槐定碱有关物质的薄层色谱法研究【药学论文】.doc

药学论文-槐定碱有关物质的薄层色谱法研究作者：张爱华， 陈新菊， 吴联奎【摘要】 　　目的建立薄层色谱法检查槐定碱中有关物质的方法方法采用碱性硅胶 G 薄层板，苯-丙酮-甲醇（8∶3∶0.5）（氨蒸气饱和）为展开剂，依次喷稀碘化铋钾试液和 30%的硫酸乙醇溶液显色结果主成分与其它生物碱、降解产物的斑点能得到较好的分离结论该法可用于槐定碱提取工艺、原料和制剂的质量监控 【关键词】 槐定碱 有关物质 薄层色谱法Abstract：ObjectiveTo establish the method of Thin-Layer Chromatography for sophoridine and its impurities. MethodsLamella of basic silica gel G was adopted. The spread solvent was made of Benzene-Acetone-Methanol (8∶3∶0.5) (They are saturated by ammonia steam). Color display was made by spraying sparse Potassium Bismuth Iodide and followed by spraying 30% sulfuric acid ethanol. ResultsSophordine and its impurities (such as unrelated alkaloid, degradation product) could be separated .Conclusion The method can be used for the quality control of material , preparation and sophoridine extraction process.Key words：Sophoridine； Impurity； Thin-Layer Chromatography槐定碱（sophoridine）是一种具有新型结构的抗肿瘤新药，是从豆科槐属植物苦豆子 Sophora alopecuroides L.的成熟种子中提取的生物碱。

在对新药槐定碱定性定量分析的系统性研究中，曾采用薄层色谱法检查槐定碱中的有关物质，取得了满意的结果有报道［1］从苦豆子中分得生物碱成分有 20 种之多，其中主要生物碱是槐定碱、槐果碱、苦参碱等，它们大都含有相似的基本骨架，属于喹喏里西啶（Quiolizidine）类生物碱，也常被称为苦参碱类生物碱，对这类生物碱的薄层色谱分析，国内曾有一些文献报道［2，3］，笔者在有关参考文献的基础上，除比较了不同的吸附剂、展开剂外，主要在显色剂的J应用上有一点改进，即增加了通用显色剂 30%硫酸乙醇溶液的使用，使槐定碱的薄层色谱中其它杂质均能显现，提高了方法的灵敏度本法不仅可作为槐定碱提取工艺、原料和制剂的质量监控手段，也可为其它生物碱的薄层色谱分析提供参考1 药品与试剂硅胶 G（青岛海洋化工厂）；其余试剂为分析纯苦参碱对照品(0805-9703)、氧化苦参碱对照品(0780-9703)由中国药品生物制品检定所提供；槐定碱、槐果碱纯品由江西中医学院吴运光教授提供槐定碱原料由江西中医学院提供2 方法与结果2.1 供试品溶液的制备分别取槐定碱、苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱纯品各适量，用三氯甲烷制成 2 mg·ml-1 的溶液；量取上述各溶液 1 ml，混匀即得混合溶液；另取槐定碱适量，置 105℃加热破坏 3 h，用三氯甲烷制成 2 mg·ml-1 的溶液。

2.2 薄层色谱条件碱性硅胶 G（取硅胶 G 2 g，加 0.4%的氢氧化钠 6 ml制成）薄层板，厚度 0.2～0.3 mm；展开剂：苯-丙酮-甲醇（8∶3∶0.5）（氨蒸气饱和）上行展开 15 cm；显色剂：依次喷稀碘化铋钾试液和 30%的硫酸乙醇溶液2.3 薄层分离实验取上述供试品溶液各 10 μl，按上述薄层色谱条件试验，结果显示，主成分与其它生物碱、降解产物的斑点能得到较好的分离见图 12.4 最低检测量实验在上述薄层色谱条件下测得槐定碱、苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱的最小检出量分别为 0.2，0.5，0.2，0.5μg2.5 有关物质的限量检查方法取本品，加三氯甲烷制成每毫升中含 10 mg的溶液，作为供试品溶液，精密量取适量，加三氯甲烷制成每毫升中含 0.2 mgJ的溶液，作为对照溶液吸取上述两种溶液各 10μl，分别点于同一碱性硅胶G 薄层板上，用苯-丙酮-甲醇（8∶3∶0.5）为展开剂，置氨蒸气饱和的环境中展开，展开后，晾干，依次喷稀碘化铋钾试液和 30%的硫酸乙醇溶液，使显色，供试品溶液如显杂质斑点，不得多于两个，其颜色与对照溶液的主斑点比较，不得更深2.6 样品有关物质检查结果检查了 10 批槐定碱原料，结果均检出一个杂质斑点，颜色均浅于对照溶液的主斑点（即＜2%）。

3 讨论3.1 对薄层色谱条件的选择比较了不同的薄层板：硅胶 G、碱性硅胶 G、中性氧化铝、碱性氧化铝板；不同的展开剂：苯-丙酮-甲醇（8∶3∶0.5）（氨蒸气饱和）、苯-丙酮-醋酸乙酯-甲醇（氨蒸气饱和）、三氯甲烷-甲醇（氨蒸气饱和）、三氯甲烷-甲醇-氨水、石油醚-苯-丙酮-甲醇、三氯甲烷-无水乙醇（氨蒸气饱和）等，结果分离效果以碱性硅胶 G 板、苯-丙酮-甲醇（8∶3∶0.5）（氨蒸气饱和）为最佳3.2 对显色剂进行了比较在最佳薄层色谱条件下，分别喷碘化铋钾试液、稀碘化铋钾试液和改良碘化铋钾试液，结果碘化铋钾试液喷后整块板颜色深，微量杂质不易观察；改良碘化铋钾试液显色后，常褪色太快，不够稳定；稀碘化铋钾试液显色效果较好，背景颜色浅，斑点清晰但是无任用上述哪种显色剂，显色后的斑点均易消褪，尤其是微量杂质斑点不易显现或显色后瞬间消失，不利于观察比较，虽加大点样量，仍不能避免这种情况，致使杂质斑点不易检出经反复实验，采用了在稀碘化铋钾试液显色后继续喷以 30%的硫酸乙醇溶液，结果斑点显色灵敏度增加，微量的杂质斑点也能清晰可辨，而且稳定时间较长本法与高效液相色谱法［4］比较，后法虽然灵敏度更高，但本法设备简单，价廉，用自身对照法可以满足本品有关物质检查要求。

参考文献】［1］王秀坤，李家实，魏璐雪，等. 槐属植物化学成分研究概况［J］.J国外医学·中医中药分册，1996，18（4）：7.［2］陈发奎.常用中草药有效成分含量测定［M］.北京：人民卫生出版社，1997：396.［3］张中苏，张林英，王润生，等.苦参薄层色谱法的改进［J］.中国中药杂志，1995，20（3）：171.［4］张爱华，张悦晗，陈新菊，等.反相高效液相色谱法测定槐定碱原料及注射液的含量［J］.中国新药杂志，2007，16（1）：68.J。