MTT法又称MTT比色法是一种检测细胞存活和生长的方法其检测原理.docx

MTT法又称MTT比色法，是一种检测细胞存活和生长的方法，其检测原理MTT法又称MTT比色法，是一种检测细胞存活和生长的方法，其检测原理为活细胞线粒体 中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒并沉积在细胞中，而死 细胞无此功能二甲基亚砜能溶解细胞中的甲瓒，用酶联免疫检测仪在490 nm波长处测定 其光吸收值，可间接反映活细胞数量在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成 正比该方法已被广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞 毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等，它的特点是灵敏度高、经济学术术语来源---Bio-gide胶原膜体外复合培养犬骨髓间充质干细胞的软骨分化文章亮点：1实验先采用全骨髓血培养法培养犬骨髓间充质干细胞，继而采用贴壁筛选纯化，方法简便， 所获细胞数量及纯度满意，并在体外成功诱导分化出软骨细胞2实验所采用的细胞支架材料为瑞士 Geistlich公司生产Bio-gide胶原膜，这是一种由I型和 III型胶原组成复合材料，分为致密层和疏松层，种子细胞接种在胶原膜的较为粗糙的疏松层, 而光滑的致密层在体内实验中朝向关节腔，有利于骨髓间充质干细胞的黏附、生长及向软骨 细胞的分化，三维立体培养有助于诱导生成的软骨细胞维持表型。

3实验显示Bio-gide胶原膜与骨髓间充质干细胞复合培养有良好的生物相容性，但能否体内 构建组织工程软骨组织，促进软骨细胞的生长，缺损的软骨组织得到完整的修复，尚待进一 步研究关键词：生物材料；组织工程软骨材料；膜生物材料；骨髓间充质干细胞；Bio-gide胶原膜；组织工 程；股骨头坏死；软骨缺损；种子细胞；国家科学自然基金摘要背景：应用组织工程方法修复股骨头坏死后的软骨损伤应解决的2个关键因素是种子细胞和 支架材料目的：探讨Bio-gide胶原膜体外与犬骨髓间充质干细胞复合成软骨的可行性方法：采用全骨髓血离心法结合贴壁筛选法体外分离培养比格犬骨髓间充质干细胞，观察细 胞形态学变化，以细胞表面抗原进行鉴定采用成软骨诱导培养基诱导第3代骨髓间充质干 细胞向软骨细胞分化作为实验组，设置普通培养基培养对照组，MTT比色法测试软骨细胞生 长曲线，并行II型胶原免疫组织化学和甲苯胺蓝染色等生物学鉴定将第3代骨髓间充质干 细胞与Bio-gide胶原膜体外复合培养行倒置相差显微镜、扫描电镜观察结果与结论：采用全骨髓血离心法结合贴壁筛选法获得了高纯度高活性的骨髓间充质干细胞， 生长状态良好，扩增能力强，并成功诱导分化为软骨细胞。

大量骨髓间充质干细胞在Bio-gide 胶原膜上贴附增殖并复层生长，细胞与Bio-gide胶原膜逐渐融为一体；在胶原膜的断面可见 胞体伸出突起相互连接包绕胶原膜，其间有明显细胞基质分泌表明犬骨髓间充质干细胞可 在Bio-gide胶原膜上生长并向软骨细胞分化中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料；口腔生物材料; 纳米材料；缓释材料；材料相容性；组织工程。