《通过细胞融合可产生具有新特性的细胞》示范公开课教学课件【高中生物浙科版（新课标）】.pptx

第三节通过细胞融合可产生具有新特性的细胞第三节通过细胞融合可产生具有新特性的细胞第三章 动物细胞工程新课引入新课引入动物细胞融合 细胞融合就是在一些融合因子的作用下，将两个或两个以上的细胞合并成一个细胞的技术通过细胞融合可以产生具有新特性的细胞1）两个动物细胞是如何融合成一个细胞的？（2） 细胞融合技术有什么应用？问题探讨一、一、两个或多个动物细胞经诱导可融合形成一个细胞两个或多个动物细胞经诱导可融合形成一个细胞动物细胞就像植物的原生质体一样，即使相互紧贴在一起也不会自动发生融合，需要提供一些特殊的诱导因素，如聚乙二醇处理、电流刺激或病毒诱导等在这些诱导因素的作用下，细胞膜会发生一定程度的损伤，细胞就可以实现相互粘连而融合在一起了动物细胞融合的原理图3-12细胞融合示意图一、一、两个或多个动物细胞经诱导可融合形成一个细胞两个或多个动物细胞经诱导可融合形成一个细胞发现细胞融合现象1838年在肿瘤中观察到多核细胞1875年首次观察到脊椎动物（蛙类）血液细胞的融合现象动物细胞融合研究历程50年代末，日本学者冈田善雄发现仙台病毒可以促进ETC进行细胞融合1967年人-鼠融合细胞实验，细胞融合用于染色体基因定位。

细胞融合技术被应用于免疫学领域，利用淋巴细胞和癌细胞的融合，培育单克隆抗体19世纪20世纪中叶1975年一、一、两个或多个动物细胞经诱导可融合形成一个细胞两个或多个动物细胞经诱导可融合形成一个细胞（1）1965年，研究证实了灭活的病毒在适当条件下确实可以诱导动物细胞融合2）随着对细胞融合技术研究的深入，陆续发现了化学物质聚乙二醇（PEG）、 电脉冲诱导、激光融合等技术也可以诱导动物细胞融合细胞诱导融合技术图3-13 病毒促进细胞融合示意图一、一、两个或多个动物细胞经诱导可融合形成一个细胞两个或多个动物细胞经诱导可融合形成一个细胞动物杂种细胞的特征，给人类进行染色体的基因定位研究创造了有利条件因为在杂种细胞内人的染色体是逐代丢失的，而且是随机丢失的，所以可以获得一系列含有人的各种不同染色体的杂种细胞系（包括含单个人类染色体的杂种细胞），这恰为后续的研究提供了很好的实验材料因为在杂种细胞内人和小鼠的基因可以同时表达，那么，这一系列的杂种细胞系，由于各自带有人的不同的染色体，其上的基因也就不同，因此基因的表达也必然不同，这样就可根据这些基因表达的不同而把某基因定位于某一特定的染色体上小资料：通过人鼠杂交细胞丢失人的染色体可进行基因定位举例说明通过人鼠杂交细胞丢失人的染色体基因定位的方法。

问题探讨一、一、两个或多个动物细胞经诱导可融合形成一个细胞两个或多个动物细胞经诱导可融合形成一个细胞提示：不能植物细胞具有全能性，能够发育成完整个体；动物细胞不具有全能性，很难直接将杂交细胞培育成完整个体思维提升植物体细胞在杂交技术中获得的杂种细胞经植物组织培养能获得一个完整个体，那么动物细胞融合技术能获得完整个体吗？二、二、细胞融合技术是制备单克隆抗体的基础细胞融合技术是制备单克隆抗体的基础单克隆抗体制备的研究背景（1）抗体的应用：利用抗原抗体反应，可以诊断和防治多种疾病，还可用于细胞中抗原物质的定位及其功能的研究等2）传统抗体制备方法的不足：传统获得抗体的方法是在给动物注射相应抗原后从其血清中进行分离提取但血清中获取的是多克隆抗体，也就是有很多种抗体混合在一起多克隆抗体能够识别很多种抗原，导致特异性差，很多时候不能真正满足临床应用和研究的需求二、二、细胞融合技术是制备单克隆抗体的基础细胞融合技术是制备单克隆抗体的基础单克隆抗体生物体内有上亿种B淋巴细胞，而每一种B淋巴细胞只产生一种特异的抗体由一个B淋巴细胞增殖形成的细胞群所产生的单一型抗体分子就称为单克隆抗体二、二、细胞融合技术是制备单克隆抗体的基础细胞融合技术是制备单克隆抗体的基础血清分离抗体与单克隆抗体的比较利用仙台病毒使经羊红细胞免疫的、从小鼠脾脏分离的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合。

