实验动物学要点整理.doc
9页1. 实验动物定义及遗传学分类和微生物控制程度分类?定义:实验动物:又称狭义实验动物,是指经人工培育和人工改造,对其携带的微生物和寄生虫实行控制、遗传背景明确或者来源清楚,而应用于科学研究、教学、生物制品或药品生产、鉴定以及其它科学实验的动物实验用动物又称广义实验动物,泛指用于科学实验的各种动物,包括实验动物、家禽和野生动物遗传学分类:实验动物按遗传学可分为相同基因类型和不同基因类型两大类相同基因类型又分为近交系、突变系和杂交F1代;不同基因类型又称远交群或封闭群微生物控制程度分类: 可分为四类:无菌动物(germ free animal,GF)、无特定病原体动物(specific pathogen free animal,SPF)、清洁动物(clean animal,CL)和普通动物(conventional animal,CV)GF和悉生动物饲养于隔离环境中,SPF和CL饲养于屏障环境中,CV饲养于开放环境2、什么是近交系动物,举例常用的近交系动物?定义:近交系动物:一般称为之纯系动物是采用兄妹交配(BXS——brother xsister)或亲子交配(PXO——parent xoffspring,父母与子女交配),连续繁殖20代以上而培育出来的纯品系动物。
一般以小鼠为典型代表所以把啮齿类动物同胞兄妹连续交配达20代以上的品系称为近交系,其近交系数可达99.8%,亦可用亲子(父女、母子)连续交配20代以上达到近交目的,其近交系数可达99%但必须用年轻的双亲同其子女交配,而且亲子交配不能同兄妹交配混用例如,如近交品系大鼠有ACI、AGUS、BN、SHR、F344.3、封闭群动物定义及其应用特点,举例常用的封闭群动物定义:封闭群动物:在不从外部引入新个体的条件下,以非近亲交配方式进行繁殖、生产的实验动物种群,且至少连续繁殖四代以上,这群动物可称为封闭群动物在这固定的一群动物中,有的可能有近交关系,有的则无近交关系,但都要避免兄妹交配,也要避免亲子、表兄妹、侄伯之间相互交配,保持其一定的遗传差异应用特点:封闭群因为有杂合子并避免了近交,故能保持相当程度的杂合性,从而避免了近交衰退的出现,故其生活力、生育力都比近交系强,具有繁殖力高等遗传学的特点,因此封闭群动物可大量生产,作为鉴定实验用例如ddN小鼠,惠斯脱(Wistar)大鼠、各研究所长期自行繁殖的昆明种(瑞士种)小鼠、青紫兔、新西兰白兔、大白耳兔、豚鼠等均属此类4、实验动物的等级分类(国际和我国) 按微生物级别,我国的实验动物分类及主要用途l 普通级----一般为教学示范用;或为某项研究进行探索方法的预实验。
是未经积极的微生物学控制,普遍地饲养在开放卫生环境里的动物垫料和食物不经高压消毒,饮水为自来水,不喂青饲料不允许有人畜共患病和动物烈性传染病的病原体及体外寄生虫的动物普遍动物只能供教养和一般性实验,不适用于研究实验l 清洁级----国内科研工作要求的标准动物,适合于大多数科研课题;无人畜共患病和主要传染性疾病的病原体及体外寄生虫的动物饲养在亚屏障系统中,除不能携带有普通级动物应排除的病原体外,还不能携带对动物危害大、对科研干扰大的病原体的动物l SPF级----国际标准实验动物;适用于所有科研实验是指机体内无特定的微生物和寄生虫存在的动物,简称SPF动物但非特定的微生物和寄生虫是允许存在的,故其实际上就是指无传染病的健康动物饲养在亚屏障系统中. 除清洁级动物应排除的病原体外,不携带主要潜在感染或条件致病和对研究实验干扰大的寄生虫及病原SPF动物来源于无菌动物一般大多先培育出无菌动物或悉生动物后,再把其转移到有封闭系统(Barrier System)的设施中饲育繁殖l 无菌动物-----仅在特殊课题需要时使用是指机体内外均无任何寄生物(微生物和寄生虫)的动物此种动物在自然界中并不存在,必须用人为的方法培育出来。
