最新天然药物化学第五章黄酮类化合物2ppt课件.ppt

天然药物化学第五章黄酮天然药物化学第五章黄酮类化合物类化合物2 2 （一）提取（一）提取黄酮苷类以及极性稍大的苷元（如羟基黄酮等），一般可用丙酮、乙酸乙酯、乙醇提取一些多糖苷类可用沸水提取在提取花青素类化合物时，可加入少量酸（0.1%盐酸，应当慎用，避免发生水解） 大多数黄酮苷元宜用氯仿、乙醚、乙酸乙酯等中极性溶剂提取，而对多甲氧基黄酮类游离苷元，甚至可用苯等低极性溶剂进行提取 三、三、 黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离1. 硅胶柱层析：此法应用范围最广，主要适于分离异黄酮、二氢黄酮、二氢黄酮醇及高度甲基化（或乙酰化）的黄酮及黄酮醇类少数情况下，在加水去活化后也可用于分离极性较大的化合物，如多羟基黄酮醇及其苷类等l吸附规律：极性大吸附牢l如：A 苷元 B 单糖苷 C 二糖苷lRf :A>B>C 2. 聚酰胺柱层析：其吸附强度主要取决于黄酮类化合物分子中羟基的数目与位置及溶剂与黄酮类化合物或与聚酰胺之间形成氢键缔合能力的大小 聚酰胺柱层析可用于分离各种类型的黄酮类化合物，包括苷及苷元、查耳酮与二氢黄酮等黄酮类化合物从聚酰胺柱上洗脱时大体有下列规律：（以下规律也适用于黄酮类化合物在聚酰胺薄层上的行为。

） 三、三、 黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离l（1）苷元相同，洗脱先后顺序一般是：l 三糖苷双糖苷单糖苷苷元l（2）母核上增加羟基，洗脱速度即相应减缓l（3）不同类型黄酮化合物，先后流出顺序一般是： 异黄酮二氢黄酮醇黄酮黄酮醇l（4）分子中芳香核、共轭双键多者则吸附力强，故查耳酮往往比相应的二氢黄酮难于洗脱三、用聚酰胺柱色谱分离下述化合物, 以不同浓度的甲醇进行洗脱, 其出柱先后顺序为(C )→(A )→(D )→( B )下列黄酮化合物（1）用聚酰胺柱色谱，含水甲醇梯度洗（2）用硅胶柱色谱分离，氯仿-甲醇梯度洗脱，分别写出洗脱顺序洗脱顺序：洗脱顺序：聚酰胺：聚酰胺：D>E>C>B>A硅胶：硅胶：A>B>C>D>E影响因素：影响因素：a、溶质的影响、溶质的影响 3. 葡聚糖疑胶(Sephadex gel)柱层析： 对于黄酮类化合物的分离，主要用两种型号的凝胶：Sephadex-G型及Sephadex LH-20型。

Sephadex G 适用于水系统Sephadex LH-20 适用于水及有机溶剂系统 三、三、 黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离葡聚糖凝胶分离黄酮类化合物的机理是： 分离游离黄酮时，主要靠吸附作用凝胶对黄酮类化合物的吸附程度取决于游离酚羟基的数目 分离黄酮苷时，则分子筛的属性起主导作用在洗脱时，黄酮苷类大体上是按分子量由大到小的顺序流出柱体，葡聚糖凝胶柱层析中常用的洗脱剂有：(1) 碱性水溶液（如0.1mol/L NH4OH），含盐水溶液(0.5mol/L NaCl等)2) 醇及含水醇，如甲醇，甲醇-水（不同比例）、正-丁醇-甲醇(3:1)、乙醇等3) 其它溶剂：如含水丙酮、甲醇-氯仿等 三、三、 黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离 （二）梯度（二）梯度pH萃取法萃取法：与酚羟基酸性有关与酚羟基酸性有关 梯梯度度pH萃萃取取法法适适合合于于酸酸性性强强弱弱不不同同的的黄黄酮酮苷苷元元的的分分离离根根据据黄黄酮酮类类苷苷元元酚酚羟羟基基数数目目及及位位置置不不同同其其酸酸性性强强弱弱也也不不同同的的性性质质，，可可以以将将混混合合物物溶溶于于有有机机溶溶剂剂（（如如乙乙 醚醚 ）） 后后 ，， 依依 次次 用用 5%NaHCO3、、 5%Na2CO3、、0.2%NaOH及及4%NaOH水水溶溶液液萃萃取取，，来来达达到到分分离离的的目目的。