寿命有限的B淋巴细胞与具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合，经筛选后就可以获得既能产生特异性抗体，又能在正常培养条件下进行无限增殖的杂交瘤细胞通过传代培养，就能长久地得到单克隆抗体了二、二、细胞融合技术是制备单克隆抗体的基础细胞融合技术是制备单克隆抗体的基础单克隆抗体的制备流程二、二、细胞融合技术是制备单克隆抗体的基础细胞融合技术是制备单克隆抗体的基础某公司提供的单克隆抗体开发服务（图片来自网络）思维提升据图分析：单克隆抗体有哪些优点？哪些方面能够用到单克隆抗体？二、二、细胞融合技术是制备单克隆抗体的基础细胞融合技术是制备单克隆抗体的基础单克隆抗体的优点纯度高，可大量制备，在应用时具有特异性强、灵敏度高的特点新冠肺炎试纸条原料抗体PD-1免疫抗癌药二、二、细胞融合技术是制备单克隆抗体的基础细胞融合技术是制备单克隆抗体的基础（1）利用单克隆抗体的优点，我们可以将其作为特异性的探针，研究相应抗原蛋白的结构、细胞学分布及功能2）单克隆抗体还可以成为解决生物学和医学等许多重大问题的有效手段：用单克隆抗体可以快捷、准确地诊断和治疗一些疾病3）将抗癌药物连接到专门识别某种肿瘤细胞的单克隆抗体上，单克隆抗体就会像“生物导弹”一样携带抗癌药物准确地聚集到肿瘤细胞，专一地杀死肿瘤细胞，这样就避免了抗癌药物在消灭肿瘤细胞的同时对人体正常细胞的损伤。

单克隆抗体的应用二、二、克隆动物与供核体具有相同遗传物质克隆动物与供核体具有相同遗传物质请利用图书馆和互联网收集有关单克隆抗体在临床上实际应用的资料阅读、筛选资料，整理出核心要点，完成读书报告，并与同学交流活动：收集单克隆抗体在临床上实际应用的资料，并进行交流分享活动要求单克隆抗体作为诊断试剂有哪些应用？单克隆抗体用于治疗疾病有哪些应用？单克隆抗体作为运载药物有哪些应用？问题讨论课堂小结课堂小结动物细胞融合两个或多个动物细胞经诱导可融合形成一个细胞动物细胞融合的原理细胞诱导融合技术细胞融合技术是制备单克隆抗体的基础单克隆抗体单克隆抗体的制备流程单克隆抗体的优点和应用课堂检测课堂检测1下列有关动物细胞融合的叙述，正确的是（ ）A动物细胞融合的结果是获得新个体B只有两个动物细胞结合成一个细胞的过程才叫动物细胞融合C灭活的病毒是动物细胞融合和植物体细胞杂交常用的促融剂D细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能D课堂检测课堂检测2下列关于单克隆抗体的制备和应用的叙述，正确的是（ ）AB淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，一般需要仙台病毒或聚乙二 醇诱导B动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体能体现细胞的全能性C单克隆抗体制备过程中的两次筛选目的相同D单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强，灵敏度高，可以利用 分子克隆技术大量制备A课外拓展课外拓展课外读：利用HAT选择培养基筛选杂交瘤细胞 细胞融合的选择培养基中有3种关键成分：次黄嘌呤（hypoxanthine，H）、氨基蝶呤（aminopterin，A）和胸腺嘧啶核苷（thymidine，T），所以称为HAT培养基。

氨基蝶吟是叶酸的拮抗剂，可阻断瘤细胞利用正常途径合成DNA，所以融合所用的瘤细胞及瘤细胞与瘤细胞融合的细胞不能在该培养基中生长只有B淋巴细胞和瘤细胞融合的细胞具有亲代双方的遗传性能，才可在HAT培养基中长期存活与繁殖敬请各位老师提出宝贵意见！。