装柱与上样的方法.doc

湿法装柱湿法装柱是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后，再填入柱子中，然后再加压用 淋洗剂“走柱子“，本法最大的优点是一般柱子装的比较结实，没有气泡 干法装柱干法装柱则是直接往柱子里填入硅胶，然后再轻轻敲打柱子两侧，至硅胶 界面不再下降为止，然后再填入硅胶至合适高度，最后再用油泵直接抽，这样 就会使得柱子装的很结实接着是用淋洗剂“走柱子“，一般淋洗剂是采用 TLC 分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂通常上面加压，下面再用油泵 抽，这样可以加快速度干法装柱较方便，但最大的缺陷在于“走柱子“时，由 于溶剂和硅胶之间的吸附放热（可以用手摸柱子明显感觉到），容易产生气泡， 这一点在使用低沸点的淋洗剂时如乙醚，二氯甲烷更为明显虽然产生的气泡 在加压的情况下不易察觉，但是，一旦撤去压力，如在上样、加溶剂等操作的 时候，气泡就会释放出来，严重时，整个柱子变花，样品不可能平整地通过， 当然也就谈不上分离了解决的办法是：第一、硅胶一定要天结实；第二、 一 定要用较多的溶剂“走柱子“，一定要到柱子的下端不再发烫，恢复到室温后再 撤去压力 也有介绍在硅胶的最上层填上一小层石英砂，防止添加溶剂的时候，使得 样品层不再整齐。

但我的感觉是如果小心上样，添加溶剂，则没有这个必要上样上样也有干法干法和湿法湿法之分：干法干法就是把待分离的样品用少量溶剂溶解后， 在加入少量硅胶，拌匀后再旋去溶剂如此得到的粉末再小心加到柱子的顶层 干法上样较麻烦，但可以保证样品层很平整湿法湿法上样就是用少量溶剂（最好 就是展开剂，如果展开剂的溶解度不好，则可以用一极性较大的溶剂，但必须 少量）将样品溶解后，再用胶头滴管转移得到的溶液，沿着层析柱内壁均匀加 入然后用少量 芗 洗涤后，再加入湿法较方便，熟手一般采用此法.关于关于 TLCTLC 和柱层析之我的体会和柱层析之我的体会( (转转) )柱层析和 TLC 是有机化学工作者必须下苦功夫的两项实验技术这两项技 术掌握与否，对于提高实验的效率至关重要常见的例子是：在柱层析时，由 于层析柱中的硅胶填料装得不均匀（没有填严实），使得柱子在淋洗过程中就 因为出现太多气泡变花，导致分离效果不好更常见的例子是：层析柱虽然装 得不错，但是由于淋洗剂选择不恰当，结果导致几十毫克产品，用了几百毫升 淋洗剂都还没有完全分离分离同样的东西，熟手可能只需要半个小时，而一 个层析技术不过关的人可能半天都不能得到纯品。

由此可见，这两项技术掌握 与否，对于提高工作效率，减轻工作量，减少有机溶剂的使用，从而对身心健 康和环境保护都有明显的作用 柱层析关键在于柱子是否装好和淋洗剂是否选择恰当而淋洗剂的选择则 是通过 TLC 确定这里要指出的一点是：TLC 的作用除了跟踪反应进程，检测 试剂和原料纯度外，一个重要的用途就是为柱层析选择适当的淋洗剂 上样完毕后，接着即用淋洗剂淋洗淋洗剂一般采用 TLC 分析得到的展开剂的 比例再稀释一倍后的溶剂由于层析柱和薄板的不同，即使两者使用的硅胶都 相同，但是在把 TLC 分析得到的展开剂用在柱层析时，也显得极性偏大，所以 要稀释一倍，但又不能稀 释太多，否则成了靠扩散作用来分离，效果也不会好接下来谈 TLC，需要切记的是： 第一、某种样品在这种展开剂中只显示一个点，并不等于在别的展开剂中也只 显示一个点因此在寻找展开剂时，多尝试几种比例不同，成分不同的展开剂 展开剂的极性太小，点分不开，极性太大，也分不开.一般以目标产物的 Rf 值 在 0.3 左右为最佳 第二、点不能点得太浓,否则容易重叠,不易判断,因为如果两个点相近的话,一 浓就变成一个点了 第三、板上点的展开的清晰程度和溶剂的极性和物质在该 溶剂中的溶解性有关，只有两者比较合适才能有一个交好的分离效果。

