TU1901紫外可见分光光度计.doc

TU-1901紫外可见分光光度计• 1、检测原理紫外可见分光光度法是利用物质分子对 紫外可见光谱区的辐射的吸收来进行分析 的一种仪器分析方法这种分子吸收光谱 产生于价电子和分子轨道上的电子在电子 能级间的跃迁，可用于定性分析，广泛应 用于无机和有机物质的定量分析紫外可见分光光度法特点 (2、紫外可见分光光度法分类，目视比色法光电比色法一分光光度法紫外分光光度法］，紫外可见分光光度法可见分光光度法'比色分析法：利用比较待测溶液本身的颜色或加入试剂后呈现的颜色深浅来 测定溶液中待测物质的浓度的方法按检测器不同分:目视比色法和光电比色法以人的眼睛来检测颜色深浅的方法称目视比色法；以光电转换器为检测器来区别颜色深浅的方法称光电比色法；根据物质对不同波长的单色光的吸收程度不同而对物质进行定量分析的方法称为分光光度法□灵敏度高，町用于测定试样中1%〜0.001%的微量组分，甚 至可测定低至10-6〜10-7的痕量成分；□准确度较高，测定的相对误差为2%〜5%,采用精密的分光 光度计测量，相对误差可减少到1%〜2%；□分析速度快，操作简便；□价格低廉，应用广泛紫外可见分光光度法应用□紫外吸收光谱可用于芳香化合物及含共辄体系化合物的鉴定与结构分析□紫外与可见分光光度法均可用于定量分析。

0□紫外与可见分光光度法还可用于化学反应平衡的研究紫外可见分光光度计类型口按波长范围划分:A可见分光光度计(400-780nm)＞紫外可见分光光度计(200-1000nm)口按光路划分：＞单光束分光光度计＞双光束分光光度计»双波长分光光度计9、比尔定律光的吸收程度与浓度的关系?2卞朗伯亠比耳定律• 朗伯一比耳定律是光吸收的基本定律， 是分光光度法定量分析的依据• 当入射光波长一定时，溶液的吸光度力是 吸物质的浓度C及吸收介质厚度I （吸收光程） 的函数其常用表达式为，式中£为系数：• 力二£lC紫外可见分光光• 一、基本结构光源、单色器、吸收池、检测器及信号指 示系统五个结成部分分光光度计的主要部件和工作原理:吸收 池检测 显器 示#TU-1901单波长双光束分光光度计（一）光源紫外可见分光光度计理想的光源应具有整个 紫外可见光域的连续辐射，强度应高，且随波长 变化能量变化不大在可见光区，常用钩丝灯 （卤钩灯）为光源，波长范围为320〜2500nmo 在紫外光区，常用氢灯、宛灯为光源，波长范围 为200〜375nmoTU-1901紫外可见分光光度计光源：卤钩灯 与氟灯以下图片是该仪器的光源室及光源灯：#^iTU-1901光源室图片^iTU-1901光源灯图片•（二）单色器• 单色器是将光源发射的复合光分解为单色光的 光学装置。

• 单色器一般由五部分组成：入光狭缝，准光器, 色散器，投影器，岀光狭缝• 色散器是单色器的核心部分，常用的色散元件 是棱镜和光栅TU-1901采用全息光栅，进一步 降低仪器的杂散光，使仪器分析更加准确• 单色器的狭缝设计一定的宽度，经过狭缝的单 色光是一个具有一定光谱宽度的谱带，称为光谱 带宽从理论上讲，狭缝的宽度愈小，波长愈接 近单色光，但带宽太小，将使单色光的强度减小， 使光电流信号减弱，降低信噪比WO ■ OW 、由于分子吸收光谱的吸收峰比较宽和平 滑，一般情况下光谱带宽2〜6nm对分析结大TU-1901配置为固定狭缝，光 谱带宽为2nm三）吸收池j吸收池是盛放样品溶液的容器，它具有两个相 互平行、透光且具有精确厚度的平面□主要有石英吸收池和玻璃吸 收池两种□在紫外区须采用石英吸收池, 可见区一般用玻璃吸收池□主要规格0・ 5cm、1. Ocm> 2. Ocm>3. Ociii和5. Ocm注意事项：使用比色皿时，手执比色皿两侧的毛面，严禁拿比色 皿的透光面，盛放液体不能超过容积四分之三高度四）检测器\检测器是利用光电效应将透过吸收池的光信 号变更可测的电信号常用的检测器有光电池、光电管及光电倍增光电池光电管光电倍增管分光光度计的检验和维护（一）分光光度计的检验为保证测试结果的准确可靠，新制造、 使用中和修理后的分光光度计都应定期进 行检定。

