医学形态学实验课PowerPoint 演示文稿.ppt

实验课要求实验课要求1.1.进入实验室须穿白大衣，实验室要保持安静，有秩序，进入实验室须穿白大衣，实验室要保持安静，有秩序，要保持关闭或无声状态，以免影响他人要保持关闭或无声状态，以免影响他人2.2.必须严肃、认真地进行实验操作，观察实验结果必须严肃、认真地进行实验操作，观察实验结果3.3.动物室需保持清洁，定期确认饲料和水瓶，注意观察动物室需保持清洁，定期确认饲料和水瓶，注意观察动物4.4.取及动物时，注意个人安全取及动物时，注意个人安全5.5.鼠笼及垫料需要鼠笼及垫料需要每周更换１－２次每周更换１－２次，用过的鼠笼必，用过的鼠笼必须及时清洗干净须及时清洗干净6.6.如有死亡动物，应及时报告并按规定处理如有死亡动物，应及时报告并按规定处理7.7.爱护公共财物，节约各种试剂爱护公共财物，节约各种试剂, ,每次实验结束后都每次实验结束后都要轮流值日，将实验室打扫干净，关好门窗和水电要轮流值日，将实验室打扫干净，关好门窗和水电后方可离开实验室后方可离开实验室形态学实验（一）形态学实验（一）实验主要内容Ø小白鼠的捉拿与固定、注射方法Ø动物麻醉及正确使用手术器械方法Ø肝硬化模型制备方法Ø解剖小白鼠并观察腹腔脏器及解剖位置（重点观察胆总管重点观察胆总管）小白鼠的生物学特性１）体型小，体重20-40g，寿命一般为2-3年。

２）性情温顺，胆小怕惊，对外来刺激极为敏感３）属杂食性，胃容量小，不耐饥饿对温、湿度变化敏感４）性成熟早，繁殖力强小白鼠的捉拿与固定方法先用右手将鼠尾抓住并提起，将其旋转数周后放在实验台面上，在小白鼠向前爬行时用力向后拉尾，此时用左手的拇指和食指捏住小白鼠两耳和头颈部皮肤，然后将鼠置于左手心中，拉直后肢并用左手无名指和小指压紧尾巴和后肢，右手即可作注射、灌胃等实验操作常用给药途径与方法１）注射给药法：肌内注射　　　　　　　　皮下注射　　　　　　　　皮内注射　　　　　　　　腹腔注射　　　　　　　　静脉注射２）口服给药法：饲料给药　　　　　　　　胃管给药　　　腹腔注射方法Ø小白鼠做实验时，以左手抓住动物，使腹部向上，右手将注射针头于左下腹部刺入皮下，使针头向前推0.5～1.0cm，再以45度角穿过腹肌，固定针头，缓缓注入药液，为避免伤及内脏，可使动物处于头低位，使内脏移向上腹Ø可先回抽注射器，确认无血管或脏器刺破Ø切勿用力过猛，以免刺伤内脏器官动物术前准备实验前动物需：　　　　禁食 12-24小时　　　　禁水 4-6小时　　以免手术时出现呕吐及窒息死亡等现象　　动物实验常用麻醉剂（１）吸入性麻醉剂：（１）吸入性麻醉剂：乙醚、氯仿等　　特点：a.麻醉量与致死量相差大；b.麻醉深度易于掌握；c.麻醉后恢复快（２）非吸入性麻醉剂：（２）非吸入性麻醉剂：巴比妥类、氨基甲酸乙酯、水合氯醛、氯胺酮等　　特点：优点是使用方法简便、麻醉过程平稳，且一次用药便可维持较长时间等；缺点是动物的苏醒较慢，麻醉深度和使用量较难控制。

