免疫缺陷动物(课堂PPT).ppt

湖北医药学院实验动物中心湖北医药学院实验动物中心湖北医药学院实验动物中心湖北医药学院实验动物中心2 2 2 2017017017017年年年年免疫缺陷动物（Immunodeficiency animals）1Contents免疫缺陷动物免疫缺陷动物-分类分类2裸鼠与裸鼠与SCID鼠鼠3其它免疫缺陷动物其它免疫缺陷动物4免疫缺陷动物免疫缺陷动物-概念概念12免疫？(Immune )免疫缺陷？(immunodeficiency )免疫缺陷与免疫缺陷动物 Immunodeficiency Disease and Animals3免疫缺陷：指因免疫系统中任何一个环节任何一个环节或者组分因先天先天发育不全或者后天后天因各种因素所致损害而使免疫活性细胞免疫活性细胞的发生发展、分化增殖和代谢异常并引起免疫功能不全所出现的临床综合症免疫缺陷与免疫缺陷动物 Immunodeficiency Disease and Animals4先天性（原发性）免疫缺陷，遗传性缺陷病可以导致对病原微生物的高度易感性获得性（继发性）免疫缺陷，可继发于营养不良、恶性肿瘤、免疫抑制药物的治疗或免疫活性细胞受到病毒的感染等。

免疫缺陷的分类 The Major Classes of Immunodeficiency Disease5免疫缺陷动物：由于先天性遗传突变或用人工方法造成一种或多种免疫系统组成成分缺陷的动物免疫缺陷与免疫缺陷动物 Immunodeficiency Disease and Animals6先天性免疫缺陷动物：获得性免疫缺陷动物：免疫缺陷动物的分类The Major Classes of Immunodeficiency Animals7先天性免疫缺陷动物：1)T淋巴细胞功能缺陷动物：裸小鼠（nude mice）、裸大鼠(nude rat)2)B淋巴细胞功能缺陷动物：性连锁免疫缺陷小鼠（CBA/N）3)NK淋巴细胞功能缺陷动物：Beige小鼠4)联合免疫缺陷动物：严重联合免疫缺陷小鼠(SCID mice)、虫蛙小鼠(motheaten mice)5)其它免疫缺陷动物：显性半肢畸形小鼠(dominant hemimelia mice)免疫缺陷动物的分类The Major Classes of Immunodeficiency Animals8获得性免疫缺陷动物：1)小鼠AIDS模型：SCID小鼠AIDS模型、AIDS的转基因小鼠。

2)猴AIDS模型：反转录病毒诱发、SIV诱发3)有蹄动物慢病毒感染4)黑猩猩HIV感染免疫缺陷动物的分类The Major Classes of Immunodeficiency Animals9获得性免疫获得性免疫缺陷动物缺陷动物小鼠小鼠AIDS模型模型有蹄动物病毒有蹄动物病毒感染模型感染模型黑猩猩黑猩猩HIV感染模型感染模型猴猴AIDS模型模型猫猫AIDS模型模型10先天性免疫先天性免疫缺陷动物缺陷动物T淋巴细胞功淋巴细胞功能缺陷动物能缺陷动物NK细胞功细胞功能缺陷动物能缺陷动物联合免疫联合免疫缺陷动物缺陷动物其他免疫其他免疫缺陷动物缺陷动物B淋巴细胞功淋巴细胞功能缺陷动物能缺陷动物裸小鼠裸小鼠裸大鼠裸大鼠SCID小鼠小鼠CBA/N小鼠小鼠Beiger小鼠小鼠11T细胞功能缺陷动物12裸小鼠（Nude mice）：是一种先天性胸腺缺陷的突变小鼠导致这种异常状态的裸基因(nu)是位于11号染色体上的一个隐性突变基因T细胞功能缺陷动物-裸小鼠 The Athymic (nude) Mouse13基因型：（nu/nu）该基因已回交到不同品系，包括：NIH-nu/nu、BALB/c-nu/nu 、C3H-nu/nu 、C57BL/6-nu/nu。