单光束紫外■可见分光光度计的检 定周期为1年，在此期间内，仪器经修理或 对测量结果有怀疑时，应及时进行检定紫外可见分光光度计主要检验的几项技术指标• 1、稳定度• 2、波长准确度• 3、透射比准确度• 4、基线平直度• 5、噪声• 6、吸收池配套性现购买仪器因配置不定,检验技术指标参数有所不一，用户检验时用依据厂家提供的指标参数 进行检验吸收池的配套方法△光径的石英吸收池装蒸憾水在220nm、 700nm处测定；玻璃池收池装30mg/L的重辂酸钾 溶液在440nm处测定，装蒸憾水在700nm处测定实际工作中，可采用如下校准方法：在测定波 长下，将吸收池磨砂面用铅笔编号，于干净的吸 收池中装入测定用溶剂，以其中一个为参比，测 定其它吸收池的吸光度，若测定的吸光度为零或 两个吸收池的吸光度相等，即为配对吸收池若 不能配对，可选岀吸光度最小的吸收池为参比， 测定其它吸收池的吸光度，求出修正值•（二）TU-1901分光光度计测量条件的选择◎ 1、测量波长舗选择• 通常都是选择最强吸收带的最大吸收波 长入说x作为测量波长，称为最大吸收原则， 以获得最高的分析灵敏度• 2、适宜吸光度范围的选择• 任何光度计都有一定的测量误差，这是 由于测量过程中光源的不稳定、读数的不 准确或实验条件的偶然变动造成的。

一般来说，当透射比为15%〜65% （吸光度时，浓度的相对误差最小在实际工作中，可通过0.2〜0.8）时，浓度测量的相对误差较小，当力=0.434翦待縊翳騒饗曙釁勰蠶池的• 3、仪器狭缝宽度的选择• 狭缝的宽度会直接影响到测定的灵敏度和校准 曲线的线性范围狭缝宽度过大时，入射光的单色光降低，校准 曲线偏离比耳定律，灵敏度降低；狭缝宽度过窄 时，光强变弱，势必要提高仪器的增益，随之而 来的是仪器噪声增大，于测量不利'选择狭缝宽度的方法是：测量吸光度随 狭缝宽度的变化狭缝的宽度在一个范围 内，吸光度是不变的，当狭缝宽度大到某 一程度时，吸光度开始减小因此，在不 减小吸光度时的最大狭缝宽度，即是所欲 选取的合适的狭缝宽度三)分光光度计的保养和维护• 分光光度计是精密光学仪器，正确安装、使用 和保养对保持仪器良好的性能和保证测试的准确 度有重要作用• 1、对仪器工作环境的要求：• (1)仪器应安放在干燥的房间内，使用温度 为15°C〜35°C,相对湿度不超过80%0• (2)仪器应放置在坚固的平稳的工作台上， 且避免强烈的震动或持续的震动• (3)室内照明不宜太强，且应避免直射日光 的照射4) 电扇不宜直接向仪器吹风，以防 止光源灯因发光不稳定而影响仪器的正常 使用。