选择适当的展开剂是首要任务.一般常用溶剂按照极性从小到大的顺序排列大概 为：石油迷<己烷<苯<乙醚 展开剂的比例要靠尝试.一般根据文献中报道的该类 化合物用什么样的展开剂，就首先尝试使用该类展开剂，然后不断尝试比例， 直到找到一个分离效果好的展开剂很多时候,展开剂的选择要靠自己不断变换 展开剂的组成来达到最佳效果我在实验中，为了实现一个配体与其他杂质有 效分离，曾经尝试了所有的溶剂用来两两组合后，最后才找到 petroleum ether/THF 这类不常见的混合溶剂 一般把两种溶剂混合时,采用高极性/低极性的体积比为 1/3 的混合溶剂,如果有 分开的迹象,再调整比例,达到最佳效果，如果没有分开的迹象，最好是换溶剂对于在硅胶中这种酸性物质上易分解的物质，在展开剂里 在利用 TLC 跟踪反应 时，在点板的时候往往是反应体系的混和溶液点一个点 A，每种 难挥发的原料 各点一个点 B,C, D 等等，然后所有的原料和反应体系的混合溶剂再共同点 一 个混合点 X，这些点在板上的位置如图所示： A X B C D 这样的好处是展开后可以清楚地看见每个点的位置，把 A 这个点展开后的各个 层份的 点与 B,C,等原料比较，从而判断原料消失没有，点混合点 X 的目的在 于，方便观察，因为 有时候，板展开后，各点的位置有些变形，或者由于边缘 效应等等，使得判断不易。

利用 TLC 判断物质的纯度时，往往要和 NMR 相结合，因为某种样品在这种展开 剂中只 显示一个点，并不等于在别的展开剂中也只显示一个点但有趣的是， 由于 H NMR 可鉴别 的纯度也就在 95%左右，有时候 H NMR 现示较纯的东西，一 点板就会发现有几个点所以，两者要结合使用但是自己以前的样品，则可 以只通过点板来判断纯度作者: hoppy 发布日期: 2006-04-15 谢谢你了但是我的具体问题你没有给与指导？难道你过柱子遇不到这样的问 题？作者: aska928 发布日期: 2006-04-16 你试着选择一种溶剂将你的物质溶解后再拌入硅胶，然后旋转蒸发仪上蒸去溶 剂，应该是成沙状的，如果你的物质是油状物的话制备沙时需要量多一点的硅 胶，至于你说的粘稠状物质中拌硅胶，我实在看不懂，能说的清楚点吗 我过柱子制沙通常用 100－200 目的，不过用 200－300 的也不会有多大的问题， 就是用粗一点的硅胶制沙样品比较容易冲下来 还有我教你一种方法过柱子，就是柱子中先装完硅胶，敲平，再加入制好的沙 敲平，表面上放上棉花（防洗脱剂冲散制好的沙），然后用油泵抽，实在没有就用水泵也可以，最后用洗脱剂冲下来就可以了，记得一定要用加压球加压， 不然你的柱子可就花了。

Goodluck!;)作者: hoppy 发布日期: 2006-04-16 首先谢谢你我得到的产品是沥青状的混合物，其中有两种物质是我需要的， 须过柱子分离沥青状的物质一般硅胶就很难称沙状物，所以我每次花大量的 时间研磨 你的意思是下面用油泵抽，上面用加压球，可以防止花柱？作者: hjiang3 发布日期: 2006-04-17 不管你所到的产品的状态如何,都可以用干法和湿法加样.你所说的情况可能是 硅胶不够. 还有几个问题应该注意:一分离的效果与淋洗剂有直接的关系,建议 用梯度淋洗;二硅胶的用量与产品的多少有关;三硅胶颗粒大小与过拄子的速度 有关,一般说来,在常压时,颗粒越小越慢,但可以通过加压或减压来提高速度.作者: yanyongping6 发布日期: 2006-04-17 硅胶的目数是越大越细,这个不要搞错呀作者: hoppy 发布日期: 2006-04-17 我知道硅胶‘的目数指的是颗粒的大小我们这有人过柱子用 GF254 的硅胶干 法过柱子(铺薄层板所用硅胶，颗粒相当细了)当我问到他们我的问题时他们 告诉我一是我用的硅胶太粗（200-300）；二是拌料所用硅胶太少；我想请问大 家：你们过减压柱用多少目的硅胶？过减压柱时经常出现花柱子?有人告诉过减 压柱出现花柱是正常作者: hoppy 发布日期: 2006-04-17 我知道硅胶‘的目数指的是颗粒的大小。

