病原性球菌(共11页).doc

精选优质文档-----倾情为你奉上病原性球菌学习要点：　　 掌握：葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属、淋病奈瑟菌的生物学特性、致病性及微生物检验　　 熟悉：脑膜炎奈瑟菌生物学性状、致病性及微生物检验　　 了解：微球菌属的生物学特性及微生物检验一、葡萄球菌属　 1．生物学特性　　 (1)形态染色：球形或略呈椭圆形，典型的葡萄球菌排列成葡萄串状，无鞭毛，无芽胞，革兰染色为阳性　　 (2)培养特性：营养要求不高，在普通基础培养基上生长良好，兼性厌氧或需氧，最适生长温度为37℃，最适pH值为7.4，与普通平板上可形成圆形、隆起、表面光滑、湿润、边缘整齐、不透明的菌落，菌落因菌种不同而呈现金黄色、白色或柠檬色，色素为脂溶性血平板上，致病菌株可形成β溶血现象　　 (3)生化反应：触酶阳性，多数菌株能够分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖，产酸不产气，致病菌株能分解甘露醇　　 (4)抗原结构：主要有葡萄球菌A蛋白(SPA)，荚膜抗原及多糖抗原　　 (5)抵抗力：在无芽胞的细菌中抵抗力最强对青霉素等抗生素敏感但是耐药菌株逐年增多，已成为医院内感染最常见的致病菌　　 (6)分类：根据色素、生化反应等表型的不同，葡萄球菌可分为金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌3种。

　 2．临床特征　　 (1)致病物质：凝固酶、耐热核酸酶等凝固酶是鉴别葡萄球菌有无致病性的重要指标毒素包括葡萄球菌溶素，杀白细胞素，肠毒素，表皮剥脱毒素，毒性休克综合征毒素-1(TSST-1)　　 (2)所致疾病：有侵袭性和毒素性两种类型侵袭性疾病主要引起化脓性炎症，是葡萄球菌引起的最常见感染如局部感染的疖、痈、毛囊炎等皮肤及肺炎等内脏器官感染；全身感染的败血症、脓毒血症等毒素性疾病由葡萄球菌产生的有关外毒素引起，主要有①食物中毒②假膜性肠炎③烫伤样皮肤综合征④毒性休克综合征　　 (3)免疫性：人类对葡萄球菌有一定的天然免疫力病愈后免疫力不牢固　 3．微生物检验　　 (1)标本采集：不同病型采集不同标本化脓性病灶采集脓汁、渗出液；疑为败血症采集血液；脑膜炎采集脑脊液；食物中毒采集病人呕吐物、可疑食物和粪便等，采集时避免病灶周围正常菌群污染　　 (2)检验程序及方法： 　　　 1)直接涂片镜检：无菌体液标本经染色直接显微镜镜检后，发现有革兰阳性球菌，可做出“查见类似葡萄球菌属革兰阳性球菌”的初步报告　　　 2)分离培养和鉴定：不同标本经处理后接种血琼脂平板经37℃孵育18～24h，观察菌落形态，致病葡萄球菌有β溶血现象。

挑选可疑菌落进一步作形态、生化等方面的鉴定鉴定试验方法及要点如下：　　　　 ①血浆凝固酶试验，鉴定致病性葡萄球菌；　　　　 ②耐热核酸酶试验，用于检测金黄色葡萄球菌产生的耐热核酸酶；　　　　 ③甘露醇发酵试验，金黄色葡萄球菌可发酵甘露醇，该试验为阳性；　　　　 ④SPA的检测，是鉴定金黄色葡萄球菌的指标之一；　　　　 ⑤触酶试验，葡萄球菌该试验阴性，以区别于链球菌；　　　　 ⑥肠毒素的测定，将食物中毒病人的呕吐物或剩余物接种于肉汤管中，孵育后取上清液注射至6～8周龄的幼猫腹腔，若于4h内发生呕吐、腹泻、体温升高、死亡等现象，提示有肠毒素存在二、链球菌属　 1．生物学性状　　 (1)形态与染色：球形或椭圆形，其中链球菌呈链状排列，革兰染色阳性，无鞭毛，无芽胞　　 (2)培养特性：营养要求较高，在血琼脂平板上可形成灰白色、圆形细小菌落，不同群链球菌可出现不同溶血现象，即β溶血环，α溶血环及不溶血　　 (3)生化反应：触酶阴性，一般不分解菊糖，不被胆汁溶解，这两个特性可用来鉴别甲型溶血性链球菌和肺炎链球菌　　 (4)抗原结构：主要有蛋白质抗原，多糖抗原，核蛋白抗原其中M蛋白抗原与致病性有关，多糖抗原又称为C抗原，根据C抗原不同，将链球菌分为20个群，核蛋白抗原无特异性。

