微生物检测技术和相关仪器习题.doc

第八章 微生物检测技术和相关仪器习题参考答案一、名词解释1．自动血培养检测和分析系统：重要由培养系统和检测系统组成培养系统涉及培养基、恒温装置和震荡培养装置检测系统由计算机控制，对血培养实行连续、无损伤瓶外监测通过自动监测培养基中的混浊度、pH值、代谢终产物CO2的浓度、荧光标记底物或代谢产物等的变化，定性地检测微生物的存在2．检测导电性和电压的血培养系统：血培养基中因具有不同电解质而具有一定导电性微生物在生长代谢的过程中可产生质子、电子和各种带电荷的原子团（例如在液体培养基内CO2转变成CO3－），通过电极检测培养基的导电性或电压可判断有无微生物生长3．应用测压原理的血培养系统：许多细菌生长过程中，常伴有吸取或产气愤体现象，如很多需氧菌在胰酶消化大豆肉汤中生长时，由于消耗培养瓶中的氧气而一方面表现为吸取气体而厌氧菌生长时最初均无吸取气体现象，仅表现为产气愤体（重要为CO2），因此可运用培养瓶内压力的改变检测微生物的生长情况4．采用光电原理监测的血培养系统：微生物在代谢过程中必然会产生终代谢产物CO2，引起培养基pH值及氧化还原电位改变运用光电比色检测血培养瓶中某些代谢产物量的改变，可判断有无微生物生长。

5．BacT/Alert自动血培养系统：该系统在每个培养瓶底部装置一带含水指示剂的CO2感受器，当培养瓶内有微生物生长时，其释放出的CO2可渗透至感受器，并与感受器指示剂上饱和水发生化学反映，产生游离氢离子使pH值减少，感受器上的指示剂由绿变黄感受器上方的光发射二极管每10min发一次光投射到感受器上，再由一光电探测器测量其产生的反射光反射光强度传送至微机后，会自动连续记忆并绘成生长曲线图，由微机分析判断阴性或阳性，以此拟定是否有微生物生长6．Bactec9000自动血培养系统：系统运用荧光法作为检测手段，其CO2感受器上具有荧光物质当培养瓶中有微生物存在时，产生的CO2可与感受器中的水发生反映产生H+，使pH值减少，酸性环境促使感受器释放出荧光物质从光发射二极管发射的光激发荧光感受器而产生荧光光电比色检测仪每10min直接对荧光强度进行检测，此荧光强度随CO2的产生量增多而增强数据传输到计算机后，生长监测系统根据荧光的线性增长或荧光产量的增长等特有标准，分析细菌的生长情况，最终判断阳性或阴性7．Vital血培养系统：系统采用同源荧光技术来监测微生物的生长与培养基结合的荧光分子在最初具有一定荧光值，当有微生物存在时，其生长代谢过程中或产生CO2、或发生pH值改变、或氧化还原使电位改变等，均可导致液体培养基内的荧光分子结构发生改变而成为无荧光的化合物，即发生荧光衰减。

通过光电比色计检测荧光衰减水平，可判断有无微生物生长8．微生物自动鉴定分析系统：将物理和化学分析方法相结合，根据细菌不同的生物学性状和代谢产物的差异，在微量快速培养基和微量生化反映系统的基础上，将细菌对底物的生化类型与已建立数据库类型相比较，即可得出鉴定结果9．微生物数码鉴定：指通过数学的编码技术将细菌的生化反映模式转换成数学模式，给每种细菌的反映模式赋予一组数码，建立数据库或编成检索本通过对未知菌进行有关生化实验并将生化反映结果转换成数字（编码），查阅检索本或数据库，得到细菌名称10．自动化抗生素敏感性实验：其实质是微型化的肉汤稀释实验将抗生素微量稀释在条孔或条板中，加入菌悬液孵育后放入仪器或在仪器中直接孵育，仪器每隔一定期间自动测定细菌生长的浊度，或测定培养基中荧光指示剂的强度或荧光原性物质的水解，观测细菌的生长情况得出待检菌在各药物浓度的生长斜率，经回归分析得到最低抑菌浓度MIC值，并根据CLSI标准得到相应敏感度11．VITEK自动鉴定及药敏分析系统：鉴定原理是根据不同微生物的理化性质不同，采用光电比色法，测定微生物分解底物导致pH值改变而产生的不同颜色，来判断反映的结果VITEK系统可快速鉴定500多种临床病原菌。