我们这有人过柱子用 GF254 的硅胶干 法过柱子(铺薄层板所用硅胶，颗粒相当细了)当我问到他们我的问题时他们 告诉我一是我用的硅胶太粗（200-300）；二是拌料所用硅胶太少；我想请问大 家：你们过减压柱用多少目的硅胶？过减压柱时经常出现花柱子?有人告诉过减 压柱出现花柱是正常现象，是真的吗？作者: hoppy 发布日期: 2006-04-18 很感谢大家啊！我知道硅胶‘的目数指的是颗粒的大小我们这有人过柱子用 GF254 的硅胶干 法过柱子(铺薄层板所用硅胶，颗粒相当细了)当我问到他们我的问题时他们 告诉我一是我用的硅胶太粗（200-300）；二是拌料所用硅胶太少；我想请问大 家：你们过减压柱用多少目的硅胶？过减压柱时经常出现花柱子?有人告诉过减 压柱出现花柱是正常现象，是真的吗？作者: hrwen 发布日期: 2006-04-19减压出现花柱是很正常的，这是因为减压的时候容易将空气带入我个人比较 喜欢事发装柱，如果嫌过柱时间长的话，可以在顶端适当加压，比较简单的做 法是用给鱼通氧的小泵，简单快捷，还可以控制过柱速度作者: hoppy 发布日期: 2006-04-19 终于有人给我一个明确的回复，我想减压过柱不可能避免花柱，谢谢你了，我 也学着过加压柱。

作者: abcdsmart 发布日期: 2006-04-19 其实，问题不是硅胶的原因，是你在上柱子的时候没有沉降好，就可能加压或 者减压，那肯定花掉了，这次你用同样的硅胶，多沉降一会，跑起来了在抽， 应该没有了！等你的回信作者: dayongpeng80 发布日期: 2006-04-19 减压柱出现花柱是正常现象,我以前经常遇到，柱子短一点可能要好一些的作者: hoppy 发布日期: 2006-04-20 我过减压柱经常花柱，同学告诉我硅胶太粗了（200-300 目）,他们用 GF254 的 硅胶很少花柱，而且用紫外灯在柱子上一照就知道自己需要的物质下来没有， 因为他们是院士的学生不用担心经费我呢不可能用 GF254 硅胶过柱，我湿法 采用（100-200 目的；干法用（200-300 目），我经常用水泵抽一下午再把拌的 硅胶装上开始用石油醚流量遍，然后再加石油醚和乙酸乙酯的混合淋洗剂 虽然我所需要的物质能分离开，但是每次都出现花柱现象，生怕老板看见，所 以在这儿跟大家讨论.作者: shelly_xiao 发布日期: 2006-04-21 最近也在为过柱子痛苦，因为之前做的少。

淋洗剂一般采用 TLC 分析得到的 展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂请问用什么将展开剂稀释一倍？作者: luoj87 发布日期: 2006-04-21 其实楼主过粘稠状物不必拌硅胶,我也曾分离过类似的糖浆状物,直接加料就可 以过.作者: dickmo 发布日期: 2006-04-21 一跟柱子过 2 天~~？？什么概念啊！ 一天至少能过上 2 跟柱子， 见过的强人一天过 8 跟~作者: hoppy 发布日期: 2006-04-21 我也将粘稠的样品直接上样过，有几次上了样，淋洗剂几乎就不流了，我想可 能给堵死了，后来我就稀释后再加样，这样每次过的太少了作者: sured2006 发布日期: 2006-06-28我过柱子也出现这样的情况，加淋洗剂就会花掉，我担心我要分的物质分不开 我也是用的减压柱？作者: syw96 发布日期: 2006-08-11 还没有开始过柱，不过快要开始了，还要向各位前辈学习。