巨噬细胞吞噬实验报告巨噬细胞吞噬实验报告精选八篇.docx
20页巨噬细胞吞噬实验报告巨噬细胞吞噬实验报告精选八篇 篇一 :巨噬细胞吞噬实验&沉淀实验实验报告实验二一 巨噬细胞吞噬功能实验【原理】巨噬细胞是单核吞噬细胞系统的主要细胞,局域活跃的吞噬功能吞噬细胞受抗原刺激后活化,可使吞噬功能明显增强在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后,再给小鼠腹腔注射鸡血红细胞,30min后处死小鼠,取出腹腔液,以冷亚甲蓝染色,显微镜下计数吞噬红细胞的百分数,及观察吞噬细胞内鸡红细胞的数目,以判断吞噬细胞的杀伤能力,由此间接地测定机体的非特异性免疫水平方法】体内法:(1)实验前3小时,小鼠腹腔注射6%无菌淀粉液1ml,诱导巨噬细胞渗出至腹腔中2)实验时,每只小鼠注射鸡红细胞1ml,轻柔腹部,使其在腹腔中分布均匀,利于吞噬3)30min后,将小鼠拉颈处死,固定,打开腹腔暴露肠管,用载玻片轻擦腹腔,使腹腔液均匀涂于载玻片过,再滴一滴0.03%冷亚甲蓝溶液,盖上盖玻片4)高倍镜下进行观察,计数结果】【分析】在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后,再给小鼠注射鸡红细胞后镜检腹腔液,可观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象,并且可看到部分鸡红细胞聚集到吞噬细胞附近二 沉淀反应 双向琼脂扩散实验【原理】将可溶性抗原与相应抗体分别加入琼脂板上的孔内,二者均可发生扩散,并且随扩散距离的增大浓度降低,在抗原抗体比例适宜处形成可见的沉淀线。
本实验是定性实验,常用于分析抗原抗体的纯度关系以及相互关系方法】(1)制板:将熔化的1%琼脂加在载玻片上约5ml(2)打孔:待琼脂凝固后,将载玻片置于打孔样板上,用打孔器打孔(3)加样:在中央孔内加抗体,上下两孔加抗原1,左右加抗原二,每孔加10μl(4)结果观察:将琼脂板置于湿盒,37℃一天后观察结果结果】在中央孔与添加抗原1的孔之间出现沉淀线,有抗原抗体反应,为阳性反应,说明抗原1与抗体相对应中央孔与添加抗原2的孔之间没有沉淀线,说明抗原2与抗体之间不相对应…… …… 篇二 :实验八巨噬细胞吞噬现象的观察学号 姓名 班级 细胞生物学实验报告实验八 巨噬细胞吞噬现象的观察一、实验原理巨噬细胞由骨髓干细胞分化生成,然后进入血液到达各组织内,并进一步分化为各种巨噬细胞,当病原微生物或其它异物侵入机体时,能招引巨噬细胞,而巨噬细胞又有趋化性,能响应招引因子的招引,产生活跃的变形运动,主动向病原体和异物移行,在接触到病原体和异物时,即伸出伪足,将之包围并内吞入胞质,形成吞噬体,继而细胞质中的初级溶酶体与吞噬泡发生融合,形成吞噬性溶酶体,通过其中水解酶等作用下,将病原体杀死,消化分解,最后将不能消化的残渣排了出细胞外。
台盼蓝染色:如果细胞膜不完整、破裂,台盼蓝染料进入细胞,细胞变蓝,即为坏死如果细胞膜完整,细胞不为台盼蓝染色,则为正常细胞或凋亡细胞此方法对反映细胞膜的完整性,区别坏死细胞有一定的帮助二、实验步骤1.在小鼠腹腔注射6%淀粉肉汤(含台盼蓝)1ml2.24h后注射1%鸡红细胞悬液1ml,轻按腹部使分散3.20分钟后脱颈骨处死小鼠4.开腹取腹腔液(慎防小鼠血污染)5.腹腔液滴于载玻片上,盖上盖玻片6.显微镜观察吞噬现象三、实验结果学号 姓名 班级 细胞生物学实验报告四.结果讨论篇三 :实验二小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬实验(2)实验二 小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬实验一 实验目的1.掌握小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的原理2.熟悉细胞吞噬作用的基本过程二 基本原理细胞的吞噬作用在单细胞动物是摄取营养物质的方式,在高等动物内的巨噬细胞、单核细胞和中性粒细胞等具有吞噬功能,是机体非特异性免疫功能的重要组成部分巨噬细胞是由骨髓干细胞分化生成,当病原微生物或其他异物侵入机体时,巨噬细胞由于具有趋化性,便向异物处聚集,巨噬细胞可将之内吞入胞质,形成吞噬泡,然后在胞内与溶酶体融合,将异物消化分解吞噬泡的形成需要有微丝及其结合蛋白的帮助,如果用降解微丝的药物细胞松弛素B处理细胞,则可阻断吞噬泡的形成;免疫抑制剂环磷酰胺(CYP)对巨噬细胞的吞噬作用也有影响。