T细胞功能缺陷动物-裸小鼠 The Athymic (nude) Mouse14无毛鼠=裸鼠？No，为什么？唯一特征是什么？T细胞功能缺陷动物-裸小鼠 The Athymic (nude) Mouse151962年，英国，偶然发现个别无毛小鼠；1966年，爱丁堡，证实无毛小鼠是由于11号染色体上等位基因突变导致隐形基因纯合引起，并命名为裸体（nude），用nu表示基因符号；1968年，佩蒂路易斯发现裸小鼠无胸腺！裸小鼠的发现与发展16特点特点1）杂合子小鼠各方面表现正常，纯合子裸鼠，被毛异常生长，呈裸体状态；2）无胸腺，仅有胸腺残迹或异常胸腺上皮，不能使T-cell正常分化，导致细胞免疫力低下，幼龄鼠有残存的未分化的上皮细胞；裸小鼠的特点17BALB/c-nu与昆明鼠胸腺对比与昆明鼠胸腺对比183）B细胞数量、功能正常，成年裸小鼠（6~8周）较普通鼠有较高水平的NK细胞活性；4）繁育能力差，乳腺发育缺损，一般以雄性纯合子与雌性杂合子繁育（♂nu/nu×♀nu/+）；裸小鼠的特点195）T细胞缺陷可通过移植成熟T细胞、胸腺细胞或正常胸腺上皮得到校正；6）生长缓慢，体重小于同日龄其它小鼠；裸小鼠的特点207）抵抗力差，必须饲养在屏障环境中；8）无接触敏感性，无移植排斥，无移植物抗宿主反应。

裸小鼠的特点21 裸大鼠(Nude rat)是1953年由英国的Rowett研究所发现，基因符号为rnu；纯合子为(rnu/rnu)，1977年在英国的MRC实验动物中心建立了裸大鼠种群此后逐步引入美国、日本等1983年引入中国T细胞功能缺陷动物-裸大鼠 The Athymic Rat22特点特点1）纯合子裸大鼠(rnu/rnu)具有与裸小鼠基本相似的特征，裸大鼠并不像裸小鼠一样完全无毛，而是体毛稀少，尾根往往多毛；T细胞功能缺陷动物-裸大鼠 The Athymic Rat232）无胸腺，缺乏功能性T淋巴细胞，B细胞功能基本正常，NK细胞活力增强；3）体重为正常大鼠的70％左右；T细胞功能缺陷动物-裸大鼠 The Athymic Rat244）繁育能力差，与裸小鼠一样在妊娠期间乳腺发育缺损，故其繁殖方式同裸小鼠相同，即用纯合子的雄鼠与杂合子的雌鼠交配方式进行繁育；T细胞功能缺陷动物-裸大鼠 The Athymic Rat255）比裸小鼠更强壮、寿命更长，裸大鼠较裸小鼠对多种传染病更敏感6）体型较大，可提供足够的血样、也可为各种研究提供足够的瘤组织及对大范围的外科手术方法较有利。