5) 尽量远离高强度的磁场、电场及 发生高频波的电器设备6) 供给仪器的电压AC220V±10%, 频率50HZ±1HZ单向交流电，最好配置交 流稳压器，功率不小于500VA,室内应有地 线并保证仪器良好接地7) 避免在有硫化氢等腐蚀性气体的 场所使用• 2、仪器保养和维护方法• * (1)光源 光源的寿命是有限的,为了延长 光源使用寿命，在不使用仪器时不要开光源灯， 应尽量减少开关次数在短时间的工作间隔内可 以不关灯刚关闭的光源灯不能立即重新开启• 仪器连续使用时间不应超过3h若需长时间 使用，最好间歇30mino• 如果光源灯亮度明显减弱或不稳定，应及时更 换新灯更换后要调节好灯丝位置，不要用手直 接接触窗口或灯泡，避免油污沾附若不小心接 触过，要用无水乙醇擦试TU-1901分光光度计对光源的使用要求1、分光光度计安装调试正常后，如无特殊情 况不能随意搬动仪器机体，避免带来的震动引起 光源灯及聚光镜等螺丝松动，导致光斑偏离2、正常情况下严禁分析人员打开光源室顶盖, 避免灰尘及其他物质进入影响聚光镜面3、仪器开机在自检过程中如提示钩灯或氛灯 检测错误，联机使用时工作站初始化可能提示磚 灯强度弱等现象，可关机后两分钟重新启动，若 仍是此现象报告相关技术人员等待处理或直接联 系厂家工程师到现场处理。

• 4、该仪器配备的氟灯属日本进口，使用寿命在5000小时左右，因现有检测项目使用光源均來自餌灯光源，为延长宛灯的使用期限，请在仪器开机 自检完成焉籬灭系绕应用将其关闭 ^***—**^5、如光源灯需要更换，请技术人员按照说明 书上光源的更换方法进行更换2） 单色器单色器是仪器的核心部分，装在 密封盒内，不能拆开选择波长应平衡地转动不 可用力过猛为防止色散元件受潮生霉，必须定 期更换单色器盒干燥剂（硅胶）若发现干燥剂 变色，应立即更换3） 吸收池必须正确使用吸收池，在使用后 应立即洗净应特别注意保护吸收池的两个光学面 生物样品、胶体或其它在池窗上形成薄膜的物质 要用适当的溶剂洗涤有色物质污染，可用 3mol/LHCI和等体积乙醇的混合液洗涤4）检测器 光电转换元件不能长时间曝光, 且应避免强光照射或受潮积尘5） 当仪器停止工作时，必须切断电源6） 为了避免仪器积灰和玷污，在停止工作 时，应盖上防尘罩，可在样品室及光源室内放置 硅胶袋防潮，但开机时一定要取出7） 仪器若暂时不用要定期通电，每次不少 于20~30min,以保持整机呈卞燥状态，菲冃维 持电子元器件的性能8） 每次使用后应检查样品室是否积存有溢 出溶液，经常擦试样品室，以防废液对部件或光 路索统的腐価。

9）定期进行性能指标检测，发现问题即与厂家或销售部门联系解决四）TIM 901紫外可见分光光度计的故障诊断与维修现彖 原因 判断 解决#接通电源仪器不动作A •电源线接触不良B.保险管熔断A.打印机故障A. 检代电源线B. 检件保险管A. 接好电源线B. 换保险管(2A)C.请与厂家联系不能打印谱图B•仪器CPU板故障B.査CPU板故障A-B.请9厂家联系C.仪器打印机连线松动：0M检査样品池原点A.内存程序故障A.样晶池架驱动原点界估狭缝崖位仃U-1901/TU-1810SPC) A.狭缝机构故障 滤色片定位 A •滤色片机构故障铸灯定位样品宅有扌当光物A.磚灯不亮A.样品室有挡光物尿灯定位笊灯不亮波长检査A •样品室有扌当光物B.氛灯定位错~A.光源老化B.样品室不正噪丙指标界常C •电丿k低/强磁场E. 前放板故障~F. AD转换器异常C.检査打印连线是否松动A.再次开机检査A.再次开机检件A.移动池架检查B.机械连接松脱A. 再次开机检金B. 打开光源室A. 打开样品室B. 打开光源室B.打开光源室A.能堆方式测虽B. 550n＞处观察C.检查电压/磁场源E. 査前放板故障—F. 铁驱动。