的 酸性：酸性： 7，，4 -二二OH   7-或或4 -OH   （溶于）：（溶于）： 5%NaHCO3液液 5%Na2CO3液液 一般一般OH   5-OH 0.2%NaOH液液 4%NaOH液）液） 三、三、 黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离 （三）根据分子中某些特定官能团进行分离 在黄酮类成分的混合物中，具有邻二酚羟基成分与无此结构的成分，可用铅盐法分离不具有邻二酚羟基的成分可被碱式醋酸铅沉淀，达到分离的目的 与黄酮类成分混存的其它杂质，如分子中有羧基（如树胶、粘液、果胶、有机酸、蛋白质、氨基酸等）或邻二酚羟基（如鞣质等）时，也可为醋酸铅沉淀达到去杂目的 三、三、 黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离具黄酮类化合物与铅盐生成的沉淀，滤集后按常法悬浮在乙醇中，通入H2S进行复分解，滤除硫化铅沉淀，滤液中可得到黄酮类化合物。

但初生态的PbS沉淀具有较高的吸附性，因此现多不主张用H2S脱铅，而用硫酸盐或磷酸盐，或用阳离子交换树脂脱铅有邻二酚羟基的黄酮可与硼酸络合，生成物易溶于水，借此也可与不具上述结构的黄酮类化合物相互分离 在实际工作中，常将上述柱层析法与各种经典方法相互配合应用，以达到较好的分离效果 三、三、 黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱色谱法的应用色谱法的应用l硅胶硅胶TLCl聚酰胺聚酰胺TLCl双向纸色谱法双向纸色谱法一一次次二二次次双向纸色谱法双向纸色谱法第一向展开剂：醇性溶剂，如n-BuOH-HAc-H2O (BAW, 4:1:5上层)，分配作用Rf：苷元>单糖苷>双糖苷，一般 苷元>0.7，苷<0.7第二向展开剂：水性溶剂，如：2~6%HAc，3% NaCl等，吸附作用Rf：(1)苷元原点附近，苷>0.5, 糖链越长，Rf越大； (2)苷元：黄酮(醇)，查耳酮 (Rf<0.02) <二氢黄酮(醇)，二氢查耳酮 (Rf 0.1~0.3) 1、黄酮类化合物在甲醇中的、黄酮类化合物在甲醇中的UV谱特征谱特征溶剂：溶剂：MeOH四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱苯甲酰系统 峰带Ⅱ λ220~280nml1 .黄酮、黄酮醇类黄酮、黄酮醇类 峰带峰带I和和II强度相似强度相似nmIIInmIIIl2.查耳酮、橙酮类查耳酮、橙酮类 l带带I 强，带强，带II 次强峰次强峰3.异黄酮、二氢黄酮异黄酮、二氢黄酮(醇醇)类类 带带I 弱，带弱，带II 强峰强峰IIInm 1、黄酮类化合物在甲醇中的、黄酮类化合物在甲醇中的UV谱特征谱特征ØMeOHØMeOH+NaOMeØMeOH+NaOAc（熔融（熔融)ØMeOH+NaOAc （未熔融（未熔融) )ØMeOH+NaOAc+H3BO3ØMeOH+AlCl3ØMeOH+AlCl3+HCl四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱AlCl3/HCl 谱图＝谱图＝AlCl3 ：无邻二酚羟基。

