芝麻素对高脂血症大鼠脂代谢的作用.doc

1芝麻素对高脂血症大鼠脂代谢的作用【摘要】 目的 探讨芝麻素对高脂血症大鼠脂代谢紊乱的作用方法 选择 SD 大鼠，喂饲高脂饲料，建立高脂血症大鼠模型然后对高脂模型大鼠进行芝麻素干预 7周后，检测各组大鼠的血脂、抗氧化酶和过氧化产物水平，观察肝脏组织的形态学变化结果 芝麻素可以降低高脂血症大鼠血清总胆固醇(total cholesterol, TC)、甘油三酯(triglyceride, TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol, LDL-C)及载脂蛋白 B(apolipoprotein B, apoB)的水平，适当升高高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol, HDL-C)和载脂蛋白 A(apolipoprotein A, apoA)的含量(P0.05)；可以降低高脂血症大鼠血清自由基代谢产物丙二醛(malondialdehyde, MDA)的含量，同时提高超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)的活力，提高机体抑制羟自由基的能力(P0.05)；芝麻素高、中、低剂量组对高脂血症大鼠肝脏的脂肪变性有不同程度的缓解作用。

结论 芝麻素可以调节高脂血症大鼠的脂代谢，缓解机体的氧化应激，改善高脂血症大鼠肝脏的脂肪变性 【关键词】 高脂血症；脂代谢；氧化应激；大鼠；芝麻素ChinaABSTRACT: Objective To study the effects of sesamin on lipid metabolism disorders in hyperlipidemia rats. Methods The hyperlipidemia SD rat models were established with high-fat diet. These rats had been interfered by sesamin for seven weeks, and then had their levels of serum lipids, antioxidant enzymes and peroxidation products determined. The morphological changes in their livers were observed. Results Sesamin could reduce the hyperlipidemia rats serum total cholesterol, triglyceride, low-density lipoprotein cholesterol and apolipoprotein B levels, and properly increase high-density lipoprotein cholesterol and apolipoprotein A contents (P0.05). It also reduced the rats free radical metabolites in serum MDA contents, raised the activities of superoxide dismutase and glutathione peroxidase, and enhanced the body s capacity of inhibiting hydroxyl free radicals (P0.05). Sesamin of high, medium and 2low dosage had different effects in relieving liver steatosis of the hyperlipidemia rats. Conclusion Sesamin can regulate lipid metabolism of hyperlipidemia rats, alleviate oxidative stress of the body, and improve liver steatosis.KEY WORDS: hyperlipidemia; lipid metabolism; oxidative stress; rat; sesamin随着居民生活方式的改变，糖尿病、心血管疾病等慢性病的发病率逐年增加。

我国疾病监测系统资料表明：从 1991～2000 年中国慢性病死亡人数占总死亡人数的比例呈持续上升趋势，已经由 1991 年的 73.8%上升到 2000 年的 82.1%，2000年全国总死亡人数 731 万，慢性病死亡者将近 600 万，其中死于心血管疾病的250 万、糖尿病直接死亡 9 万，分别占总死亡人数的 34.2%和 1.2%[1]慢性病已成为我国城乡居民死亡的主要原因，严重威胁人类健康做好慢性病的一级预防是控制其发病率增长的关键，而引发上述疾病的原因与高脂肪、高胆固醇等高热量膳食摄入有关，特别是与高脂血症密切相关[2-4]因此，预防和控制脂代谢紊乱，对于有效预防高脂血症，乃至防治代谢相关疾病，均具有重要的理论价值和现实意义应用食品中的功效成分预防和治疗疾病已成为营养科学研究领域的热点芝麻作为常用的油料作物，其营养价值已经得到公认[5-6]，但其主要活性成分——芝麻素[7-8]国内研究尚少本实验主要通过芝麻素干预高脂血症大鼠以初步探索芝麻素调节脂代谢的作用1 材料与方法1.1 受试物和实验动物芝麻素(sesamin)：淡棕色粉末，批号 SE20070603，由陕西慧科生物有限责任公司提供。

用食用植物油稀释成 8、16、32g/L 三种质量浓度，4℃冰箱保存备用使用前置室温并混匀，按 5mL/(kg·d)给动物灌胃芝麻素干预剂量设计：低(C 组)、中3(D 组)、高(E 组)剂量干预组，芝麻素灌胃量分别为 40、80、160mg/(kg·d)另设基础饲料对照组(A 组)；高脂饲料模型组(B 组)健康雄性 SD 大鼠 50 只，体重 150～180g，由西安交通大学医学院实验动物中心提供，动物合格证编号：医动字第 08-005 号大鼠分笼饲养，每笼 5 只，实验期间每天观察大鼠的一般状况，包括饮食、行为、毛发等情况，每周称量大鼠体重，动物自由摄食、饮水，动物实验室温度 18～25℃，相对湿度 20%～65%1.2 主要试剂和仪器胆固醇、胆盐、猪大油、蛋黄粉等试剂和 TC、TG、MDA、SOD、GSH-Px、羟自由基等试剂盒7170A 全自动生化分析仪、Olympus 光学显微镜、LEICA EG1150H 包埋机、LEICA RM2245 切片机、Motic Med6.0 数码医学图像分析系统、E4500 Nikon 彩色数码摄像系统等1.3 高脂饲料构成和高脂血症大鼠模型的建立高脂饲料配方(%)：基础饲料 73.8，胆固醇 1，蛋黄粉 10，猪大油 15，胆盐 0.2。

