2022年病理组织固定.docx

2022年病理组织固定病理 固定 组织 　病理组织的固定 ㈠ 凡须要进行病理组织学检查的标本（器官或组织），于离体（活体或尸体）后，应尽快置放（浸泡）于装有足够量固定液的容器中固定固定液量应为被固定标本体积的 5~10 倍置放标本的容器大小视标本和固定液的体积而定，应适当大一些临床科室切取的标本置放于容器中固定后，应尽快送交病理科接着固定未能刚好、充分固定的干枯或腐败标本不能再进行固定和用于制做切片 　㈡ 常规固定液为 4%中性甲醛（10%中性福尔马林），应预先多量配制贮存，以备随时运用。

小标本的固定时间为 4~6 小时，大标本为 18~24 小时或更久 　㈢ 依据病理学特别检查（特别染色和组织化学染色、免疫组织化学染色和原位核酸分子杂交染色、电镜视察等）的须要，应选用其他相宜的固定液进行固定［参见后述的㈦固定液的常用种类和制备］ 　㈣ 器官、组织固定的基本方法 　1．食管、胃、肠、胆囊、膀胱等空腔器官：依规范方法剪开后，按其自然状态平铺于硬纸板上（重点暴露黏膜面或内表面的病变处），并用大头针将标本边缘处固定于纸板上，然后放入 4%中性甲醛中固定（黏膜面或内表面朝向容器的液面，并覆盖薄层脱脂棉） 　2．肝、脾：由器官背面，沿其长轴每间隔 1.5~2.0cm 纵向平行剖开，切成数片将每片肝或脾轻轻地平放于装有 4%中性甲醛的容器中，容器底面衬以脱脂棉应避开标本弯曲和相互间的叠压 　3．肺叶：放入固定液中的肺叶漂移于液面，需在肺表面覆盖薄层脱脂棉必要时从支气管注入适量 4%中性甲醛 　4．肾：沿肾外缘中线朝肾门方向作一水平切面（深达于肾盏），再行固定 　5．淋巴结：先用 4%中性甲醛固定 1 小时后，再沿其长轴切成数片（厚 2 ~3mm），接着固定。

　6．骨组织：先锯成小片（若是长骨应作横向锯片），在 4%中性甲醛中固定24 小时后，再进行脱钙 　7．微小组织或液体沉淀物：先用拭纸或滤纸妥为包袱（需用大头针扎牢），然后放入专用小盒内进行中性 4%甲醛固定，以防检材遗失 　8．凡进入固定程序的标本必需连带其正确无误的病理检验号（病理号） 　㈤ 多数固定液对人体有害，须要防护，必需在封闭的通风条件下进行操作 　㈥ 组织块的切取和固定：①由较大标本切取用于制作切片的组织块（取材）时，应与标本的断面平行，组织块厚度一般为 0.3 cm(不应>0.5cm)，面积一般在 1~1.5×1~1.5 以内②切取组织块的形态，在充分包括肉眼病变的前提下尽量规则些（例如方形、矩形、三角形等）；由一个标本切取的多块组织的形态有所不同，便于蜡块与其相应切片的核对 　③固定组织块的固定液量，一般应为组织块总体积的 5~10 倍以上④室内常温（25℃左右）下的固定时间为 3~24小时；低温（4℃）下的固定时间应延长⑤固定组织块的容器要大一些⑥组织块固定期间须要间断地轻摇或搅动固定液以利于固定液的渗入 　㈦ 常用固定液 　1．4%中性甲醛（10%中性福尔马林）固定液 　甲醛（40%） 　101 ml 　无水磷酸氢二钠 6.5g 　磷酸二氢钠 4.0g 　蒸馏水 900ml 　2．乙醇－甲醛（酒精－福尔马林，AF）固定液 　甲醛（40%） 　101ml 　95%乙醇 900ml 　［说明］一般组织块经乙醇－甲醛固定 1～2 小时后，即可移入 95%乙醇内脱水。

　3．Carnoy 固定液 　无水乙醇 60ml 　氯仿 30ml 　冰醋酸 10ml 　［说明］组织化学染色的常用固定液，组织经 Carnoy 液固定 1～2 小时后，即可移入无水乙醇 中脱水 　4．Zenker 固定液 　升汞 5.0g 　重铬酸钾 2.5g 　硫酸钠 1.0g 　蒸馏水（加至） 　101ml 　［说明］配制本液时，先将升汞溶于蒸馏水中、加温至 40～50℃溶解后，再加入重铬酸钾，最终加入硫酸钠，贮存待用运用前加入 5ml 冰醋酸，混合组织块需固定 12~24 小时切片染色前，需进行脱汞沉淀处理 　5．Bouin 固定液 　饱和苦味酸水溶液（约 1.22%） 　75ml 　甲醛（40%） 　25ml 　冰醋酸 5ml 　［说明］本液临用时配制组织块置于 Bouin 液固定 12～24 小时即可（小块组织只需固定数小时）经 Bouin 液固定的组织被苦味酸染成黄色，可用水洗涤 12 小时后进入乙醇脱水（兼脱色）不必将组织中的黄色除净（残存于组织中的苦味酸无碍染色） 　6．过碘酸－赖氨酸－多聚甲醛固定液（PLP） 　A 液：赖氨酸 1.827g 　蒸馏水 50ml 　0.1mol/L 磷酸盐缓冲液(pH7.4) 50ml 　B 液：8%多聚甲醛水溶液 101ml 　［说明］本液临用时配制：取 A 液 3 份、B 液 1 份，混合后，加入过碘酸钠，使液体终浓度为 2%。

组织块在 4℃下固定 36~54 小时本液对细胞结构和抗原性保存较好 　7．B5（醋酸钠－升汞－甲醛）固定液 　无水醋酸钠 1.25g 　升汞 6.0g 　蒸馏水 90ml 　［说明］将以上物质混合、溶解，运用前加入甲醛 10ml本液多用于固定 　淋巴组织染色前应进行脱汞沉淀处理如不加甲醛称为 B4 固定液（蒸馏水为101 ml） 　8．丙酮固定液 　冷丙酮（4℃）固定液用于酶组织化学染色细胞标本的免疫组化染色也常用冷丙酮固定 10 分钟 第6页 共6页第 6 页 共 6 页第 6 页 共 6 页第 6 页 共 6 页第 6 页 共 6 页第 6 页 共 6 页第 6 页 共 6 页第 6 页 共 6 页第 6 页 共 6 页第 6 页 共 6 页第 6 页 共 6 页。