T细胞功能缺陷动物-裸大鼠 The Athymic Rat26T、、B细胞联合免疫缺陷细胞联合免疫缺陷Motheaten小鼠小鼠T、、NK细胞缺陷小鼠细胞缺陷小鼠T、、B、、NK细胞三联免疫缺陷小鼠细胞三联免疫缺陷小鼠联合免疫缺陷动物27严重联合免疫缺陷小鼠（严重联合免疫缺陷小鼠（ Severe combined immunodeficient mice，，SCID小鼠）：小鼠）：1983年由美国年由美国Fox chase癌症中癌症中心于心于C.B-17Icr近交系中发现，突变基因近交系中发现，突变基因scid位于位于16号染色体号染色体1988年，从美国年，从美国Jackson实验室引进到实验室引进到中国严重联合免疫缺陷小鼠严重联合免疫缺陷小鼠28SCID小鼠：小鼠：T、、B淋巴细胞联淋巴细胞联合免疫缺陷动合免疫缺陷动物物 严重联合免疫缺陷小鼠严重联合免疫缺陷小鼠29SCID小鼠的解剖学特点：小鼠的解剖学特点：1、、外观、体重与普通小鼠无差异外观、体重与普通小鼠无差异2、、淋巴器官发育有缺陷淋巴器官发育有缺陷其胸腺胸腺相对重量仅为同龄正常对照小鼠的6℅左右，脾脏脾脏相对重量仅为正常的3℅，淋巴结极小淋巴结极小，常散在于脂肪组织之中，难以用肉眼查见，在显微镜下估计其大小仅为正常的1/3严重联合免疫缺陷小鼠严重联合免疫缺陷小鼠30SCID小鼠的组织学特点：小鼠的组织学特点：淋巴组织缺乏淋巴细胞，胸腺无皮质结淋巴组织缺乏淋巴细胞，胸腺无皮质结构仅存上皮样细胞和成纤维细胞，脾小，构仅存上皮样细胞和成纤维细胞，脾小，因缺少正常的因缺少正常的B淋巴细胞聚集故没有脾淋巴细胞聚集故没有脾小体。

淋巴结也没有明显皮质区，主要小体淋巴结也没有明显皮质区，主要由网状细胞占据由网状细胞占据严重联合免疫缺陷小鼠严重联合免疫缺陷小鼠31免疫学特征：免疫学特征： SCID小鼠在所有小鼠在所有T和和B淋巴细胞功能测淋巴细胞功能测试中为阴性对外源性抗原无抗体和细试中为阴性对外源性抗原无抗体和细胞免疫反应，不能排斥同种皮肤移植，胞免疫反应，不能排斥同种皮肤移植，体内缺乏携带前体内缺乏携带前B组胞、组胞、B细胞和细胞和T细胞细胞表面标记的细胞表面标记的细胞  32免疫细胞：免疫细胞：外周血白细胞总数减少，粒细胞，巨噬外周血白细胞总数减少，粒细胞，巨噬细胞、巨核细胞、红细胞等呈正常状态细胞、巨核细胞、红细胞等呈正常状态自然杀伤细胞自然杀伤细胞NK、淋巴激活因子、淋巴激活因子LAK细细胞正常33自发性肿瘤：自发性肿瘤： SCID小鼠自发性小鼠自发性T细胞淋巴瘤（主要在细胞淋巴瘤（主要在胸腺）的发病率在胸腺）的发病率在15℅左右淋巴瘤明左右淋巴瘤明显起源于胸腺，并可发生肺、淋巴结、显起源于胸腺，并可发生肺、淋巴结、脾、肝和肾转移脾、肝和肾转移34渗漏（渗漏（Leaky）现象：）现象：约约2-23%的的SCID小小鼠鼠在在青青年年期期B、、T细细胞胞功功能能可可以以恢恢复复，，称称为为渗渗漏漏（（Leaky）），，此此时时仍仍带带有有SCID基基因因，，淋淋巴巴细细胞胞不不受受影影响响而而发发育育成成熟熟，，原原因因不不明明。

