.81.51. 19465. 54.53.93.22.82.01.61.29376.04.94.23.43.02. 11.71.39286.35.24.53. 72.22. 21.81.49196. 75. 54.73.93.32.41.91.590107.05.75.04.03.52.52.01.689117.36.05.24.23.72.62. 11.688127.66.25。