薄层层析常用显色剂配制及显色方法.docx

通用试剂(1) 重络酸钾-硫酸：检查一般有机物.喷洒剂:5克重络酸钾溶于100毫升40%硫酸中.薄层检查：喷洒后加热到150C至班点出现(2) 荧光素-溴:检查不饱和化合物喷洒剂:0.1克荧光素溶于100毫升乙醇中溴试剂:5%的溴的四氯化碳溶液喷洒后处理：喷洒荧光素溶液后，放置存有溴溶液的缸内，可于紫外线分析灯下检查荧光，荧光素与溴化和成曙红(Eosin)(无萤光),而不饱和化合物则成溴加成物，保留了原有荧光；若点样较多，则呈黄色斑点底板呈红色.(3) 碘:检查一般有机物.方法:a层析谱放密闭缸内或瓷盘内，缸内预先放有碘结晶少许，大部分有机化合物呈棕色斑点B层析谱放碘蒸气中5分钟(或喷5%碘的氯仿溶液)取出置空气中待过量的碘蒸气全部挥发后，喷1%淀粉的水溶液，斑点转成蓝色4) 硫酸：通用喷洒剂：5%的浓硫酸乙醇溶液，或15%浓硫酸正丁醇溶液，或浓硫酸一醋酸(1:1)喷洒后处理：空气中干燥15分钟，再热至110C直至出现颜色或荧光5) 硝酸银—氢氧化铵(Tollen-Zafaroni)试剂：检查还原性物质溶液I:0.1%N硝酸银；溶液II:5N氢氧化铵喷洒剂：I和II以1:5混合(临用前混合)喷洒后处理：105C加热5~10分钟,至深黑色斑点出现.磷钼酸或磷钨酸，硅钨酸:检查还原性物质，类脂体,生物碱,甾体喷洒剂:5~10%磷钼酸或磷钨酸或硅钨酸乙醇溶液喷洒后处理：120C加热至斑点出现.沉淀试剂：1克硅钨酸溶于20毫升水中,加10%^酸至强碱性.生物碱(6) 硫酸？?=硫酸:检查生物碱及含碘化合物喷洒剂:0.1克硫酸？混悬于4毫升水中，加入1克三氯醋酸，加热至沸,逐滴加入浓硫酸至澄清.喷洒后处理：110C加热数分钟至斑点出现.(7) 碘化铋钾(Dragendorff)试剂：检查生物碱及其他含氟化合物.溶液I:0.85克次硝酸铋溶于10毫升冰醋酸40毫升水中溶剂II:8克碘化钾溶于20毫升水中.制备液I+II,等体积混合.可用于棕色瓶中保存较长时间，一般制备液可作沉淀试剂用.喷洒液：制备液1毫升与2毫升醋酸,10毫升水混合即得(8) .碘化汞钾(Mayer)试剂：检查生物碱.制备液：13.55克氯化汞和49.8克碘化钾各溶于20毫升水中，等体积混合并用水稀释至1000毫升.喷洒液：制备液加1/10体积的17縊酸.喷洒后处理：观察斑点，并于紫外线荧光分析灯下检出.(9) ?酸纳-浓硫酸(Mandelin)试剂:检查生物碱.1%酸纳的浓硫酸溶液.与多种生物碱呈不同颜色.(10) 碘—碘化钾(Wagner)试剂:检查生物碱.1克碘及10克碘化钾，溶于50毫升水中，加热,加2毫升醋酸,再用水稀释至100毫升.可作纸层板显色剂，液可作沉淀试剂.酚类,鞣质(11) 三氯化铁:检查酚类及？?酸.喷洒剂:1~5%三氯化铁的水溶液或乙醇溶液.并加盐酸少许.??酸呈红色斑点，酚类称蓝色或绿色斑点.(12) 铁氰化钾-三氯化钾:检查酚类，芳香胺类及还原性物质.喷洒剂：1%铁氰化钾水溶液,2%三氯化铁水溶液.临用前等体积混合.喷洒后处理：喷洒后酚性物质呈蓝色斑点.再喷2N盐酸,能使颜色加深,纸谱可用烯盐酸洗去喷洒液.(13) 4-胺基安替比林-铁氰化钾(Emerson反应):检查酚类.喷洒剂：I.2%4-氨基安替比林乙醇溶液；II.8%铁氰化钾水溶液.或用0.9%4-氨基安替比林和5.4%铁氰化钾水溶液方法：先喷洒I,再喷洒II,即显色，或再放入密闭缸中，缸内放25%氢氧化铵,即产生橙色至深红色.(14) 对氨基苯磺酸，重氮盐(Pauly试剂)：检查酚类,芳香胺类及能偶合的杂环化合物.喷洒剂:4.5克对氨基苯磺酸，加热溶于45毫升12N盐酸中,用水稀释至500毫升,取10毫升稀释液用冰冷却，加10毫升冷4.5%亚硝酸钠水溶液,0C放15分钟(此试剂于0C可保存3天),用前加等体积1%碳酸钠水溶液.一般重氮化试剂，也可用联苯胺，对硝基苯胺等.(15) 对甲苯磺酸：检查甾体,黄酮,鞣质.喷洒剂:20%对甲苯磺酸氯仿溶液.喷洒后处理：100C加热数分钟，紫外线分析灯下检查荧光斑点.含氧杂环及蒽醌类*(16) 三氯化铝：检查黄酮体.喷洒1%E氯化铝乙醇液于紫外线荧光分析灯下检示，呈黄色荧光(17) 碱式醋酸铅：检查黄酮体.喷洒剂：饱和碱式醋酸铅(或饱和醋酸铅)水溶液.于紫外线荧光分析灯下检查荧光斑点.(18) 醋酸镁：检查蒽醌甙，甙元及黄酮体喷洒剂:0.5%醋酸镁甲醇溶液方法:90C加热5分钟,呈红色至紫色斑点.