SiemensAdvia系列生化仪参数详解.doc
52页wordSiemens Advia 系列生化仪参数详解本详解主要针对的是市场上常见的四种西门子机型:ADVIA1200/1650/1800/2400大致分为五个章节:简介、根本参数介绍、读点前移、前带监测、参数设置一、简介:ADVIA1650是最早进入中国的拜耳生化仪,虽然师出日本,也是日本电子制造,但还是能看出拜耳的设计理念在里面后来拜耳被西门子收购,ADVIA生化也保存了下来ADVIA系列生化仪都是将ISE作为标配安装,ADVIA1200生化速度是800测试每小时,ISE400测试每小时;ADVIA1650和升级版1800的生化速度都是1200测试每小时,ADVIA2400的生化速度是1800测试每小时Advia系列的操作控制软件都某某小异,几乎没有什么本质上的变化,所以延续性较强加上西门子特有的流水线兼容性,使ADVIA系列的生命力变得异常顽强,在国内流水线市场里占据相当大的份额在ADVIA老版本的程序中,是支持四种试剂的,也就是R1、R2、R3和R4;但在后续版本中,四种试剂变为2种,只有R1和R2,这一点厂家并没有说明为什么所有的Advia系列,都是两个试剂盘,两个试剂针,反响盘是单盘,塑料反响杯,一根样本针。
除ADVIA1200外,都有一个稀释盘和稀释样本针,稀释样本针将原始样本参加到稀释样本盘中,按照最高可达1:75的比例进展样本稀释,然后通过样本针将稀释后的样本转移到反响盘中同样,在反响盘上也可以进展最高1:75的样本稀释,这样二者相乘,样本的稀释比例高达1:5625稀释样本盘也是塑料杯,有自己单独的搅拌器、冲洗站ADVIA的试剂也可以进展稀释,所以节省试剂但由于设计理念的关系,其孵育介质有孵育油,也就是油浴3M生产的孵育油价格较贵,而且需要半年更换除常规的清洗剂外,反响杯空白比色也需要单独的活化剂,加上稀释样本或试剂用的生理盐水,总体下来ADVIA的耗材较多,而且总本钱也不少所有的ADVIA系列都是R1+S+R2方式反响时间可选择:3分钟、4分钟、5分钟、10分钟、15分钟、长程反响21分钟和31分钟ADVIA1200没有稀释样本盘,所以样本直接被转移到反响杯上加样速度4.5秒,读点13.5秒,R1+S后读第一点,10分钟反响读点42个,R2在19点前参加反响杯总数231个,反响体积为80-430ul,R1和R2参加体积X围在5-300ul之间反响时间可选择:3分钟〔最后读点14〕、4分钟〔最后读点18〕、5分钟〔最后读点21〕、10分钟〔最后读点42〕、15分钟〔最后读点63〕、长程反响21分钟和31分钟。
ADVIA1650和1800加样速度为3秒,读点时间是6秒,R1+S后读第一点,10分钟反响读点98个,R2在49点前参加反响杯总数221个,反响体积为80-300ul,R1和R2参加体积X围在15-150ul之间ADVIA2400加样速度为2秒,读点时间是14秒,R1+S后读第一点,10分钟反响读点41个,R2在22点前参加反响杯总数340个,反响体积为60-180ul,R1和R2参加体积X围在10-100ul之间二、根本参数介绍:主读点:M.DET.Pm/n 也就是Main Detect point的简写,m和n是主读点区的起止点,0 在速率法当中,读点不能少于六个,如果小于六个,系统自动前移满足六个根据反响方法,子读点可以选择也可以不选择u/d和U/D旗标:U和u表示上限,D和d表示下限,当超过小写u/dX围时,用大写U/D显示空白:Blank〔u/d U/D〕,这里指的是试剂空白的上下限就是以去离子水为样本的检测,主要用来监测试剂性能,是以主读点区主波长的吸光度值为基准的,当试剂的空白吸光度超过u/d上下限X围,就会用U/D显示出来,提醒操作人员注意试剂问题试剂空白是可以选择是否进展监测的Blank u/d的定义是,在下降速率当中,Blank u也就是空白上限为2ABS,Blankd为主读点吸光度的50%;在上升速率当中,Blank u也就是空白上限为最高主读点吸光度的150%,Blank d为主读点吸光度的50%图1 Blank u/U/d/D 示意图修正点: E2E2表示试剂和样本参加后的几个点的吸光度值,用来进展LIH〔乳糜、黄疸、溶血等标本〕或底物耗尽的监测E2都将监测试剂空白以与样本加试剂的结果,也就是说E2=样本+R1的E2吸光度 减去 试剂空白的E2吸光度读点前移:Point-Forwarding在速率法中,高浓度样本往往很快消耗完反响物,而底物却大量存在,速率反响很快停止。 