补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识.doc

补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识The Standardization Office was revised on the afternoon of December 13, 2020补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识(-)目的要求学习香豆素类化合物的提取分离及检识，通过实验要求:1. 掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的操作技术2 .通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操作技术3•掌握香豆素类化合物的检识方法)主要化学成分的结构及性质补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L•的干燥成熟果实，全国各地多有栽培含有多种咲喃香豆素类成分，主要含补骨脂内酯(补骨脂素)、 异补骨脂内酯(异补骨脂素)和补骨脂次素等其中补骨脂素和异补骨脂素为 抗白瘢风的主要有效成分，具有光敏性质1 •补骨脂素(psoralen)又称补骨脂内酯.分子式CUH6O3|分子量无色针 状结晶(乙醇)，~190C有挥发性溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微 溶于水、乙酣和石油醛2•异补骨脂素(isopsoralen)分子式CuHoO?,分子量无色针状结晶~138C溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙酣，难溶于冷石油补骨脂素3•补骨脂乙素(isobavachalcone)又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮。

分子式C2oH2o04.分子量黄色片状结晶(甲醇冰),mp・166~167C4.补骨脂甲素（coryfolin）又称补骨脂黄酮.分子式C2oH2o041分子量无色 针状结晶，~192C补骨脂乙素补骨脂甲素（三） 实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药 补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再依据补骨脂 素和异补骨脂素的极性差异，利用柱色谱予以分离四） 实验内容1：把20g补骨脂研磨后用50%乙醇冷浸提取72h, 24h, 24h,每次用六倍量体 积的乙醇铺薄层硅胶板，为了下次筛分离条件，铺好15块板2：用补骨脂素和异补骨脂素的标准品通过TLC筛选硅胶柱色谱的分离条 件根据文献，设计了石油醛：乙酸乙酯10： 1,石油醸：乙酸乙酯8： 1,石 油醍：乙酸乙酯6： 1,石油醴：乙酸乙酯4： 1等儿组流动相配比，经过对Rf 值的比较，最终决定用石油瞇：乙酸乙酯6： 1作为硅胶柱色谱分离的分离系 统把醇提液减压浓缩至剩下20ml水左右萃取：浓缩后的混旋液加蒸谓水至 100ml,用乙酸乙酯萃取三次3. 柱色谱分离，釆用湿法装柱干法上样4. 检识薄层色谱检识薄层板：硅胶G-CMC-Na板试样：补骨脂素乙醇液异补骨脂素乙醇液对照品：补骨脂素对照品乙醇液异补骨脂素对照品乙醇液展开剂：①石油醛醋酸乙酯（6 : 1）显色：紫外灯下观察荧光（五）实验说明及注意事项1. 提取药材应是未炮制过的补骨脂种子,其补骨脂素和异补骨脂素等成分含 量较高。

2. 补骨脂素和异补骨脂素含内酯结构，具有内酯类成分的通性，可用碱提 酸沉法提取，但因补骨脂种子中含有大量油脂和糖类成分，易与碱水发生皂化 反应和形成胶状物，致使难以滤过，降低收得率，故选用50%乙醇提取而不用 碱溶酸沉法提取3. 山补骨脂种子中提取所得的精制品，为补骨脂素和异补骨脂素的混合物 结晶，两者含量近于1 : 1,但随药材品种、质量等不同而有差异在进行干柱 色谱分离之前，应先进行薄层色谱检查，了解两者含量情况因两者皆具有光 敬作用，均为有效成分，故临床应用时，不必将两者分开。