(19) 氢氧化钾：检查香豆素，蒽醌甙及甙元喷洒剂:5~10%氢氧化钾的甲醇溶液.于日光及紫外线荧光分析灯下检示斑点.萜类,甾体(20) 三氯化锑(Carr-Price试剂)：检查甾体,萜类,皂类.喷洒剂:25克三氯化锑溶于75克氯仿中(亦可以用氯仿或四氯化碳的饱和溶液).喷洒后处理：100C加热5分钟,于紫外线荧光分析灯下检示荧光.(21) 五氯化锑：检查甾体，萜类,皂甙.喷洒剂：五氯化锑-氯仿或四氯化碳(1:4),用前新鲜配制.喷洒后处理：120C加热至斑点出现，并于紫外线荧光分析灯下检示.(22) 香兰醛-硫酸：检查高级醇类，酚类,甾体,萜类,芳香油.喷洒剂:1克香兰素溶于100毫升浓硫酸，或0.5克香兰醛溶于100毫升硫酸-乙醇(4:1)中.喷洒后处理：室温或120C加热观察显色斑点.(23) 4-二甲氨基苯甲醛，醋酸，磷酸(E.P.试剂)：检查？Azulene及？前体Proazulene.喷洒剂：0.25克4-二甲氨基苯甲醛，溶于50毫升醋酸5克85%磷酸和20毫升水的混合液中(棕色瓶中保存数月)?:烃室温即成蓝紫色斑点,＞前体于80C加热10分钟出现蓝紫色斑占八、、・(24) 氯胺T—三氯醋酸：检查强心甙.喷洒剂:I.3%氯仿T水溶液新鲜制备.II.25%三氯醋酸乙醇溶液(能保存数天).10毫升I加40毫升II,用前混合.喷洒后处理：110C加热7分钟,紫外线荧光分析灯下检示呈蓝色或黄色荧光.(25) 亚硝酸基铁氰化钠-氢氧化钠(Legal试剂)：检查不饱和内酯;甲基酮或活性次甲基，常用于强心甙喷洒剂：1克亚硝基铁氰化钠溶于100毫升2N氢氧化钠-乙醇(1:1)的水溶液.显红色或紫色斑点.(26) 3,5-二硝基苯甲酸(LegaI试剂)：检查强心甙，a,B-不饱和内酯.喷洒剂：1克3,5-二硝基苯甲酸溶于50毫升甲醇,加入1N氢氧化钾50毫升.强心甙呈紫红色斑点.糖类(27) 邻苯二甲基苯胺：检查还原糖.喷洒剂：0.93克苯氨,1.66克邻苯二甲酸溶于100毫升水饱和的正丁醇中.喷洒后处理：105C加热10分钟.2,3,5-Triphenyl-tetrazoliumchloride(T.T.C.):检查还原糖及其他还原物质。

溶液I:4%(T.T.C.)甲醇溶液；溶液II:1N氢氧化钠喷洒液：I,II，临用前等体积混合喷洒后处理：100C加热5〜10分钟，得红色斑点28) Keller-Kiliani试剂：检查a—去氧糖，常用于强心甙试液：100毫升冰醋酸加三氯化铁试液0.5毫升混合均匀.试样1毫克加试液2毫克溶解后，沿试官管壁滴入浓硫酸2毫升,接触面即显棕色，渐变浅绿,蓝色.最后冰醋酸层全部燃呈蓝色.(29) 1,3-二羟基萘-磷酸：检查糖类.喷洒液：0.2%1,3-二羟基萘(Naphthoresorcinol)乙醇溶液100毫升,与10毫升85%磷酸混合.(30) 费林溶液(Fehling):检查还原糖.溶液I:69.3克结晶硫酸铜溶于1000毫升水中.上述二溶液如不清可滤过.临用前等体积混合.氨基酸(31) 茚三酮：检查氨基酸及氨基糖.喷洒剂:0.3克茚三酮溶于100毫升正丁醇，加入3毫升醋酸;或0.2克茚三酮溶于100毫升乙醇(或丙酮中).喷洒后处理：110C加热至斑点出现.(32) 吲哚醌：检查氨基酸和一些肽.喷洒剂：0.2%吲哚醌(Isatin)丙酮溶液，含4%醋酸；或用100毫升1%吲哚醌丙酮溶液加10毫升醋酸.喷洒后处理：100~110C加热10分钟.(33) 1,2-萘醌-4-硫磺酸(Folin试剂)：检查氨基酸.喷洒剂：新鲜制备0.02克1,2-萘醌-4-磺酸钠，溶于100毫升5%碳酸钠中.喷洒后处理：室温放于，不同氨基酸出现不同颜色.有机酸(34) 酸碱指示剂：检查有机酸.喷洒剂:0.05%溴酚蓝(或溴甲酚绿，或溴麝香草酚蓝)的乙醇溶液.(35) 氧化还原显色剂：检查有机酸.喷洒剂：I.0.075%溴甲酚绿及0.025%溴酚蓝的无水乙醇液.II.0.5%高锰酸钾及1%碳酸钠.10H2O的蒸馏水液.临用前,取I和II按1:1混合后喷酒.喷酒后处理：稳定时间为5~10分钟.对不同的有机酸在纸谱上呈现不同颜色.(36) ???(Acridine):检查酸.喷洒剂：0.005%的？?乙醇溶剂.紫外线分析灯下呈黄色荧光.(37) 芳香胺-还原糖：检查酸.喷洒剂：芳香胺(如苯氨5克)和还原糖(如木质糖5克)溶于50%含水乙醇中.喷洒后处理：125~130C加热出现棕色斑点.。