查氏、TBS、LB培养基等培养基得制备.docx

查氏、TBS、LB培养基等培养基得制备查氏、TBS、LB培养基等培养基得制备1.查氏培养基-CzapekDoxMedium蔗糖30g，NaNO33g，K2HPO41g，KCl0.5g，MgSO47H2O0.5g，FeSO47H2O0.01g，琼脂15g，水1000mL，并用氢氧化钠调节pH至7.2-7.4 121灭菌20min，冷却后备用 液体培养基不加琼脂，用于菌种得扩大培养 成分:硝酸钠3g磷酸氢二钾1g硫酸镁(MgSO47H2O)0.5g氯化钾0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂20g蒸馏水1000mL制法:加热溶解，分装后121灭菌20min 用途:青霉、曲霉鉴定 及保存菌种用 2.TSB培养基-牛肉膏蛋白胨培养基：(牛肉膏5g,蛋白胨10g,NaCl5g,H2O1000mL,pH调至7.27.4 )胰蛋白胨15g，大豆蛋白胨5g，NaCl5g，牛肉膏5g，琼脂15g，水1000mL，并用氢氧化钠调节pH至7.2-7.4 121灭菌20min，冷却后备用 液液体培养基不加琼脂，用于菌种得扩大培养 3.LB培养基-细菌基础培养基(Tryptone10g,Yeastextract5g,NaCl10g,水1000mL,pH调至7.27.4。

)胰蛋白胨10g，酵母提取物5 g，NaCl5g，琼脂15g，水1000mL，并用氢氧化钠调节pH至7.2-7.4 121灭菌20min，冷却后备用 液体培养基不加琼脂，用于菌种得扩大培养 soc培养基-改良得LB培养基SOC培养基组份浓度：2%(W/V)Tryptone，0.5%(W/V)YeastExtract，0.05%(W/V)NaCl，2.5mMKCl10mMMgCl2，20mMglucose 配制量：100ml配制方式1.配制1M得glucose溶液：将18g得glucose溶解在90ml得去离子水中，定容至100ml，用0.22m滤膜 过滤除菌 2.向100mlSOB培养基中加入除菌得1Mglucose溶液2ml，均匀混合 3.调节ph值等于7 4.4保存 作用：含营养较之LB培养基更为丰富，可用于电转化后得感受态细胞得复苏 优点：配好后分装，放在-20得低温冰箱中保存，因是分装，可以避免因取液而发生得污染，可以保存很长时间 SOB培养基-（SuperOptimalBroth）配制每升培养基，在950ml去离子水中加入：胰化蛋白胨20g酵母提取物5gNaCl0.6g摇动容器使溶质完全溶解。

加10ml250mmol/LKCl溶液(将1.86gKCl用100ml去离子水溶解即配成250mmol/l KCl溶液) 用5mol/LKOH调pH值至7.0 用去离子水定容至1L 在121高压蒸汽灭菌20min 该溶液在使用前，加入5ml灭菌得2mol/lMgCl22mol/LMgCl2溶液得配制方式如下：用90ml去离子水溶解19gMgCl2，用去离子水调整体积为100ml，在121高压下蒸汽灭菌20min 1用途：比LB得营养更加丰富，可增加转染效率 微囊藻培养基：BG11培养基(BG11medium)，配方如下：NaNO3150mgK2HPO44mgMgSO4?7H2O7.5mgCaCl2?2H2O3.6mgNa2SiO3?9H2O5.8mg柠檬酸0.6m g柠檬酸铁铵0.6mgEDTA0.1mgNa2CO32mg*A5Solution:0.1mLDistilledwater99.9mL*A5Solution:H3BO3286mgMnCl2?4H2O181mgZnSO4?7H2O22.2mgCuSO4?5H2O7.9mgNa2MoO4?2H2O3.9mgCo(NO3)2?6H2O4.9mgdH2O100mL小球藻培养基：小球藻得培养采用SE液体培养基。