三 实验用品1.器材:显微镜、解剖盘、剪刀、镊子、1ml注射器、载玻片、盖玻片、吸管等2.试剂:0.9%生理盐水;可溶性淀粉6.0g加水100ml煮沸备用6%淀粉中含0.3%台盼蓝)3.材料:小白鼠;0.5%鸡红细胞悬液四 实验步骤1. 鸡翼下静脉取血后,加生理盐水离心两次,然后根据获得的红细胞的体积加入适量的生理盐水,调至鸡红细胞浓度为0.5%2. 实验前一天,向小鼠腹腔注射1ml可溶性淀粉3. 实验前30分钟,向腹腔内注射1ml 0.5%的鸡红细胞,并轻揉腹部,使鸡红细胞悬液分散4. 30min后,用脊椎脱臼法处死小鼠(右手抓住鼠尾,用力向后拉,左手拇指与食指同时按住鼠头,使脊髓与脑髓间断并致死)5. 迅速剖开腹腔,用装针头的注射器吸取腹腔液6. 在干净的载玻片上滴加一滴腹腔液,盖上盖玻片,显微镜下检查7. 观察时,将视野调暗在高倍镜下,先分辨清楚鸡红细胞和巨噬细胞鸡红细胞为淡红色、椭圆形、有核的细胞而体积较大圆形或不规则的细胞,其表面有许多似毛刺状的小突起(伪足),细胞质中有数量不等的蓝色颗粒(为吞入的含台盘蓝淀粉形成的吞噬泡)即为巨噬细胞变换视野,仔细观察巨噬细胞吞噬吞噬鸡红细胞的过程。
可见有的鸡红细胞(一至多个)紧贴附于巨噬细胞的表面;有的巨噬细胞已将1至数个红细胞部分吞入;有的巨噬细胞已吞入1个或几个红细胞在胞质中刚刚形成椭圆形的吞噬泡;有的局势细胞内的吞噬体积缩小,并呈现圆形,这是与初级溶酶体发生融合,泡内物正…… …… 篇四 :巨噬细胞吞噬细胞功能实验实验一 巨噬细胞吞噬细胞功能实验原理:巨噬细胞具有活跃的吞噬功能,能清除体内抗原物质及变性的细胞,在特异性及非特异性免疫中均起重要作用巨噬细胞受抗原刺激后活化,可使其吞噬功能明显增强此次实验我们用体内法来介绍巨噬细胞的吞噬功能体内法:在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后,再给小鼠腹腔注射鸡红细胞,30min后处死小鼠,取出腹腔液,以冷美兰染色,显微镜下计数吞噬鸡红细胞的百分数,及观察巨噬细胞内被杀死而染为紫色的鸡红细胞的形态、数目,以判断巨噬细胞的杀伤能力,由此间接地测定机体的非特异性免疫水平方法:(1)试验前3天,小白鼠腹腔注射6%无菌淀粉液1ml,诱导巨噬细胞渗出至腹腔中2)实验时,每只小鼠腹腔注射鸡红细胞1ml,轻柔腹部,使鸡红细胞在腹腔中分布均匀,利于吞噬3)30min后,将小鼠拉颈处死,固定,打开腹腔暴露肠管,用滴管取出腹腔液,均匀涂布于载玻片上,然后再滴一小滴0.06%冷美兰溶液,盖上盖玻片(4)高倍镜下进行观察,计数。
实验结果: 100个巨噬细胞中已吞噬了鸡红细胞的巨噬细胞的数目吞噬百分率 = ——————————————————— ×100%100个巨噬细胞100个已吞噬鸡红细胞的巨噬细胞中鸡红细胞的数目吞噬指数 = ———————————————————×100%100个已经吞噬了鸡红细胞的巨噬细胞结果分析:正常值吞噬百分率:62.77±1.38吞噬指数:1.058±0.049我们的实验结果偏低,原因可能是腹腔注射时没有完全注射到腹腔内,部分残留在腹腔壁上实验二 沉淀反应(双向琼脂扩散实验)原理:双向琼脂扩散试验是定性实验将可溶性抗原与相应抗体与相应抗体分别加入琼脂板上的孔内,两者均可扩散,在抗原抗体比例适宜处形成可见的沉淀线如果不是相应的抗原与抗体,就不出现沉淀线本试验常用于分析抗原抗体的纯度及相互关系…… …… 篇五 :实验6小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象观察细胞生物学实验 实验6 2015/4/21实验6小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象观察姓名:李思露学号:131140040一、 实验目的1. 