饲养在隔离器系统中5、什么是清洁级动物,SPF动物?清洁级动物:无人畜共患病和主要传染性疾病的病原体及体外寄生虫的动物饲养在亚屏障系统中,除不能携带有普通级动物应排除的病原体外,还不能携带对动物危害大、对科研干扰大的病原体的动物SPF动物:无特殊病原体动物(Specefic pathogen-free animals)是指机体内无特定的微生物和寄生虫存在的动物,简称SPF动物但非特定的微生物和寄生虫是允许存在的,故其实际上就是指无传染病的健康动物饲养在亚屏障系统中.一般大多先培育出无菌动物或悉生动物后,再把其转移到有封闭系统(Barrier System)的设施中饲育繁殖SPF动物的祖先是无菌动物6、实验动物传染病流行的基本环节?有三个基本环节:传染源、传播途径、易感动物(1)传染源 主要是患病动物(包括潜伏期动物,临床状态明显动物和恢复期动物)和携带病原体动物.(2)传播途径 直接接触传播:不通过任何媒介,健康动物和患病动物直接接触感染,如狂犬病病毒、猴B病毒等 a 水平传播 实验动物群体中相互传播,传播途径包括消化道、呼吸道或皮肤粘膜等 b 垂直传播 指母体通过卵巢、子宫将病原体传给胎儿。
间接接触传播:指在外界环境因素的参与下,病原体通过传播媒介使易感动物发生传染的方式 a 非生物性传播媒介 经空气(飞沫、尘埃)传播;饲料、垫料传播;饮水和水瓶传播;笼具和器具传播 b 生物性传播媒介 节肢动物;野生动物;实验动物;饲养及工作人员3)易感动物 指对某一传染病病原体敏感的动物.7、动物实验场所常用的消毒方法物理消毒法 高压蒸汽:用于饲料、垫料和器具消毒 高热煮沸:用于器械、笼具、水瓶等消毒 干烤消毒:180℃,30min或280 ℃,15min 火焰消毒:300 ℃,用于不锈钢笼具和金属器械消毒 照射:X射线、γ射线等, 过滤消毒:用于空气净化和消毒化学消毒法 液体消毒剂:石炭酸、过氧乙酸、来苏水、次氯酸等 蒸汽消毒:福尔马林、三聚甲醛等8、实验动物设施等级分类及适用提示序号设施名称 适用环境提示 1普通环境符合动物居住的基本要求,不能完全控制传染因子,适用于饲育、教学等用途的普通级实验动物 2屏障环境适用于饲养清洁实验动物及无特殊病原体(SPF)实验动物,该环境严格控制人员、物品和环境空气的进出 3隔离环境采用无菌隔离装置以保障无菌或无外来污染动物,隔离装置内的空气、饲料、水、垫料和设备均为无菌,动物和物料的动态传递须经特殊的传递系统,该系统既能保证与环境的绝对隔离,又能满足转运动物时保持内环境一致,适用于饲育SPF、悉生及无菌实验动物9、什么是屏障环境屏障环境:设有恒温、恒湿、除菌换气系统的相对密封环境,送入的空气洁净度达1万级,室内保持正压,具有严格的微生物控制系统,饲养清洁级或SPF级实验动物和做清洁级和SPF级动物各种试验。
10、什么是空气溶胶,它包括哪些?空气溶胶:空气中的浮游微粒的总称,气溶胶是液态或固态微粒在空气中的悬浮体系微生物气溶胶可分为两大类:一类是飞沫核气溶胶,另一类是粉尘气溶胶11、实验动物营养需要的分类营养需要是指动物群体每天对各种营养物质的平均需要量1)生长营养需要 要求饲料能满足动物生长与体内同化过程所需的各种营养物质2)繁殖营养需要 要求能满足动物母体自身的营养需要和为胎儿生长发育与哺乳提供各种优质、充分的营养物质 动物在妊娠期间母体代谢率平均增加11~14%,后期可达30~40%3)维持营养需要 维持就是指正常情况下实验动物体重不增不减、不进行生产,体内合成与分解代谢处于动态平衡状态12、实验动物的配合饲料和日粮配合饲料:各种饲料原料根据实验动物饲养标准配合设计而成,配合饲料(formula feed)指根据动物的不同生长阶段、不同生理要求、不同生产用途的营养需要以及以饲料营养价值评定的实验和研究为基础,按科学配方把不同来源的饲料,依一定比例均匀混合,并按规定的工艺流程生产以满足各种实际需求的混合饲料日粮:满足一头动物一昼夜所需各种营养物质而采食的各种饲料总量称为日粮(ration)。