　　 (5)分类：按链球菌细胞壁中多糖抗原的不同，将其分为20个血清群(A～H，K～V)，对人致病的链球菌约90％属于A群，即化脓性链球菌　　 (6)抵抗力：不强，对常用消毒剂抗菌药物均敏感青霉素为首选治疗药物，极少发现耐青霉素的菌株　 2．临床特征　　 (1)致病物质：A群链球菌致病力最强，有较强的侵袭力，是最常见的致病性链球菌主要有①链球菌溶血素：分为链球菌溶血素O(SLO)和链球菌溶血素S(SLS)两种②致热外毒素③侵袭性物质：主要包括脂磷壁酸、纤维黏连蛋白结合蛋白、M蛋白等黏附素以及透明质酸酶、链激酶、链道酶等侵袭性酶　　 (2)所致疾病及临床表现：A群链球菌引起的疾病约占人类链球菌感染的90％，可引起化脓性、中毒性和超敏反应性三类疾病①化脓性炎症②猩红热③链球菌性超敏反应性疾病　　 (3)免疫性：人体感染链球菌后血清中可出现多种抗体，但因链球菌的型别多，各型间无交叉免疫力，故常反复感染　 3．微生物检验　　 (1)标本采集：根据不同疾病的特点取不同标本　　 (2)检验程序及方法：　　　 1)直接涂片镜检：无污染标本经直接涂片革兰染色后镜检，发现有典型的链状排列革兰阳性球菌时，可初步报告。

　　　 2)分离培养和鉴定：采用血琼脂平板培养有助于识别链球菌的溶血特性和鉴定，在5％C02环境下，经37℃孵育24h，观察菌落性状，取可疑菌落做进一步鉴定主要鉴定试验方法及要点如下：　　　　 ①杆菌肽试验敏感试验，出现抑菌环者即可初步鉴定为A群链球菌　　　　 ②Optochin敏感试验，抑菌环~14mm为敏感，肺炎链球菌抑菌环为敏感，其他链球菌不出现或抑菌环<14mm，本试验较胆盐溶菌试验鉴别价值更可靠　　　　 ③胆盐溶菌试验，肺炎链球菌阳性，草绿色链球菌阴性　　　　 ④血清学鉴定试验，目前应用较普遍的是商品化试剂盒——STREPTEX，它主要用于检测链球菌群的特异性抗原，出现凝集者为阳性　　　　 ⑤抗SLO试验，常用于风湿性关节炎、急性肾小球肾炎的辅助诊断三、肺炎链球菌　 1．生物学特性：为革兰阳性球菌，呈矛尖状，成双排列，有荚膜，无鞭毛，无芽胞营养要求较高，兼性厌氧菌，可形成中心下陷的脐窝状的菌落，有自溶现象可分解多种糖类，产酸不产气，多数菌株分解菊糖，胆汁溶解试验阳性，Optochin敏感试验阳性，可作为肺炎链球菌与草绿色链球菌的鉴别其抗原成分包括荚膜多糖，菌体多糖，M蛋白抵抗力弱，有荚膜的抵抗力强，对一般消毒剂敏感。

对青霉素、红霉素敏感　 2．临床特征：肺炎链球菌是一种条件致病菌，可以引起大叶性肺炎，其次是支气管炎，可继发胸膜炎、脓胸，还可引起中耳炎、乳突炎和脑膜炎　 3．微生物检验　　 (1)标本的采集：根据病种采集不同的标本　　 (2)检验程序及方法：　　　 1）直接涂片检查，除血液标本，其他标本均可做直接涂片检查如见革兰阳性矛尖状双球菌，周围有较宽的透明区，经荚膜染色确认后可初诊，并报告“找到肺炎链球菌”　　　 2）分离培养，血液、脑脊液增菌培养后，呈均匀浑浊，且有绿色荧光血液、脑脊液增菌后，脓汁或痰标本直接接种于血琼脂，置5％～10％CO2环境中培养后观察菌落，并取可疑菌落做进一步菊糖发酵实训，胆盐溶菌试验和Optochin敏感试验　　　 3）动物实训，小白鼠对肺炎链球菌极为敏感，通常在接种后12～36h，因败血症而死亡　　　 4）荚膜肿胀试验：将接种待检菌的小白鼠腹腔液置于玻片上，混入不稀释的抗荚膜抗原的免疫血清，加少量碱性美蓝染色液后，覆盖玻片，用油镜检查，如发现荚膜出现肿胀为阳性四、肠球菌属　 1．生物学特性：肠球菌为G+，呈单个、成双或短链状排列，无芽胞，无荚膜，营养要求较高，在血平板上可形成灰白色、不透明、表面光滑、圆形菌落，并伴有α或不溶血现象。