可可以以用用血血清清学和组织学方法诊断学和组织学方法诊断35淋巴系统的重建：淋巴系统的重建： SCID小鼠在接受组织相容性相同的正常小鼠在接受组织相容性相同的正常骨髓或胎肝细胞后，其淋巴组织将获得骨髓或胎肝细胞后，其淋巴组织将获得部分或完全重建，恢复正常功能部分或完全重建，恢复正常功能36环境要求：环境要求：对鼠肝炎，巴氏杆菌、卡氏肺囊虫极易对鼠肝炎，巴氏杆菌、卡氏肺囊虫极易感染，感染后易发病死亡必须养育在感染，感染后易发病死亡必须养育在 SPF环境中，平均寿命环境中，平均寿命1年以上分笼饲养、防止混淆分笼饲养、防止混淆37motheaten mice，，1965年发现于年发现于C57BL/6J的突变，突变基因的突变，突变基因me位于第位于第6号染色体，号染色体， C57BL/6J-me在在1-2日龄表皮可见嗜中性白日龄表皮可见嗜中性白细胞集聚，表皮色素呈斑点状，故称虫细胞集聚，表皮色素呈斑点状，故称虫蛀小鼠，寿命不超过蛀小鼠，寿命不超过8周虫蛀小鼠虫蛀小鼠381、出生后、出生后2天内出现皮肤脓肿，有严重天内出现皮肤脓肿，有严重联合免疫缺陷，表现为对胸腺依赖和非联合免疫缺陷，表现为对胸腺依赖和非依赖抗原均无反应，对依赖抗原均无反应，对T、、B细胞分裂细胞分裂素的增殖反应严重受损，细胞毒素的增殖反应严重受损，细胞毒T细胞细胞和和NK细胞活性低。

细胞活性低虫蛀小鼠虫蛀小鼠392、纯合型（、纯合型（me/me）伴有自身免疫的）伴有自身免疫的倾向，免疫复合物沉积肾、肺、皮肤倾向，免疫复合物沉积肾、肺、皮肤3、、4周龄胸腺退化，出现严重免疫缺陷，周龄胸腺退化，出现严重免疫缺陷，与与SCID不同的是，不仅存在不同的是，不仅存在T、、B淋巴淋巴细胞异常，其它细胞也存在异常细胞异常，其它细胞也存在异常虫蛀小鼠虫蛀小鼠404、该小鼠对判别生命早期的免疫功能、该小鼠对判别生命早期的免疫功能缺陷和某种自身免疫性疾病的发生都是缺陷和某种自身免疫性疾病的发生都是有用的模型有用的模型虫蛀小鼠虫蛀小鼠41一、性连锁免疫缺陷小鼠（一、性连锁免疫缺陷小鼠（X-linked immune deficiency mouse，，XID）） 起源于起源于CBA/N，毛色为野鼠色，，毛色为野鼠色，B细胞细胞功能缺乏，基因符号功能缺乏，基因符号xid，位于，位于X染色体染色体上基因型：基因型：xid/xid，，xid/Y其他免疫缺陷动物421、雌性纯合子与雄性杂合子没有体液、雌性纯合子与雄性杂合子没有体液免疫2、对、对B细胞分裂素缺乏反应，分泌细胞分裂素缺乏反应，分泌IgM和和IgG的的B细胞减少，细胞减少， IgM和和IgG含量降含量降低，但低，但T细胞功能正常。

细胞功能正常性连锁免疫缺陷小鼠性连锁免疫缺陷小鼠433、移植正常鼠骨髓到、移植正常鼠骨髓到xid宿主，宿主，B细胞细胞缺损可以恢复缺损可以恢复4、该小鼠用于研究、该小鼠用于研究B细胞的发生、功细胞的发生、功能、异质性能、异质性性连锁免疫缺陷小鼠性连锁免疫缺陷小鼠44二、二、 beiger小鼠小鼠(beiger mice) NK细胞功能缺陷突变小鼠，细胞功能缺陷突变小鼠，bg是是13号号染色体上的隐性基因染色体上的隐性基因基因型：基因型：bg/bgbeiger小鼠小鼠451、由于细胞溶解作用的识别过程受损，、由于细胞溶解作用的识别过程受损，导致导致NK细胞功能缺乏细胞功能缺乏2、纯合、纯合bg基因还损伤细胞毒基因还损伤细胞毒T细胞功能，细胞功能，降低粒细胞趋化性和杀菌活性，延迟巨降低粒细胞趋化性和杀菌活性，延迟巨噬细胞抗肿瘤杀伤作用噬细胞抗肿瘤杀伤作用beiger小鼠小鼠463、影响溶酶体发生，导致溶酶体膜缺、影响溶酶体发生，导致溶酶体膜缺损，溶酶体增大损，溶酶体增大4、溶酶体功能缺陷导致、溶酶体功能缺陷导致bg小鼠对化脓小鼠对化脓性细菌敏感，必须饲养于性细菌敏感，必须饲养于SPF环境中。

