微生物发酵烟用调味剂的研制.doc

微生物发酵烟用调味剂的研制目录@ > I摘要 HAbstract Ill1弓丨W 11.1烟用香料的历史 11.2烟川香料的作用 11.3烟用香料的要求和作用机理 11烟用香料的要求 11.3. 2烟用香料的作用机理 21.4国卜」外烟用香料物质生物技术生产概况 21.4. 1烟用香料的来源 21.4.2烟用香料生物技术生产的主要技术种类概述 21.4.3烟用香料生物技术生产的主要技术详述 31.5生物技术生产烟用香料的意义和发展前景 42微生物发酵烟用调味剂的研制 5m 52.1.1所需菌种 52. 1.2J^W 52. 52. 1.4培养基 52. 1.5主要仪器 62. 2步骤与方法 62.2. 1菌种活化 62. 2. 2菌种保存 62.2.4前期发酵 62.2.5后期发酵 62.2.7酒精加入时间与产物愉悦度相关性的条件设置 72.2.8发酵时长、发酵温度与发酵物愉悦度的相关性的条件设置 72.2.8发酵产物的紫外最大吸收峰测定 82.2.9发酵产物在560nm的吸光值 112. 10产物嗅闻评价 132.2.11发酵产物在烟草上的作用 13结果分析讨论和总结 143.1结果分析讨论 143.1.1紫外吸收的程度与发酵物愉悦度的相关性 143.1.2酒精加入时间与发酵物愉悦度的相关性 .143.1.3发酵时间长短与发酵物愉悦度的相关性 143.1.4发酵时温度与发酵物愉悦度的相关性 143. 1.5苯甲酸钠对发酵物的影响 153.2 15参考文献： 16致谢 错误!未定义书签。

微生物发酵烟用调味剂的研制摘要香气质量是烟叶品质的重要方而烟叶本身的气味比较刺激，因此须在烟草加工过 程中加入调味剂烟用调味剂一般都是用化学方法制备，但用此法制备的调味剂在降低 烟叶刺激性方面不如生物方法制备的调味剂因此采用生物方法制备调味剂是今后的一 个发展方向本文从微生物方面着手研宄研制烟用调味剂先将根霉（^hizopussp.｝ HQG8接种 在麸皮培养基上，28C恒温培养72h，再加入2倍体积的蒸馏水浸提lh，制得酶液将 酵母菌｛Saccharomyces sp. ）ZZ1、枯草芽孢杆菌｛Bacillus subtilis）U分别接种在烟 汁培养基上，在28C、190rpm条件下培养24h制得发酵物然后将酶液、发酵物与烟 汁按比例混合发酵，第三天加入酒精，25C发酵30天后，再置于室温发酵30天，即 获得一种具有清凉愉悦的香味发酵产物将其涂布在烟叶上，烘干后评吸，发现该产物 有降低烟叶刺激性的作用关键词：根霉发酵微生物烟叶调味剂AbstractAroma quality is an important aspect of quality tobacco. Comparison of the smell of tobacco itself, stimulating，it is necessary to process tobacco add flavor. Tobacco flavoring agent is generally prepared by chemical methods，but the preparation method of flavoring agent in the reduction of leaf area than the biological method of stimulating the preparation of the flavoring agent. Therefore the use of biological methods of preparation of flavoring agent is a future direction of development.In this paper，the development of micro-organisms to study aspects of tobacco flavor. First Rhizopus (Rhizopus sp.) HQG8 inoculation in wheat bran medium, 28 C constant temperature culture 72h，then add 2 times the volume of distilled water extraction lh， prepared enzyme solution. The yeast (Saccharomyces sp.) ZZ1，Bacillus subtilis (Bacillus subtilis) VIJ tobacco juice were inoculated in the medium, in 28 C，190ipm system under the conditions of a 24h culture fermenters. And then enzyme，fermentation and smoking material according to the proportion of juice mixed fermentation, the third day by adding alcohol， aging conditions of 25 C in 30 days，and then aging for 30 days at room temperature，which was a pleasant smell cool fermentation product. Its coating on the leaves, after drying smoking, found that the product can reduce the role of tobacco irritating.Key word: Rhizopus ferment microorganism tobacco f 1 avor1引言1.1烟用香料的历史在烟草中施加香料最早可以追溯到1519年哥伦布发现美洲新人陆以后，人们在对 墨西哥的科尔特斯探险期间，在塔巴斯科的地方B睹印第安人往烟草中施加柑桔皮汕以 增强烟香味。