能在高盐、高碱条件(pH9．6)，高胆汁(40％)培养基上和10～45~C的环境下生长触酶阴性，胆汁七叶苷水解、万古霉素敏感性及吡咯烷基芳基酰胺酶均为阳性　 2．临床特征：肠球菌所致的感染中最常见为尿路感染，而其中绝大部分为院内感染，亦是引起老年人和严重基础疾病患者败血症的常见病原菌近年来肠球菌耐药菌株及其所致的感染率增加　 3．微生物检验　　 (1)标本的采集：根据病种的不同，可采集尿液、血液及脓性分泌物等标本　　 (2)检验程序及方法：　　　 1)直接涂片：可见单个、成双或短链状排列的卵圆形革兰阳性球菌　　　 2)分离培养：用血平板或选择性培养基，如叠氮胆汁七叶苷琼脂进行分离培养，该培养基可抑制革兰阴性杆菌的生长，而长出的肠球菌菌落为黑色，便于识别　　　 3)鉴定：主要试验有　　　　 ①PYR试验本法是一种快速筛选鉴定试验用于鉴定能产生吡咯烷基芳基酰胺酶的细菌，如肠球菌、链球菌属中的化脓性链球菌、草绿色气球菌和某些凝固酶阴性葡萄球菌等　　　　 ②胆汁一七叶苷试验D群链球菌和肠球菌能在含有胆盐的培养基中水解七叶苷，其生成物与铁离子反应生成黑色化合物，97％的肠球菌在24h培养后呈阳性反应，72h后100％为阳性。

但本法不能区别肠球菌和非肠球菌，进一步鉴定需做盐耐受试验　　　　 ③盐耐受试验肠球菌能在含6.5％NaCl的心浸液肉汤中生长，本法结合胆汁-七叶苷试验可鉴定肠球菌五、奈瑟菌属　 1．脑膜炎奈瑟菌 　　 (1)生物学特性　　　 ①形态与染色：为革兰阴性双球菌，菌体呈肾形，成对排列，新分离的菌株有荚膜和菌毛，无芽胞，无鞭毛　　　 ②培养特性：营养要求高，最适温度为37~C，最适pH为7.4～7.6在巧克力平板上菌落为蓝灰色、半透明、光滑、湿润、扁平、边缘整齐呈露滴状；在血平板上菌落不溶血，无色素；卵黄双抗(EPV)培养基菌落为无色，较大且光滑、湿润、扁平，边缘整齐等　　　 ③生化反应：绝大多数菌株能分解葡萄糖和麦芽糖，产酸不产气(因淋病奈瑟菌不分解麦芽糖，借此与之鉴别)　　　 ④抗原及分型：根据群特异性荚膜多糖抗原不同，将该菌分为13个血清群，其中H、I、K血清群是由我国发现的，我国流行的菌株以A群为主　　　 ⑤抵抗力：抵抗力弱，对干燥、热、寒冷、紫外线、消毒剂等均十分敏感对磺胺类、青霉素、链霉素均很敏感　　 (2)临床特征　　　 ①致病物质：主要有内毒素、荚膜和菌毛　　　 ②所致疾病及临床表现：本菌主要引起流行性脑脊髓膜炎，传染源是病人和带菌者，经飞沫传播，主要临床症状为脑膜刺激征，严重者可死亡，病死率极高。

　　　 ③免疫性：病后可产生群特异性抗体，但不持久　　 (3)微生物检验　　　 1)标本采集：根据临床病程采集不同标本采集的标本应立即送检或用血平板进行床旁接种后立即孵育　　　 2)检验程序及方法： 　　　　 ①直接涂片检查：取脑脊液离心后沉淀物涂片或刺破瘀斑血印片，干燥固定后革兰染色或美蓝染色镜检，若发现中性粒细胞内(或胞外)革兰阴性双球菌，呈肾形成对排列，可初步报告　　　　 ②分离培养：增菌后接种于巧克力琼脂或EPV琼脂，置5％～10％CO2环境中培养后观察菌落，取可疑菌落涂片，并进一步根据相应的生化反应等试验予以鉴定　　　　 ③鉴定：通过直接凝集试验鉴定血清型别，及氧化酶、糖类发酵和触酶试验等生化反应作出鉴定总之，如直接镜检形态为革兰染色阴性双球菌时可初步报告，经分离培养后见菌落特征典型、分解葡萄糖、麦芽糖、产生少量酸，氧化酶试验阳性、血清凝集试验阳性，即可报告“检出脑膜炎奈瑟菌”　 2．淋病奈瑟菌　　 (1)生物学特性：本菌的形态常呈球形或肾形，成对排列，形似咖啡豆，革兰阴性新分离的菌株可有荚膜和菌毛，无芽胞和鞭毛需氧生长，营养要求较高，只能在巧克力琼脂培养基中生长，初次分离时须在5％～10％CO2环境下培养，可形成灰白色的菌落。

本菌只分解葡萄糖，产酸不产气，氧化酶和触酶试验阳性抵抗力弱，对消毒剂敏感，对青霉素、磺胺等抗生素敏感，但是耐药。