环境中5、可用于研究色素缺乏易感性增高综、可用于研究色素缺乏易感性增高综合征beiger小鼠小鼠47三、显性半肢畸形小鼠三、显性半肢畸形小鼠(dominant hemimelia mice) 1、、Dh(dominant hemimelia )是显性是显性突变基因，位于突变基因，位于1号染色体号染色体Dh/Dh，，Dh/+显性半肢畸形小鼠显性半肢畸形小鼠482、出生后，后趾畸形即多趾或少趾出生后，后趾畸形即多趾或少趾3、杂合子缺乏脾脏，泌尿、生殖、、杂合子缺乏脾脏，泌尿、生殖、消化道和骨骼有一定程度畸形消化道和骨骼有一定程度畸形显性半肢畸形小鼠显性半肢畸形小鼠494、纯合子由于泌尿生殖系统和骨骼、纯合子由于泌尿生殖系统和骨骼系统严重畸形，出生后很快死亡系统严重畸形，出生后很快死亡5、畸形发生于早期胚胎的脏壁中胚、畸形发生于早期胚胎的脏壁中胚层显性半肢畸形小鼠显性半肢畸形小鼠506、脾脏缺乏导致体液免疫反应一定、脾脏缺乏导致体液免疫反应一定程度损伤程度损伤显性半肢畸形小鼠显性半肢畸形小鼠51三联联合免疫缺陷BNX（为（为bg、、nu、、xid三个基因首字母的缩写）三个基因首字母的缩写）小鼠是小鼠是NIH-Beige-NudeXID小鼠的简称，亦称小鼠的简称，亦称为为NIH-ⅢⅢ小鼠，它是由美国（小鼠，它是由美国（NIH）培育成功）培育成功的一种的一种T、、B、、NK细胞联合免疫缺陷小鼠，即细胞联合免疫缺陷小鼠，即重度联合免疫缺陷小鼠，基因型为重度联合免疫缺陷小鼠，基因型为NIH-bg/bg-xid/xid-nu/nu(雌性雌性)和和IH-bg/bg-xid/y-nu/nu(雄性雄性)。

52外观特征外观与裸小鼠相似，呈裸体外表，外观特征外观与裸小鼠相似，呈裸体外表，先天性胸腺发育缺陷从出生到成年，外观先天性胸腺发育缺陷从出生到成年，外观均为黑色裸体外表；随年龄增长，其皮肤颜均为黑色裸体外表；随年龄增长，其皮肤颜色逐渐减弱变淡，至老年时仅有肩部和尾椎色逐渐减弱变淡，至老年时仅有肩部和尾椎等局部呈黑色，其余部位的颜色为灰色或浅等局部呈黑色，其余部位的颜色为灰色或浅黑色三联联合免疫缺陷53三联联合免疫缺陷生物学特征生物学特征BNX小鼠在实验中有着裸小鼠和小鼠在实验中有着裸小鼠和SCID小鼠无法比拟的优势它既兼有裸小鼠小鼠无法比拟的优势它既兼有裸小鼠无毛、易观察、相对易饲养和无毛、易观察、相对易饲养和SCID小鼠接受小鼠接受抗原刺激免疫机能易恢复以及抗原刺激免疫机能易恢复以及SCID小鼠有毛、小鼠有毛、不利于实验观察、难饲养、存在免疫渗漏等不利于实验观察、难饲养、存在免疫渗漏等缺点。