无邻二酚羟基AlCl3/HCl 谱图谱图≠AlCl3 ：：B环有邻二酚羟基：带环有邻二酚羟基：带I 紫移紫移30-40nm四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱AlCl3/HCl 谱图＝谱图＝AlCl3 ：无邻二酚羟基无邻二酚羟基AlCl3/HCl 谱图谱图≠AlCl3 ：：A环和环和B环有邻二酚羟基：带环有邻二酚羟基：带I 紫移紫移50-65nm四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱AlCl3/HCl 谱图＝谱图＝MeOH：无：无3－－OH或或5－－OHAlCl3/HCl 谱图谱图≠MeOH：可能有：可能有3－－OH或或5－－OH1、带、带I 红移红移35-55nm, 可能只有可能只有5－－OH2、带、带I 红移红移60nm, 可能只有可能只有3－－OH四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱黄酮类化合物的波谱黄酮类化合物的波谱2、黄酮类化合物、黄酮类化合物1H-NMR谱谱(DMSO-d6)特征特征 Dimethyl Sulfoxideδ5－－OH：：≈12 ppmδ7－－OH：： ≈11 ppmδ3－－OH：： ≈10 ppm四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱黄酮类化合物的波谱2、黄酮类化合物1H-NMR谱 四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱A环上的芳氢：环上的芳氢：6－－H：： δ 5.7-6.9 (d, J=2.5)8－－H：： δ 5.7-6.9 (d, J=2.5)2、黄酮类化合物、黄酮类化合物1H-NMR谱谱 黄酮醇黄酮醇 四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱A环上的芳氢：环上的芳氢：5-H：： δ 7.9－－8.2（（d, J=9.0 ））6-H：：δ 6.7－－7.1（（dd, J=9.0, 2.5 ））8-H：：δ 6.7－－7.0（（d, J=2.5 ））2、黄酮类化合物1H-NMR谱 二氢黄酮醇 四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱A环上的芳氢：环上的芳氢：5-H：： δ 7.7－－7.9（（d, J=9.0 ））6-H：：δ 6.4－－6.5（（dd, J=9.0, 2.5 ））8-H：：δ 6.3－－6.4（（d, J=2.5 ））2、黄酮类化合物1H-NMR谱 四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱B环上的芳氢（环上的芳氢（H-3’,5’ 较为高场）：较为高场）：H-3’, 5’ ：：δ 6.5－－7.1（（d, J≈8.5 ））H-2’, 6’：：δ 6.5－－7.9（（ d, J≈8.5 ））2、黄酮类化合物1H-NMR谱 四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱B环上的芳氢：环上的芳氢：H-5’ ：：δ 6.7－－7.1（（d, J≈8.5 ））H-2’：：δ 7.2－－7.9（（ d, J≈2.5 ））H-6’：：δ 7.2－－7.9（（ dd, J≈8.5, 2.5 ））2、黄酮类化合物1H-NMR谱 C环上的氢：H-3（黄酮）: δ6.3( 1H, s )四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱H-2（异黄酮）: δ7.6－7.8( 1H, s ); δ8.5－8.7( 1H, s, DMSO-d6 )2、黄酮类化合物1H-NMR谱 C环上的氢（二氢黄酮）：H-2: δ5.22( 1H,dd, J=11.5, 5.0 )H-3: δ2.80( 1H, dd, J=17.0,11.5 ) ( 1H, dd, J=17.0,5.0 )四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱 化合物化合物 H-2 H-3 二氢黄酮醇二氢黄酮醇 δ 4.80-5.00 d( 11.0) 4.10-4.30 d(11.0) 二氢黄酮醇二氢黄酮醇3-O-糖苷糖苷 δ 5.00-5.60 d ( 11.0) 4.30-4.60 d(11.0)2、黄酮类化合物1H-NMR谱 C环上的氢（二氢黄酮醇）：四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱2、黄酮类化合物1H-NMR谱 C环上的氢（查耳酮）：四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱H- α ：： δ 6.50-6.70 ( 1H,d, J=Ca.17.0 )H- β ：： δ 7.30-7.70 ( 1H,d, J=Ca.17.0 )2、黄酮类化合物1H-NMR谱 C环上的氢（橙酮）：四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱苄氢苄氢:δ6.50-6.70( 1H,s ) δ6.37-6.94( 1H,s, DMSO-d6 )2、黄酮类化合物1H-NMR谱 化合物化合物 糖上的糖上的H-1’’黄酮醇黄酮醇3-O-葡萄糖苷葡萄糖苷5.70-6.00黄酮醇黄酮醇7-O-葡萄糖苷葡萄糖苷 4.80-5.20黄酮醇黄酮醇4'-O-葡萄糖苷葡萄糖苷 黄酮醇黄酮醇5-O-葡萄糖苷葡萄糖苷 黄酮醇黄酮醇6及及8-C-糖苷糖苷黄酮醇黄酮醇3-O-鼠李糖苷鼠李糖苷 5.00-5.10二氢黄酮醇二氢黄酮醇3-O-葡萄糖苷葡萄糖苷 4.10-4.30二氢黄酮醇二氢黄酮醇3-O-鼠李糖苷鼠李糖苷 4.00-4.20糖上的氢四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱2、黄酮类化合物1H-NMR谱 苯环上其他取代基的氢： 取代基取代基 δ 甲基甲基 2.04-2.45 ( 3H,s ) 乙酰氧基乙酰氧基 2.30-2.45 ( 3H, s ) 甲氧基甲氧基 3.45-4.10 ( 3H, s )四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱3、黄酮类化合物13C-NMR谱 四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱 取代基取代基 Zi Zo Zm Zp OH 26.6 -12.8 1.6 -7.1 OCH3 31.4 -14.4 1.0 -7.83、黄酮类化合物13C-NMR谱 1）糖上苷化位移和C-1信号苷化位移（酚性苷中）苷化位移（酚性苷中）＋＋4.0－－+6.0（（C-1））四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱苷化位置苷化位置 δC-1(糖糖)7或或2’,3’,4’ 100.0-102.55-O-葡萄糖苷葡萄糖苷 104.37-O-鼠李糖苷鼠李糖苷 99.03、黄酮类化合物13C-NMR谱谱 苷元糖苷化后，直接与糖相连的C-1向高场位移，而邻、对位的C则向低场位移2）苷元的苷化位移四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱4、黄酮类化合物MS谱途径途径I：：途径途径II：：四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱5、黄酮类化合物碱熔降解四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱 提取分离示例：提取分离示例：某植物药材含有以下化合物,用分离流程示意图图示过程提取，分离。