具有20多种药敏测试卡、90多种抗生素和测定超广谱β-内酰胺酶测试卡尚有根据细菌耐药规律而设定的专家系统，可帮助校正和修改结果12．MicroScan Walk/ Away自动鉴定及药敏分析系统：系统除采用传统呈色反映法外，同时采用敏感度极高的快速荧光测定技术来检测细菌胞外酶鉴定板有普通板和快速板两种，普通板获得结果需要16～18h，快速板测定只需2～3.5h，可鉴定近800种细菌药敏部分采用比浊法进行测定13．Biolog微生物鉴定系统：其原理是运用微生物对不同碳源代谢率的差异，通过检测微生物细胞运用不同碳源进行新陈代谢过程中产生的氧化还原酶与显色物质发生反映而导致的吸光度以及由于微生物生长导致的浊度差异，与标准菌株数据库进行比对，即可得出最终鉴定结果二、选择题【A型题】1．B． 2．D 3． C 4．E 5．A 6．C 7．B 8．D 9．E 10．C 11．A 12．B 13．C 14．D 15．E 【X型题】1．BD 2．ABCDE 3．ABC 4．ABCD 5．BDE6．ABCD 7．ACD 8．ABCDE 9．ABCDE 10．ABCDE11．BCDE 12．BCDE 13．ABCDE 14．ABCDE 15．ABCDE三、简答题1. 简述自动化血培养仪培养系统的特点。

答：培养系统涉及培养基、恒温装置和震荡培养装置具有培养基营养丰富，检测灵敏度高，检出的时间短，检出病原菌的种类多，抗干扰能力强、污染明显减少等特点2. 简述自动化血培养仪检测系统的工作原理答：检测系统由计算机控制，对血培养实行连续、无损伤瓶外监测其工作原理重要是通过自动监测培养基（液）中的混浊度、pH值、代谢终产物CO2的浓度、荧光标记底物或代谢产物等的变化，定性地检测微生物的存在3. 自动化血培养检测和分析系统按检测原理可分为哪几类，各类型的工作原理是什么？答：以检测培养基导电性和电压为基础的血培养系统：血培养基中因具有不同电解质而具有一定导电性微生物在生长代谢的过程中可产生质子、电子和各种带电荷的原子团，通过电极检测培养基的导电性或电压可判断有无微生物生长；应用测压原理的血培养系统:许多细菌生长过程中，常伴有吸取或产气愤体现象，因此可运用培养瓶内压力的改变检测微生物的生长情况；采用光电原理监测的血培养系统:微生物在代谢过程中产生的CO2引起培养基pH值及氧化还原电位改变运用光电比色检测血培养瓶中某些代谢产物量的改变，可判断有无微生物生长4. 简述自动血培养仪的基本结构及其功能答：重要培养瓶、培养仪和数据管理系统等三部分组成。

培养瓶:通常为一次性无菌培养瓶，提供不同细菌繁殖所必需的增菌液体培养基和适宜的气体成分，并且具有不同的指示系统；培养仪：设有恒温、振荡培养装置及监测装置,培养瓶放入仪器后进行培养及连续监测，并给予提醒信息；数据管理系统：收集并分析来自培养仪的数据，以及将患者和培养瓶的资料存入数据库5. 采用光电原理监测的血培养系统，按检测手段可分为哪几类？答：采用光电原理监测的血培养系统，按检测手段可提成BioArgos系统、BacT/Alert系统、Bactec9000系列和Vital系统等四类6. 简述BacT/Alert自动血培养系统工作原理答：该系统在每个培养瓶底部装置一带含水指示剂的CO2感受器，当培养瓶内有微生物生长时，其释放出的CO2可渗透至感受器，并与感受器指示剂上饱和水发生化学反映，产生游离氢离子使pH值减少，指示剂由绿变黄感受器上方的光发射二极管每10min发一次光投射到感受器上，再由一光电探测器测量其产生的反射光产生的CO2越多，则被反射的光就越多反射光强度传送至微机后，会自动连续记忆并绘成生长曲线图，由微机分析判断阴性或阳性，以此拟定是否有微生物生长7. 简述Bactec自动血培养系统工作原理。

