柠檬酸产生菌诱变选育及发酵的研究.pdf

每《食品与发哮工业》?? ? !?∀#∃∀ % +3,“?值、培养温度等因家对 其产酸的影响,并确定了其最 佳发酵条件4蔗糖浓度, ≅Α,/?≅∋Β−Χ 9,培养攀初始>?值≅0Δ,培养温度Β Δ℃,在此条件下,发酵Ε天,产酸达 , .0=Α关扭词4黑曲霉,育种,柠棣酸如发酵法生 产柠檬酸大都以黑 曲霉为 菌种,自,− ,Ε年发现 黑曲霉能够合成柠檬酸以来,尚未发现其它种属更好的微生物「’·.飞选择优良的菌株是柠檬酸发酵的关键,优良的菌株 不仅能使发酵工艺简单,操作易行,而且可以获得较高的产酸率和转化率,对 降 低成本,达到高产稳产具有重大意义诱变是获得优良菌株的重 要手段本研究中,以 一株黑曲霉50瓜7 ∀4Φ9一,为出发菌株,经过紫外线、硫酸二乙醋、‘Ν一,型酸度计等0.0分析方法29 3总酸度测定4/∋Δ?滴定法2. 3柠檬酸测定4醋配一毗睫比色法「抓2 Β3还原糖测定4Β,1一二硝基水杨酸比色法·≅1·诱2≅》杂酸检出4纸上层析法展开剂4正丁醇4冰乙酸4水Υ, .,Β41展开温度4室温展开时间4, .小时展开显色剂4澳 甲酚绿佑》抱子液计数4血球计数板计数法2Σ3>?值渊定4精密>?试纸或>?Ν一,型酸度计0Β·实验方法ςΛ4#+4 4‘42 93抱子悬浮液制备4取培养1天的新鲜斜面,用>?Σ0=的磷 故缓冲溶液洗下泡子,转入 . 1?∃ 9容量瓶中振荡,制成单泡子悬浮液。

用血球计数板 计 效‘调整抱子液浓 度为,一, Δ,个抱子Χ# % 92忿3紫外线处理4取Κ∃ 9抱子液,加人预先浇有培养基的培养皿中,将培养皿放置紫外灯下2, 18,灯距为ΒΔ Ω3,分 别照射,1、ΒΔ、≅1分钟,将处理过的抱子液适当稀 释,涂皿分离,选出的菌落移置料面上培养,测定产酸2Β3Σ‘ , ‘>7>·⋯∋)(23一4?浓 度∗,#≅ ?图)氮源浓度对产酸的影响诊于,0Δ时,菌体不能生长发育0ΧΧ0≅ 0 . Δ ΖΔ?次?住释仑图)的结果表明,合适的23)嗯浓度为∋#厂∃结论少?次?注眯七门% %门ΔΕ,Δ, Δ 一 ‘乃乙勺1)Φ任Γ ΕΓΓ卫ΓΕ, ,5Δ门Η Ι,一5Δ 门Η Ι/月匕一了ϑΕ ΓΕΓ一5 ΓΕ Η Ι”毕瑞, 不护Κ育一节一一沮度∗℃?图/培养温度对产酸的影响图/的结果表明,温度低时,曲线上升比较平稳9温度过高时,曲线下降比较陡,这是因为微生物的死亡活化能比生长活化能大,对高温更敏感些从图中可以看出,适宜的发酵温度为∋ (℃∗Α?初始Β3值对产酸的影 响对 柠檬酸发酵来说,其 合成 过 程涉及到一系列氧化还原反应,因此,氧化还原电位起着至关重要的作用。

而Β3值明显地影响 氧化还原电位,所以,Β3值对柠檬 酸发醉过程,特别是柠檬酸的积累起着重要的作用「,了对不同初始Β3值进行发醉培养试验,结 果如图Α图Α结果表 明,柠檬酸 发酵的最 适Β3值为)(这可能是抱子萌发需要较高的Β3值Β3过低会影 响菌体的生 长当Β3值小·)ϑ∗%?用紫外线、硫酸二乙醋、‘4 Λ一Μ射线等诱变因子交替处理出发菌株ΝΟ妙ΕΠ%一%,筛选出一株 产酸 较高的变异株Ν Ο !Θ Η ΕΠ,一+,柠檬酸产率由+∋# Ν,.0=Α?]∀(&对∀∋∀( 8 ∋+∋%0 Σ?#&∋%&] ∋∀&? #+?%∀(&#(∀+? ∗# Ω∀8∋+∋9&∀# % ∋&(β∀9Γ∃∗ΖΦ9一.8∴(∀∴∋ ∀∀∗∃∗9∋&∀∋ ∀( 6#? ∗∀&(?%8∋+(%β∀+&(Ζ7∋&∀ ,+∗∀∴∋+4+ ∗7∋#+?∗ #∀∀+,+ ∗7∋#∀? % ∀∀%&# ∋&(?%,%(&#?罗%+?∗#∀∀ +,%(&# ?罗%∀?% Ω∀%&#∋&(?%,(%(&(∋9>?β∋9∗∀?] ∃司(∗∃∋%∀∗9&∗# ∋ 9&∀∃>∀#∋&∗ # ∀∀&∀0Ξ∴∀] ∀#∃∀% &∋&(β ∀∀?% (&(?% +8∀ # ∀?>&(∃(Ο ∀ ∋+] ?9 9?,+4+∗∀#?+ ∀,≅陌,/?0?≅0Δ,&∀∃>∀ #∋&∗#∀ΒΔ℃·ϑ盯知# +45+ 6曰Ζ 7 (,,Δ1,之7∀#,<(&#(∀∋ ∀( ,Τ# ∀ ∀ (%7·扮命。