5%5%水合氯醛，按水合氯醛，按0.2m1/20g0.2m1/20g腹腔注射腹腔注射麻醉药给药途径１）注射给药法：１）注射给药法：肌内注射　　　　　　　　皮下注射　　　　　　　　皮内注射　　　　　　　　腹腔注射　　　　　　　　静脉注射２）口服给药法：２）口服给药法：灌胃法３）其他途径：３）其他途径：呼吸道给药　　　　　　　脊髓内给药　　　　　　　直肠内给药　　麻醉效果的观察Ø呼吸呼吸：深慢而平稳Ø反射活动反射活动：明显迟钝Ø肌张力肌张力：全身肌肉松弛Ø皮肤夹捏反应皮肤夹捏反应：皮肤夹捏反射消失正确持剪刀法为拇指拇指和第四指第四指分别插入剪刀柄的两环，中指中指放在第四指环的剪刀柄上，食指食指压在轴节处起稳定和向导作用，有利操作 不要被我发现不要被我发现正确持镊法正确持镊是用拇指对食指与中指 (1)正确持镊(2)错误持镊缝 　　针Ø缝针是用于各种组织缝合的器械，它由三个基本部分组成，即针尖，针体和针眼Ø圆针：弧度大者多用于深部组织及软组织 Ø三角针：前半部为三棱形，较锋利，用于缝合皮肤、软骨、韧带等坚韧组织，损伤性较大 Ø铲头针：临床较少用圆针三角针铲头针直针器械打结法肝硬化造模的主要方法Ø化学性肝硬化模型Ø结扎胆总管肝硬化模型Ø实验性免疫肝硬化模型Ø血吸虫虫卵所致肝硬化模型Ø转基因肝硬化模型Ø复合法化学性肝硬化模型ü无色、易挥发、不易燃的液体。

具氯仿的微甜气味化学性质稳定ü分子量153.84，微溶于水，可与乙醇、乙醚、氯仿及石油醚等混溶ü操作注意事项：有毒，加强通风CCl4结构式四氯化碳（ CCl4 ）：carbon tetrachlorideCCl4对肝脏损伤机理CCl4通过肝微粒体细胞色素P450氧化酶激活后,产生自由基CCl3-及ClCCl3-与肝细胞内大分子发生共价结合,破坏肝细胞功能肝纤维化、肝硬化CCl4模型制备过程•给药时间：腹腔注射２次/周，共4周，最后一次给药24h之后处死并取材•药物剂量：20% CCl4  0.1ml/20g•特点：成功率高、方法成熟，但动物个体差异较大　　　　　　CCl4 : 橄榄油＝１:４即20％的CCl4注射CCl4注射后肝脏变化注射CCl4一个月后正常小白鼠肝脏正常组正常组CCL4 组组CCL4 组组结扎胆总管肝硬化模型固定备皮切开皮肤切开腹膜消毒正常人体胆总管解剖小白鼠胆总管位置肝脏肝脏剑突剑突十二指肠十二指肠胆总管胆总管十二指肠十二指肠上动脉上动脉结扎胆总管进腹后提出十二指肠，近十二指肠处游离胆总管，进腹后提出十二指肠，近十二指肠处游离胆总管，两端两端丝线结扎丝线结扎切断胆总管、缝合结扎胆总管手术过程Curr Protoc Toxicol. 2012 May;Chapter 23:Unit 23.1术后１周后胆管明显扩张胆囊胆囊胆囊管胆囊管肝总管肝总管胃胃胆囊胆囊肝脏肝脏术后１周后可见胆囊、胆术后１周后可见胆囊、胆囊管及肝总管明显扩张；囊管及肝总管明显扩张；皮肤、肝脏明显变黄皮肤、肝脏明显变黄正常组正常组BDL组组BDL组组每个组每个组 4只只正常组正常组 1只只加药组加药组 3只只考核方式考核方式: 1.平时成绩（平时实验操作能力，实验态度，出勤率 ） 30% 2.实验报告书 70%思　考　题Ø肝纤维化和肝硬化的病理特点？Ø人体肝门部解剖特点？手术时注意事项？Ø人体胆总管与十二指肠的关系？Ø肝外胆汁淤积引起肝损伤的机理？Ø胆漏的原因及临床表现？。