答：BACTEC系统运用荧光法作为检测手段，其CO2感受器上具有荧光物质当培养瓶中有微生物存在时，产生的CO2可与感受器中的水发生反映产生H+，使pH值减少，酸性环境促使感受器释放出荧光物质从光发射二极管发射的光激发荧光感受器而产生荧光光电比色检测仪每10min直接对荧光强度进行检测，此荧光强度随CO2的产生量增多而增强数据传输到计算机后，生长监测系统根据荧光的线性增长或荧光产量的增长等特有标准，分析细菌的生长情况，最终判断阳性或阴性8. 简述Vital自动血培养系统工作原理答：该系统采用同源荧光技术来监测微生物的生长也就是说，与培养基结合的荧光分子在最初具有一定荧光值，当有微生物存在时，其生长代谢过程中或产生CO2、或发生pH值改变、或氧化还原使电位改变等，均可导致液体培养基内的荧光分子结构发生改变而成为无荧光的化合物，即发生荧光衰减通过光电比色计检测荧光衰减水平，可判断有无微生物生长9. 简述BacT/Alert自动血培养系统的重要组成部分及相应功能答： BacT/Alert自动血培养系统的重要组成部分有培养瓶、培养仪和数据管理系统培养瓶为一次性无菌培养瓶，每个培养瓶底部都包含一个检测CO2的传感器，通过检测CO2变化作为微生物生长状况的指示器；培养仪中设有恒温装置、振荡培养装置及监测装置。

培养瓶放入仪器后进行培养并借助固相反射光光度计连续监测每个培养瓶的状态数据管理系统由主机、监视器、键盘、条形码阅读器及打印机等组成重要功能是收集并分析来自BacT/Alert血培养仪的数据，并将患者和培养瓶的资料存入数据库数据管理系统可根据各实验室的规定追踪大量的信息，根据病区、微生物类型及时间追踪分析结果10. 简述BACTEC9000系列自动血培养系统的重要组成部分及相应功能答：重要组成部分有培养瓶、培养仪和数据管理系统培养瓶针对微生物对营养和气体环境的规定悬殊较大，涉及患者的年龄和体质差异以及之前是否服用抗菌素等要素BACTEC9000系统可提供多种专用封闭式培养瓶；各种仪器的培养仪结构基本相同，重要由转动体、键盘、条形码阅读器、液晶显示屏、计算机及外部接口等组成培养瓶放入仪器后进行转动，恒温培养，并连续监测每个培养瓶荧光信号的变化；数据管理系统获取、整理、解决并分析来自BACTEC9000系列培养仪的数据信息，以及将患者相关信息和培养瓶资料存入数据库，并进行管理11. 第三代自动血培养仪有哪些性能特点？答：（1）培养基营养丰富；（2）以连续、恒温、振荡方式培养，细菌易于生长；（3）培养瓶多采用不易碎材料制成，提高了使用的安全性；（4）采用封闭式非侵入性的瓶外监测方式，避免标本交叉感染，且无放射性污染；（5）自动连续监测，缩短了检测时间，阳性标本检测可快速、准确；（6）结果报告及时，85%以上的阳性标本能在48小时内被检出；（7）培养瓶多采用双条形码技术，只需用电脑上的条码阅读器扫描报告单上的条码，就可直接查询到病人的结果及生长曲线；（8）培养瓶可随时放入培养系统，并进行追踪检测；（9）数据解决功能较强，数据管理系统随时监测感应器的读数，依据数据的变化来鉴定标本的阳性或阴性，并可进行流行病学的记录分析；（10）设有内部质控系统，可保证仪器的正常运转；（11）可进行血液及所有无菌体液的细菌培养检测。

12. 简述自动化血培养检测和分析系统常见故障及维护答：温度异常：多数情况下是由于仪器门打开的次。