通过对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞活动的观察,加深理解细胞吞噬作用的过程;2. 了解巨噬细胞吞噬能力检测的形态学方法二、 实验原理吞噬作用也称为胞吞作用(cellular eating),指细胞通过质膜内陷形成内吞泡的方式吞入不能渗透过膜的较大固体物质(直径一般大于250mm)的过程。
许多原生动物通过吞噬作用摄取营养;高等动物体内的巨噬细胞和嗜中性粒细胞的吞噬作用成为动物体非特异性免疫的重要组成部分不同动物来源的巨噬细胞或同一动物来源的不同巨噬细胞吞噬功能强弱不同,个体吞噬细胞的平均吞噬能力是机体非特异性免疫功能强弱的重要反映吞噬细胞细胞膜上有识别某些病原体相关分子及凋亡细胞磷脂酰丝氨酸等配体的受体,可以使巨噬细胞识别结合病原体、凋亡细胞及其它异物,引起受体胞内区活化,进而导致与其相连的细胞骨架重排引发吞噬作用内吞内吞体吞噬溶酶体胞吐巨噬细胞吞噬自身衰老凋亡细胞而不吞噬正常细胞,原因是,凋亡细胞细胞膜内侧面的磷脂酰丝氨酸反转到胞膜外侧面而被巨噬细胞模式识别受体识别吞噬功能一般用吞噬百分率和吞噬指数两个指标反映吞噬百分率=吞噬有鸡红细胞的巨噬细胞数/巨噬细胞总数×100%吞噬指数=吞噬的鸡红细胞总数/吞噬有鸡红细胞的巨噬细胞数细胞生物学实验 实验6 2015/4/21三、 实验材料、试剂及器材(一)材料:1. 健康小白鼠:6-8周龄健康小白鼠,实验前1~2天,每只腹腔注射4%淀粉肉汤1mL2. 抗凝鸡血(二)试剂:1. 4%淀粉肉汤2. D-Hanks液3. 0.85%生理盐水4. 180IU/mL肝素钠生理盐水溶液(三)用品…… …… 篇六 :巨噬细胞去除实验 (含尾静脉注射)巨噬细胞去除实验去除巨噬细胞是研究巨噬细胞功能的重要方法。
巨噬细胞可吞噬clodronate Liposome,在溶酶体的作用下,clodronate可释放出来,当其达到一定浓度时,可引起巨噬细胞的凋亡,从而去除巨噬细胞clodronate Liposome可局部注射去除注射部位临近的巨噬细胞,如肺、膝关节、肿瘤局部和脑等;也可尾静脉或腹腔注射去除循环途径中的单核巨噬细胞,如肝脏和脾脏中的巨噬细胞1. 脂质体的准备荷兰 Amsterdam的Vrije University 的Nico van Rooijen教授可免费提供10ml的clodronate Liposome进行预实验,可通过以下网站注册后索要,一般订后2-3周会寄到,4度避光保存,一个月内进行实验如预实验结果好,可向他购买或合作2. 脂质体的体内注射隔日尾静脉注射200ul clodronate liposome,根据实验要求制定注射日程通过免疫组化或流式检测巨噬细胞的去除效率尾静脉注射方法:1. 将小鼠放在倒扣的饭盒内,从孔口拉出尾巴,小鼠的尾部有2条动脉和3条静脉,2条动脉分别在尾部的背侧面和腹侧面,3条静脉呈品字型分布,一般采用左右两侧的静脉;2. 将纱布浸泡于约70度的温水中,拿出后包裹尾巴,以达到使尾部血管扩张及软化表皮角质的目的;3. 行尾部静脉注射时,以左手拇指和食指前后摁住鼠尾,留出约2cm一段,使皮肤紧张,静脉更为充盈,右手持1ml针头注射器,使针头与静脉平行(小于30°角),从尾巴的下1/4处进针,开始注入药物时应缓慢,仔细观察,如果无阻力,无白色皮丘出现,说明已刺入血管,可正式注入药物。
4. 有的实验需连日反复尾静脉注射给药,注射部位应尽可能从尾端开始,按次序向尾根部移动,更换血管位置注射给药拔出针头后,用棉球按住注射部位轻压1-2min,止血。





