革兰氏染色实验步骤.docx

创作时间：二零二一年六月三十日革兰氏染色之吉白夕凡创作创作时间：二零二一年六月三十日一.实验流程：1、取载玻片用纱布擦干，载玻片的一面用marker笔画一个小圈（用来年夜致确定菌液滴的位置）.涂菌的部位在火焰上烤一下，除去油脂.2、涂片：液体培养基：左手持菌液试管，在酒精灯火焰附近5cm左右翻开管盖；右手持接种环在火焰中烧灼灭菌，等冷却后从试管中沾取菌液一环，在洁净无脂的载玻片上涂直径2mm左右的涂膜，最后将接种环在火焰上烧灼灭菌.固体培养基：先在载玻片上滴一滴无菌水，再用接种环取少量菌体，涂在载玻片上，使其薄而均匀.3、晾干：让涂片在空气中自然干燥^4、 固定：让菌膜朝上，通过火焰2-3次固定（以不烫手为宜）.5、 染色：将固定过的涂片放报纸上，滴加草酸镂结晶紫液，染1min.6、水洗：用水缓慢冲刷涂片上的染色液，用吸水纸吸干.简单染色结束可观察细胞形态.7、媒染：滴加1滴碘液，染1min,水洗.8、 脱色：吸去残留水，连续滴加95%乙醇月^色20-30S至流出创作时间：二零二一年六月三十日创作时间：二零二一年六月三十日液无紫色，立即水洗.9、 复染：滴加蕃红复染3-5min,水洗.至此，革兰氏染色结束.二.染色结果：革兰氏阳性菌都呈紫色，革兰氏阴性菌都呈红色.备注：1 .革兰氏阳性菌：葡萄球菌属（主要是金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌等）、链球菌属（肺炎链球菌、草绿色链球菌、肠球菌等）、白喉杆菌、炭疽杆菌、破伤风杆菌、蜡样芽抱杆菌等，其中，金黄色葡萄球菌、肠球菌等为临床重要等病原菌2 .革兰氏阴性菌：埃希氏菌属、枸椽酸菌属、假单胞菌属（绿脓杆菌等）、莫拉菌属（卡他莫拉菌等）、奈瑟菌属（淋球菌、脑膜炎双球菌等）、不动杆菌属（鲍曼不动杆菌、罗菲不动杆菌等）、克雷伯菌属（主要是肺炎克雷伯杆菌）、沙门氏菌属、志贺氏菌属（痢疾杆菌等）、黄杆菌属、变形杆菌属、军团菌属、耶尔森菌属、嗜血杆菌属（杜克雷嗜血杆菌、流感嗜血杆菌等）、产气杆菌属、霍乱弧菌、阴沟肠杆菌等.创作时间：二零二一年六月三十日创作时间：二零二一年六月三十日 。