请判断各化合物在分离流程示意图中的位置(也就是将每个化合物的英文代号与分离流程示意图上的阿拉伯数字代号配对)  1 纤维素纤维素2 叶绿素叶绿素 复习：一复习：一.请将下列化合物的结构式和名称配对请将下列化合物的结构式和名称配对,并说明并说明各化合物的结构类型－芦丁、槲皮素、葛根素、水飞各化合物的结构类型－芦丁、槲皮素、葛根素、水飞蓟素蓟素: 二、简答题1、如何用1H-NMR法区别黄酮苷的 α-苷键和 β-苷键 ? 2、请简述以下各类化合物化学结构上的主要区别，并分别说明其旋光性：黄酮，黄酮醇，双氢黄酮，双氢黄酮醇， 异黄酮3、哪些类型的天然化合物可用酸－碱（萃取）法提取，分离？为什么？请举一例  三、用以下指定的方法区别以下各组化合物：  四、四、写出下列各反应产物的结构式：写出下列各反应产物的结构式： 五、某药材含有以下化合物,以图示过程提取,分离请判断各化合物在图中的位置： 分离流程示意图：分离流程示意图：第五章第五章 黄酮类化合物黄酮类化合物 六、从某植物的叶中六、从某植物的叶中,分离到一化合物单体分离到一化合物单体A,其理化性其理化性质质,和波谱数据如下述和波谱数据如下述,请依据之推导它的化学结构：请依据之推导它的化学结构： 化合物A,黄色无定形粉末(H2O), M.P. 178-181℃,盐酸镁粉反应为阳性,三氯化铝反应显黄色萤光.将A以2%H2SO4水解,从其水解液中检出葡萄糖和鼠李糖. A,分子式为C27H30O16,它的1H-NMR(DMSO-d6)数据如下页: 化合物化合物A的的1H-NMR(DMSO-d6): 从某植物中分离出四种化合物，其结构如下：从某植物中分离出四种化合物，其结构如下：l试比较四种化合物的酸性， 极性大小l比较它们的Rf值大小顺序： 1）硅胶TLC，展开剂CHCl3-MeOH（9:2） 2）聚酰胺TLC，60%MeOH/H2OA R1=R2=H 3,5,7,4’-OHB R1=H, R2=Rha 3,5,4’-OH, 7-RhaC R1=Glc, R2=H 5,7,4’-OH, 3-GlcD R1=Glc, R2=Rha 5,4’-OH, 3-Glc, 7-Rha酸性酸性 A>C>B>D极性极性 D>C>B>ARf ：：A>B>C>D D>B>C>A1. 下列黄酮类酸性最强的是（B） A 3′,4′-二OH黄酮 B 7,4′-二OH黄酮 C 6,8-二OH黄酮 D 4′-OH黄酮2. 色原酮环C2、C3间为单键，B环连接在C2位的黄酮类化合物是（D） A 黄酮醇 B 黄烷醇 C 异黄酮 D 二氢黄酮3. 黄酮类化合物大多呈色的最主要原因是（B） A 具酚羟基 B 具交叉共轭体系 C 具羰基 D 具苯环4. 紫外光谱中，主要用于诊断黄酮、黄酮醇类化合物7-OH的试剂是（A） A 醋酸钠 B 甲醇钠 C AlCl3+HCl D 皂苷。