使用历史悠久的烟用香料物质有朗姆酒、甘草水或抽提物、玫瑰水或玫瑰 油、香草浸ft、肉桂油、肉豆范、卄油、枫械糖浆、橙皮油、法国白兰地、香营提取物、 茵香油、缴草抽提物、安息香配、秘鲁香可、妥卢香配、桂皮油等而在近几十年来， 化学家在对朗姆酒、甘一草、咖啡等物质天然致香化学成份进行深入分析研究的基础上， 弄清了许多种化学成份对构成特殊香味的贡献，在此基础上，大量的人工合成香料被用 作烟草香料，使加香加料更具有针对性从16世纪到现在烟用香料的发展约5百年, 可见烟用香料的历史的悠久1.2烟用香料的作用在卷烟中添加香精香料，其作用在于改善卷烟的理化特性、圆润香气、修饰烟香味、 改善吸味、确立产品的风格，在某种程度上影响着消费者的嗅觉、味觉和触觉，增强或 者是改善烟草产品的香味或口味，从而使产品对消费者更具吸引力［11］烟草的涩度、苦 味、酸味和门感等也同样需要香料来进行改善和掩盖对于烟草产品而言，烟草需要加 入添香成分，从而对烟草的天然香味进行强化和调和但是，无论如何，香料的添加是 不可能使劣质烟草的香味成为或代替优质烟草的醇香1"根据烟用香料的作用，烟用香料可分为用于烟香，用于烟味，提高香味，改善香味，增进风味，香味增效剂，矫味等等几类[17]1.3烟用香料的要求和作用机理1.3.1烟用香料的要求烟草中不论通过哪种途径使用的香精、香料都应符合下列要求：①有一定的香型和 香味特征，在抽烟过程中能传递优美的香气和吸味；②对烟草有相应的适应性和稳定性， 并与基质或配料相谐调；③应符合现奋的加工工艺，并要避免成本的较大增加，除非确 实需要而投资乂比较合理；④对改进产品质量和降低成木应有某些明显的贡献；⑤应比 较容易得到而且质量符合耍求；⑥加工及使用都应安全可靠，不损害人体健康并且不违 反国内和国际的有关法规［"］。

1.3. 2烟用香料的作用机理烟用香料可以通过以下多种途径起作用①卷烟在燃吸过程中，经燃烧和高温合成 后最初的形态被破坏或改变，以致于产生对吃味和香气方面的传递影响例如可以添加 糖或浓缩果汁来减少烟气的刺激性②在燃烧和高温合成之前最初的形态受破坏或改 变，形成一种中间形态例如在烘烤前把糖、氨基酸和浓缩糖汁施加到白肋烟烟叶上 ③燃吸期间由于高温引起的部分变态、蒸馏和洗提例如使用香兰素、玫瑰香精等④ 基本形态不改变，由主流烟雾携带传递如滤嘴棒内的薄荷香线［"］1.4国内外烟用香料物质生物技术生产概况1.4. 1烟用香料的来源目前烟用香料来源主要分为3个种类，來自天然香料、人工合成的香料和生物技术 生产天然香料又分为烟草香料和非烟草香料烟草香料可在不同的温度下用多种溶剂 抽提，如用发酵烟籽提取的物质可以降低卷烟的刺激性，明显改善吸味U2］;非烟草天然 香料是指从除烟草以外的各种植物或动物中的提取物，也就是从各种植物的花、果实、 叶、茎、根或皮中利用物质的物理性质来提取出来的精油或水、乙醇浸提物如浸膏，可 剂等，如利用红茶、款冬花制备烟用香料ww人工合成的香料是化工产品，目前香料 的主要方法就是人工合成，利用各种物质的化学性质进行反应制备，如Phi 11 ip Morris 公司用含量为74%的果糖同天门冬酰胺、异戊醛、氢氧化铵一起加热，稀释后用于重组 烟丝，烟味足而无粗糙感［161和利用脯氨酸、高级脂肪酸、葡萄糖和蜂蜜等物质的反应组合发生美拉德反应产生的产物加入到烟丝中能使卷烟的烟香味更加透发，杂气和刺激性 减轻生物技术生产烟用香料将在下面详细介绍。

1.4.2烟用香料生物技术生产的主要技术种类概述生物技术是近年来国际研究的热点技术，已引起了国际上许多相关行业的高度重 视，同时相继为各行业所采纳和利用，当然也包括烟用香精香料行业香精香料是高价 值的精细化工产品，但原料来源有限利用现代生物技术工厂化生产这类高价值产品， 是最有前途的生产方法一般认为，生物技术方法是模拟天然动植物香料的形成过程， 采用生物技术生产的香精香料差不多甚至优于化学合成的香精香料，因此，通过生物技 术开发和生产高价值的香料物质，为烟用香料的生产开辟了一个全新的方向利用生物 技术生产香精香料的手段主耍有：a.酶催化合成法利用生物提取酶作为催化剂，利用 生物转化合成高价值的烟用香精香料物质：b.微生物发酵技术通过筛选能够大量产生和积累烟用香精香料物质的微生物或荠筛选出能够得到混合发酵出烟用香精香料产物 的微生物，从而通过微生物发酵生产获得较高价值的香料物质；c.利用植物细胞人量培 养能够生成和高产香料的植物细胞株，从而获得高价值的香料物质［2］生物工程技术通 常分成发酵工程、细胞工程、酶工程、基因工程和蛋白质工程等发酵工程是指利用微 生物工业原料或工业产品的过程根据各种微生物的特性，在有氧或无氧条件下利用生 物催化（酶）的作用，将多种低值原料转化成不同产品的过程，或者把一种低值香原料 转化成另一种高价值的产品。

发酵工程包括上游工程和P游工程两部分原始材料包括 菌种、培养基的糖类、氮源及某些微量元素上游过程是对菌种加以改造，提高生产能 力或者导入外源基因等以获得工程菌，发酵或生物转化是通过优化发酵条件（如温度、 营养、供气量等），利用工程菌的生物合成，加工和修饰等以获得H的产物；下游过程 是运用生物化学和物理学方法分离、纯化产品，最终将产品推向市场并获得社会效益和 经济。