西安交通大学医学院实验动物中心提供基础饲料并加工制作成高脂饲料实验期间，A 组大鼠喂饲基础饲料，其余各组大鼠均喂饲高脂饲料于实验的第 0 周和第 5 周末，将大鼠禁食不禁水 12h 后，抽取 A 组及其余各组大鼠的尾血，测定血清 TC、TG 水平，分析确定高脂血症模型建立情况1.4 芝麻素干预确定大鼠高脂模型建立成功后，按设计剂量及分组从实验第 6 周至第 12 周对4各干预组进行芝麻素干预A 组和 B 组同时给予同体积食用植物油每周按体重调整灌胃量1.5 标本采集及观察指标实验第 12 周末，将大鼠禁食不禁水 12h 后，采集血液及脏器标本大鼠空腹12h 后称重，用 30g/L 戊巴比妥钠溶液腹腔注射麻醉，麻醉剂量为 30mg/kg血液样本：迅速解剖大鼠，心脏取血 7mL 不加抗凝剂，静置 2h 后，2000r/min 离心15min，取血清用 7170A 全自动生化分析仪测定 TC、TG、HDL-C、LDL-C、apoA、apoB，用酶化学法测定各组大鼠的血清抑制羟自由基能力、SOD、MDA、GSH-Px肝脏组织标本：取出大鼠的肝脏组织后，用生理盐水洗去血迹，用刀片分割成 0.5cm×1.0cm 左右的小块放入 100g/L 的中性甲醛溶液中浸泡固定，HE 染色，观察形态学变化。

1.6 统计学分析应用 SPSS13.0 对实验数据进行统计学分析数据以均数±标准差(±s)表示，显著性检验采用单因素方差分析(One-Way-ANOVA)，多组均数间的两两比较采用LSD-t 检验，两组均数间比较采用 t 检验以 P0.05 为差异有统计学意义 2 结 果2.1 大鼠的一般状况实验期间对照组大鼠一般状况良好，毛色有光泽，活动自如，摄食、饮水正常高脂模型组大鼠开始进食良好，随着高脂饮食时间的延长，大鼠毛色渐偏黄，光泽度差，进食减少芝麻素干预前(5 周末)，各干预组随机选取一只大鼠解剖，观察5高脂模型的建立情况12 周末，解剖大鼠观察心、肾、肺、脾等脏器，未见外观上的异常2.2 血脂谱的变化实验 5 周末时模型组大鼠的血清 TC、TG 与对照组比较，模型组的血清TC、TG 均高于对照组(表 1)；实验 12 周末时模型组大鼠的血清 TC、TG 与对照组比较，模型组的血清 TC、TG 均高于对照组(表 2)，表明实验期间模型组大鼠一直维持高脂状态；实验 12 周末时，芝麻素低、中、高剂量组的血清 TC、TG 与模型组比较，显示芝麻素可以不同程度的降低各干预组大鼠的血清 TC、TG 水平(表 2)；实验 12 周末时，芝麻素对低、中、高剂量组大鼠的血清 HDL-C、apoA 有不同程度的升高作用，而对 LDL-C、apoB 有不同程度的降低作用(表 3)。

表 1 5 周末时对照组和模型组大鼠血清 TC、TG 值的比较（略）与对照组比较，*P0.05表 2 实验 0 周和 12 周末时各组大鼠血清 TC、TG 值的比较（略）与对照组比较，*P0.05；与模型组比较，#P0.05表 3 芝麻素对各组大鼠 HDL-C、LDL-C、apoA、apoB 的影响（略）与对照组比较，*P0.05；与模型组比较，#P0.052.3 氧化与抗氧化指标的变化实验 12 周末时，芝麻素对低、中、高剂量组大鼠的血清 MDA 有不同程度的降低作用(表 4)，而对血清 SOD、GSH-Px 活力和抑制羟自由基能力有不同程度的升高作用(表 4、表 5)表 4 各组大鼠血清 MDA 含量和 SOD 活力的变化（略）与对照组比较，*P0.05；与模型组比较，#P0.05表 5 各组大鼠血清 GSH-Px 活力和抑制羟自由基能力的变化（略）与对照组比较，*P0.05；与模型组比较，#P0.0562.4 肝脏组织形态学的变化各组大鼠肝脏肉眼观察：对照组大鼠肝脏呈暗红色，质地均匀，形态规则，未见异常；高脂模型组大鼠肝脏色泽泛黄，黄白相间，触之有油腻感肝脏切片 HE染色(光镜 40×)观察：对照组大鼠的肝脏切片在镜下可见肝窦清晰，肝索排列整齐，肝细胞呈多边形，中央有大而圆的核，核形态正常，细胞质均匀(图 1A)。

模型组大鼠的肝小叶界限不清，肝窦、肝索排列不规则，细胞内明显脂肪变性，全小叶肝细胞均可见大小不等、数量不一的脂肪空泡，有的为细小的脂滴散布于核周；有的则较大，密布于整个胞浆中；严重者融合为较大的脂泡，肝细胞结构消失，肝脏出现明显的弥漫性脂肪变性(图 1B)芝麻素低剂量组大鼠的肝脏脂肪变性较明显，有较多的脂肪空泡分布于细胞周围，与模型组相比，脂肪变性程度有所减轻(图 1C)芝麻素中剂量组大鼠的肝细胞胞浆内出现大小不等、数量不一的脂肪滴或脂肪空泡，肝细胞脂肪变性主要位于肝小叶周边带，脂肪沉积较多，但与模型组相比，脂肪变性的肝细胞数目。