当系统监测到这种情况时,会自动将主读点前移至发生速率反响的区域在使用读点前移的技术时,需要增加一个主读点M.DET.P l,l 图3 底物耗尽示意图图3的所示中,Sample d 大于主读点区m和n最后两点的吸光度值,所以判断为底物耗尽,自动将读点前移到l和m点这里有一个问题,如果m点也处于底物耗尽的区域怎么办?前移的结果也会不准确所以ADVIA的读点前移技术并不是那么可靠,为了保证可靠,其采用了非常复杂的计算方式,目的只有一个,躲避东芝的弹性速率法这里简单的介绍一下弹性速率法其原理是监测速率反响的主读点区,并根据设置的吸光度差值进展没两个相邻读点的吸光度差,当实际读取的吸光度差值小于设定的吸光度差值时,就会判断为底物耗尽而底物耗尽判断后自动将读点前移至预先设置的两个点的区域,这样可以充分避开ADVIA中的如果m点也在底物耗尽区域的可能读点前移不在这里做详细介绍,后面有单独的章节反响方法:有五个选择,EPA、RRA、2PA、CRA和IMA;EPA反响方法:就是常说的终点法,可以是一点终点法,也可以是两点终点法一点终点法时,子读点p和r无效,填为0;两点终点法时,子读点p和r要填写,而且要在R2参加之前终点法读点要求至少三个点,不足三个点时,系统自动前移补足图4 EPA终点法示意图RRA反响方法:也就是常说的速率法,可以是单速率法,也可以是双速率法。 采用单速率法时,读取主读点区的m和n的区域进展每分钟速率计算采用双速率法时,还要读取R2参加之前的子读点区p和r的区域进展每分钟速率计算,然后主读点和子读点相减再进展浓度计算使用速率法时,系统将自动进展E2吸光度计算但在参数设置,可以选择是否选择E2 corre ,也就是是否选择E2修正用DO或Not Do选择在速率法当中,Blank u/d必须输入,并且可以选择在R2参加前一点插入检查点CHECK D.P.I,此检查点将于试剂空白数据进展比拟,借以判断试剂是否有问题但此法仅在下降速率法和IMA方法中使用如果不使用,如此填写0当然,在速率法当中,也可以选择底物耗尽监测而增加的主读点M.DET.P.l图5 RRA速率法示意图2PA反响方法:也就是常说的两点速率法也是速率法的变种,区别在于不进展主读点间的两个点的线性监测其余与速率法完全一样图6 2PA两点法示意图CRA反响方法:官方说法为随着时间的变化反响接近恒定,曲线由最小二乘法拟合,也有称为固定点法大致意思是选择读点区的两个点进展吸光度值得最小二乘法计算是根据时间和吸光度的数值进展计算的,无论是速率法还是终点法均可采用当子读点被采用时,p=r≠0,或p≠0,r=0时,是速率法,速率计算是根据两点间曲线的正切线;当p 当不采用子读点时,为终点法,采用最大时间吸光度和空白吸光度进展计算说实话,真不知道这个方法是做什么项目的,中文没有解释,英文的解释很少,也没发现实例图7 CRP固定点法示意图IMA反响方法:也就是免疫比浊法是采用最小二乘法计算的速率法对于R1的参加量太少,无法进展E2计算时,这个方法就变得有用了也就是说,在很多免疫比浊项目里,R1的参加量往往小于R2的量,所以引发了一系列的计算和判别上的困难,IMA就是为了解决这个难题的样本和第一试剂参加量太少,就无法进展E2的计算,没有E2就无法进展前带监测和底物耗尽的监测,所以在 IMA方法中R2之后插入监测点Check D.P.I,用于弥补R1和S的不足采用IMA方法设置检查点后,系统自动计算limit values值〔设备默认0.003〕,此法对浑浊样本的处理很有成效,所以用在免疫比浊项目上图8 IMA免疫比浊法示意图图9 IMA应用示意图IMA的其它使用方法与速率法一样,仅限于R1+S低于反响杯最小容量的测试项目里如果不存在这样的项目,那么即便是免疫比浊项目,也应该采用常规速率法或终点法定标方法:因数定标、线性定标和非线性定标;在参数界面里的Calc mthd,也就是计算方式里,有ABS和STD/MSTD选择,表示吸光度和单点定标/多点定标计算。 在ADVIA的所有机型里,定标中的零浓度点用试剂空白替代,所以在定标之前要做试剂空白,如果不做试剂空白,仪器会认为试剂空白就是原点注意这个差异,与奥林巴斯的不同奥林巴斯的试剂空白和零浓度校准点是两个概念,而在adiva里合二为一参数界面里的Formula,也就是公式才是选择定标方法的地方因数定标:如果在Calc mthd里选择ABS,那就意味着你要采用因数定标,那么在Formula里只有一个可以选择,那就是Linear,因数定标只能用于线性定标因数定标也就是直线方程里的Y=。

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