13、什么是纯和日粮、天然日粮?纯和日粮:是指配制饲料时不用天然饲料,所有成分都是由纯的营养素组成,如合成氨基酸、纯化的淀粉、葡萄糖或蔗糖等天然日粮:天然组分日粮( Natural - ingredient diets)指经过适当加工的谷类籽实,如玉米、小麦或经过有限精制的产品,如鱼粉,豆饼等配合成的日粮这类日粮比较经济,适口性好,不仅适用于动物生产单位,而且也适用于动物实验单位饲喂实验动物14、什么是发育环境?发育环境指动物受精、出生到离乳这段时间15、动物实验设计的基本类型(1)完全随机化设计(简单随机抽样)随机分组:先将动物按顺序编号,再用随机化工具,将动物分组,分为实验组和对照组优点:方法简单,容易操作,灵活,统计分析也比较简单,抗数据缺失能力较强亡,信息损失较小缺点:对非实验因素缺乏有效控制,只能靠随机化方法平衡有关因素的影响结果精确度降低,误差往往偏高所以一般适用于实验对象同质较好的实验设计2)随机区组设计(分层随机抽样) 随机区组设计开始应用于农业实验随机区组设计定义是一种混合抽样,其特点是将总体按变异原因或程度划分成若干个区组,然后再用简单随机抽样方法 注意事项每个区组的动物数量应该等于或大于处理组要求的实验动物的数量。
如少于处理组数,则这组不能采用,特别不能用别窝的动物来补充;如大于处理组数,则这组能采用,多余的动物将舍弃特点把总体分为几个比较同质区组,从而提高抽样的准确度显然比简单随机抽样准确;运用了随机原理,同时运用局部控制原理,从而降低了抽样误差,也可以来估算抽样误差;缺点:抗缺失数据能力差,如果一个区组发生意外,整个区组必须放弃 (3)配对设计 实验动物个体之间的差异较大时,可采用配对设计选择个体差异较小的动物配成对子,然后随机分配给处理组和对照组主要用于封闭群大型实验动物,如狗、猫、猴,个体差异大,不易获得较大数量的相似个体,一般采用配对设计4)其他设计:顺序抽样、整体抽样、典型抽样16、实验动物环境的定义实验动物环境:有广义和狭义的概念环境因素包括发育环境因素和周围环境因素前者指从受精到出生前在母体内的环境及出生后的哺乳期及发育期所处的各种环境因素;后者指成熟动物个体所处的物理化学生物因素,其中包括我们人为地施加的药物、手术等处理因素广义的实验动物环境包括:(1)气候因素:温度、湿度、气流、风速等2)物理、化学因素:换气(氧、二氧化碳)、粉尘、臭味、噪音、照明等3)居住因素:房屋、饲养笼具、垫料、供水器等。
4)营养因素:饮料、饮水(5)生物因素:同种动物因素(社会地位、势力范围、咬斗、饲养密度等);异种动物因素(微生物、人及其它动物种等)以上所述的环境因素中除去营养因素及病源微生物因素即称为狭义的环境因素17、生物安全防护实验室的分级及使用范围 适用范围一级生物安全防护实验室适用于对健康成年人无致病作用的微生物,如用于教学的微生物实验室 二级生物安全防护实验室适用于对人和环境有中等潜在危害的微生物 三级生物安全防护实验室适用于主要通过呼吸途径。

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