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实验目的：掌握纳氏试剂分光光度法和滴定法测定氨氮的原理和方法一、纳氏试剂比色法1、原理氨氮以游离氮（NH3）和铵盐（NH4）形式存在，两者的组成比例取决于水的 pH 和水温测定方法很多，如气相色谱法、电极法等，纳试剂比色法操作简单、灵敏但是钙镁铁等金属离子和硫化物、醛酮色等都能产生干扰，因此，需要作预处理原理是：碘化汞和碘化钾的碱性溶液（纳试剂）与氨反应生成淡红棕色胶态化合物，其色度与氨氮含量成正比，通常用波长 410—425nm 范围内测其吸光度，计算其含量氨氮与纳氏试剂的反应式如下： KIOHINgHKOgI 7232234 2、仪器（1）带氮球的定氮蒸馏装置：500mL 凯式烧瓶、氮球、直形冷凝管和导管2）250ml 三角瓶（吸收瓶）平行样、空白，3 个/组（3）50mL 具塞比色管 7 只/组4）分光光度计5）2cm 比色皿（6）pH 计7）移液管：1ml(酒石酸钾钠)、2ml（纳试剂）（8）量筒：50ml（吸收液）3、试剂配制试剂均用为无氨水1）无氨水：可用一般纯水通过弱酸性阳离子树脂柱或每升水加入 0.1ml 浓硫酸在全玻璃蒸馏器进行蒸馏，弃去前 50ml 初馏水，接取馏出水接收于玻璃容器中，密封保存。

2）盐酸溶液（浓度为 1mol/L）3）氢氧化钠溶液（浓度为 1mol/L）4）轻质氧化镁（MgO）：将氧化镁加热至 5000C，以除去碳酸盐5）0.05% （m/V）溴百里酚蓝指示液（pH6-7.6）6）防沫剂（液如石蜡碎片）7）吸收液：硼酸溶液：称取 20g 硼酸溶液无氨水中，稀释至 1000mL8）纳氏试剂：可选择下列一种方法制备：A、称取 20g 碘化钾溶于约 100ml 水中，边搅拌边分次少量加入二氯化汞（HgCl 2）结晶粉末（约 10g），至出现朱红色沉淀不易溶解时，改为滴加饱和二氯化汞溶液，并充分搅拌，当出现微量朱红色沉淀不再溶解时，停止滴加氯化汞溶液另称取 60g 氢氧化钾溶于水，并稀释至 250mL，冷却至室温后，将上述溶液在边搅拌下，徐徐注入氢氧化钾溶液中，用水稀释至 400mL，混匀静置过夜，将上清液移入聚乙烯瓶中，密塞保存B、称取 16g 氢氧化钠，溶于 50mL 水中，充分冷却至室温另称取 7g 碘化钾和 10g 碘化汞(HgI 2)溶于水，然后将此溶液在搅拌下徐徐注入氢氧化钠溶液中用水稀释至 100mL，贮于聚乙烯瓶中，密塞保存9）酒石酸钾钠溶液：称取 50g 酒石酸钾钠(KNaC 4H4O6·4H2O)溶于 100mL 水中，加热煮沸以除去氨，放冷，定容至 100mL。

10）铵标准贮备溶液：称取 3.819g 经 100℃干燥过的优级纯氯化铵 (NH4Cl)溶于无氨水中，移入1000mL 容量瓶中，稀释至标线此溶液每毫升含 1.00mg 氨氮11）铵标准使用溶液：移取 5.00mL 铵标准贮备液于 500mL 容量瓶中，用水稀释至标线此溶液每毫升含 0.010mg 氨氮4、测定步骤（1）水样预处理：清洁水样，采用絮凝沉淀法：加硫酸锌，再加氢氧化钠呈碱性，生成氢氧化锌沉淀工业废水则用蒸馏法：（A）取 50mL 硼酸溶液于 250mL 三角瓶中作为吸收液B）分取 250mL 水样（如果氨氮含量较高，可分取适量并加无氨水至250mL，使其含量不超过 2.5mg）移入凯氏烧瓶中，加数滴溴百里酚蓝指示液，用氢氧化钠或盐酸溶液调 pH 值至 7 左右（由黄色 6---蓝色 7.6）加入 0.25g轻质氧化镁和数粒玻璃珠，立即连接氨氮球和冷凝管，导管下端插入 50ml 硼酸吸收液面下，加热蒸馏至流出液达 200mL 左右时，停止蒸馏，定容至 250mLC）空白液的蒸馏：以无氨水代替水样，其它步骤和水样预蒸馏步骤相同2)标准曲线的绘制：吸取 0、0.50、1.00、3.00、5.00、7.00 和 10.0mL 铵标准使用液于 50mL 比色管中，对应氨氮 0、0.005、0.01、0.03、0.05、0.07、0.1mg 。

加水至标线，加1.0mL 酒石酸钾钠溶液，混匀加 1.5mL 纳氏试剂，混匀放置 10min 后，在波长 420nm 处，用光程 20mm 比色皿，以无氨水为参比，测定吸光度由测得的吸光度，减去零浓度空白的吸光度后，得到校正吸光度，绘制以氨氮含量（mg）对校正吸光度的校准曲线3) 水样的测定：分取适量经蒸馏预处理后的流出液（使氨氮含量不超过 0.1mg），加入50mL 比色管中，加一定量的 1mol/l 氢氧化钠中和硼酸，稀释到标线混匀，加 1.5mL 的纳氏试剂，混匀，放置 10min 后，同校准曲线步骤测量吸光度 (4) 空白试验：以无氨水代替水样，作全程序空白测定5、计算由水样测得的吸光度减去空白实验的吸光度后，从标准曲线上查得氨氮含量（mg）氨氮(N, mg/L)= 10vm式中：m—按样品吸光度在校准曲线上查得对应的氨氮含量（ mg）；V—水样体积（mL）6、注意事项(1) 纳氏试剂中碘化汞与碘化钾的比例，对显色反应的灵敏度有较大影响静置后生成的沉淀应除去2) 蒸馏时应避免发生暴沸，否则造成流出液温度升高，氨吸收不完全3) 水样如含余氯，应加入适量 0.35%硫代硫酸钠溶液，每 0.5mL 可除去0.25mg 余氯。

4) 所用玻璃器皿应避免实验室空气中氨的沾污。