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病理切片前处理及HE染色.docx

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卖家[上传人]：桔****

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常见问题

HE染色（该方法对于肺组织较为适宜）① 新鲜组织取出后 4% 多聚甲醛固定 48 小时；② 浸入 70% 酒精中可保存 15 天 ;③ 脱水（梯度）：70%乙醇1.5小时1次*80%乙醇30min 1次f 95%乙醇 15min 2 次 f1000%乙醇 10min 3 次；④ 透明：二甲苯透明2次（I）、（口）各15m in （之前是30m in）⑤ 浸蜡，包埋，烘片程序（56度）石蜡I浸润30min f 石蜡□浸润90min f 石蜡皿浸润6h （2-4h） f 包埋f切片f烘片⑥ HE 染色1.脱蜡：二甲苯（I）、（II ）、（III）各 10min；2水化：无水乙醇5分钟2次f 95%乙醇5分钟2次 +70%乙醇五分钟1次，自来水轻晃几下置于蒸馏水中3-5分钟（可一直放于蒸馏水中）；3苏木精染色5分钟---自来水轻晃1分钟至无苏木精 1%盐酸酒精分化10秒（变为橙红色） ---硫酸锂中返蓝（上下来回，可见切片返回蓝色，蒸馏水中静置3秒；4.脱水： 70%酒精 20 秒 95%酒精 5 分钟无水乙醇 10 分钟， 95%酒精脱水时可以取出切片显微镜下观察染色效果）；5 透明：二甲苯透明 5 分钟 2 次；6.封片：中性树胶，在二甲苯中取出切片趁二甲苯未干时封片，通风厨中进行后置于通风厨中晾干。

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