具体配方如下：SE培养基（SEMediun）NaNO3250mgK2HPO4?3H2O75mgMgSO4?7H2O75mgCaCl2?2H2O25 mgKH2PO4175mgNaCl25mg*Soilextract40mLFeCl3?6H2O5mg*Fe-EDTA1mL*A5solution1mLdistilledwater958mL*SoilExtract(土壤提取液)配置方式：取花园土未施过肥0.5kg置于烧杯或三角瓶中，加入蒸馏水1000mL，瓶口用透气塞封口，在水浴中沸水加热2h，冷却数小时，在无菌条件下过滤，取上清液，将灭菌蒸馏水加入上清液至总体积1000mL 土壤提取液保存在4oC备用 *A5Solution:H3BO3286mgMnCl2?4H2O181mgZnSO4?7H2O 22mgCuSO4?5H2O7.9mg(NH4)6Mo7O24?4H2O3.9mgdistilledwater100mL*EDTA-Fe得配置方式：将EDTA和FeCl36H2O分别溶于水和HCl(0.1N),混匀即可 Na2EDTA1gdistilledwater50mLFeCl3?6H2O81mgHCl（0.1N）50mLYPD培养基：(葡萄糖20g，蛋白胨20g，酵母膏10g，水1000mL)YeastExtractPeptoneDextroseMedium(1L)，又叫酵母浸出粉胨葡萄糖培养基，加入琼脂得又叫酵母膏胨葡萄。

糖（YPD）琼脂培养基.用于酵母菌得培养配方：1%YeastExtract（酵母膏），2%Peptone（蛋白胨），2%Dextrose(glucose)（葡萄糖），若制固体培养基，加入2%琼脂粉配制方式：1溶解10gYeastExtract（酵母膏）,20gPeptone（蛋白胨）于900ml水中，如制平板加入20g琼脂粉2高压121度20min3加入100ml20gDextrose(glucose)（葡萄糖），(葡萄糖溶液灭菌后加入)注：葡萄糖，yeastextract,peptone溶液混合后在高温下可能会发生化学反应，导致培养基成分变化，所以要分别灭菌后 再混合 葡萄糖可以过滤除菌，也可以11515min灭菌 YPD另外一种配方：2%Trypton(胰化胨或称胰蛋白胨)、2%Dextrose(glucose)（葡萄糖），若制固体培养基，加入2%琼脂粉，11515min灭菌 液体YPD培养基可常温保存；琼脂YPD平板在4可保存几个月 加入Zeocin100ug/ml，成为YPDZ培养基，可以4条件下保存12周 YPEG：除了用3%乙醇和3%甘油代替葡萄糖作为碳源外，其他成分同YPDYPDZ是在YPD得基础上加上ZEOCIN抗生素。

YPDA是在YPD得基础上加0.003%得腺嘌呤硫酸盐M9培养基M9培养基，一种培养大肠杆菌得已知培养 基葡萄一矿物盐在在l公升烧杯中加入450ml蒸馏水和下各成份将其溶解於水中NH4Cl0.5gNa2HPO43.0gKH2PO41.5g用lNNaOH调整pH到7.4并将整体积调整至494ml,然后把液体倒入一个1公升烧瓶C中,送去灭菌.制备下溶液各50ml,并放在有盖子得瓶子内:1MMgSO4.7H2O20%(w/v)Dextrose(葡萄)1MCaCl2将上述所有溶液及A部份中得烧瓶A,B送去消毒在无菌情况下把1mlMgSO4.7H2O(1M),5ml葡萄20%(w/v)及50ml得氯化钙(lM)加到烧瓶C中以制备M9培养基3灭菌M9母液：64g磷酸氢二钠，15g 磷酸二氢钾，2.5g氯化钠，5.0g氯化铵加1L水灭菌取M9母液200ml加水700ml,加2ml1mol/l已灭菌得硫酸镁，加100微升已灭菌得1mol/l氯化钙（可加可不加） 注意硫酸镁和M9母液要分开灭菌不然会有沉淀 R2A培养基配方g/l酵母粉0.5胰蛋白胨0.25蛋白胨0.75葡萄糖0.5淀粉0.5磷酸氢二钾0.3硫酸镁0.024丙酮酸钠0.3琼脂15.0pH7.20.2配制称18.1克干粉，加1000ml蒸馏水，加热搅拌至完全溶解，121灭菌15分钟。

特点本培养基用于水得菌落计数，它可以修复被氯气损伤得细菌，支持耐受氯气得微生物得生长 培养要求，低温（20-30）长时间培养（5-7天）这样的到得菌落数比常规菌落总数检测得菌落数更符合实际 使用可以按倾注平板法，或滤膜法操作，然后20-28培养5-7天，计数 6Word版本。