比色法测定薯蓣丸中薯蓣皂甙元的含量(精).doc

比色法测定薯蓣丸中薯蓣皂甙元的含量 更新日期： 2010-05-02 点击： 敖冬梅陈树和 刘焱文 胡俊 姚亦之 薯蓣丸是由薯蓣、当归、桂枝、人参、干地黄等 21 味中药组成具有调理脾胃，益气和营的功效薯蓣为本品方中君药，主要含皂甙类成分，其甙元为薯蓣皂甙元为了控制本品的质量，以薯蓣皂甙元为对照，采用比色法对本品中薯蓣皂甙元进行含量分析 1 仪器与试药 uv-210A型紫外分光光度计，薯蓣皂甙元对照品 (中国药品生物制品检定所提供，供含量测定用，显色剂： 5%香草醛溶液 (500g 香草醛溶于 10ml 冰醋酸；新鲜配制 0.2ml 和高氯酸0.8ml其他试剂均为分析纯2 供试液的制备对照溶液的制备：精密称取薯蓣皂甙元标准品5.6g，置10ml 量瓶中，加氯仿使之溶解后，定容至10ml，摇匀，备用供试品溶液的制备：取本品2 丸，研磨混匀，精密称取1.5g，加适量硅藻土拌匀，置索氏提取器中，加甲醇适量，加热回流提取至无色将提取液定量转移至蒸发皿中，水浴蒸干，残渣用 3mol/L 盐酸溶液溶解，定量转移至三角锥瓶中，加 3mol/L 盐酸溶液至 50ml，加热回流水解 2 小时，放冷，用石油醚 (30～60℃萃取 5 次，每次 30ml，合并石油醚液，水洗至中性，回收石油醚至干，加氯仿适量溶解，定量转移至 10ml 容量瓶中，用氯仿定容至 10ml，摇匀，备用。

3方法与结果3.1实验条件选择分别取对照品溶液，供试品溶液各0.5ml，依法显色，在200～600nm 区间扫描测定，对照品溶液与供试品溶液的最大吸收波长约451nm3.2标准曲线的制备精密吸取薯蓣皂甙元对照品溶液0.05，0.10， 0.15，0.20， 0.25ml，置 10ml 容量瓶中，挥尽溶剂，分别精密加入 5% 香草醛溶液 0.2ml 和高氯酸 0.8ml，置 70℃水浴上不断振摇保温 20 分钟，迅速冷却，加冰醋酯稀释至刻度，摇匀，备用以 5%香草醛溶液 0.2ml 和高氯酸 0.8ml，加冰醋酸稀至刻度的溶液为空白，在 451nm 波长处测定吸收度以浓度 (c， mg 为横坐标，吸收度为纵坐标，绘制标准曲线结果见表 1 表 1 浓度与吸收度的关系 浓度 (mg 0.028 0.056 0.084 0.0112 0.140吸收度 0.141 0.289 0.432 0.590 0.734结果表明，薯蓣皂甙元在 0.028～0.140mg 范围内，吸收度呈良好线性关系，其回归方程为A=0.0089+5.3107℃， r=0.99993.3样品测定取本品份，照供试品溶液制法制成供试品液，分别吸取上述供试液各0.5ml，对照品溶液0.2ml，置10ml量瓶中，挥尽溶剂，分别精密加入 5%香草醛溶液 0.2ml 和高氯酸 0.8ml，置 70℃水浴上不断振摇，保温 20 分钟，迅速冷却，加冰醋酸稀释至刻度，摇匀，备用。

在 451nm 波长处测定吸收度按对照品比较法计算含量，结果见表 2 表 2 样品测定结果 样号 薯蓣皂甙元含量(mg/g，以薯蓣皂甙元计 (mg/g CV (% 1 0.1363 0.1363 0.1360 0.1362 2 0.1403 0.14050.1397 0.1402 3 0.1359 0.1359 0.1362 0.1360 1.25 4 0.1370 0.1365 0.1369 0.1368 50.1368 0.1371 0.1365 0.1368 3.4 回收率实验 取本品已知含量的同一批样品 5份，各 0.75g，精密称定，分别加入薯蓣皂甙元对照品各 0.07mg，照供试品溶液制备方法同法制备，精密吸取上述溶液各 0.5ml，挥尽溶剂，显色比色后，计算回收率结果见表 3 表 3 回收率试验结果 样号 已知样品量 (mg 加入对照品量 (mg 测得量 回收率 (% CV(% ±±.0685 0.07 0.1372 98.68 5 0.0685 0.070.1368 98.13 3.5 稳定性实验 取薯蓣皂甙元对照品溶液，依法显色后，在不同时间测定其吸收度结果在半小时内无变化。

3.6 重现性试验 取本品同一批样品5 份，按供试品溶液制备方法平行制备，依法显色，于 451nm 波长处测定吸收度，并计算含量结果见表4表4重现性实验样号 1 2 3 4 5 含量 (mg 0.1371 0.13670.1343 0.1401 0.13620.1369 RSD(% 1.53测定结果表明，变异系数小于2.0%，方法重现性好4 讨论据文献报道，薯蓣皂甙元的含量测定方法有比色法［ 1］，薄层扫描法［ 2］本品薯蓣为君药，主含薯蓣皂甙，属甾体类成分本文采用比色法，以薯蓣皂甙元为对照，测定了本品中薯蓣皂甙元含量，方法简便快速，灵敏度高，重现性好 作者单位：敖冬梅 陈树和 刘焱文 (湖北中医学院 430061 胡俊 姚亦之 (黄石长征制药厂 435000 参考文献1 郑慧丽，竺叶青，戊皓青 .七叶一枝花酊剂薄层层析及其薯蓣皂甙元定量 .上海医科大学学报， 1995，22(1：65～66 2 刘玉珍，钱本余，夏莉杰，等 .蒺藜中薯蓣皂甙元的双波长薄层扫描定量法 .中成药， 1992，14(10： 35～36。