第十一章甾体激素类药物48讲义教材.ppt

单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版副标题样式*1甾体激素类药物的分析The analysis of Steroid Hormon Drugs氢化可的松、醋酸地塞米松、地塞米松磷酸钠、曲安奈德、甲睾酮、丙酸睾酮、苯丙酸诺龙、黄体酮、醋酸甲地孕酮、米非司酮、雌二醇、炔雌醇、炔诺酮和炔诺孕酮等甾体激素类药物的基本结构与分类、鉴别试验和含量测定基本内容掌握甾体激素类药物的基本结构与分类；各类药物的结构特征及其与分析方法的关系熟悉甾体激素类药物的紫外分光光度法、四氮唑比色法和异烟肼比色法；柯柏反应比色法 了解 甾体激素类药物的特殊杂质及其检查方法基本要求一、母核环戊烷骈多氢菲 C10、C13位上基团为角甲基1918甾环上双键的表示方法：n用“”表示,双键的位置写在的右上角双键位置41,455(10)甾环构型位取代位取代n二、分类按生理作用分为：1肾上腺皮质激素皮质酮的衍生物 4-3-酮结构去氧皮质酮n代表药物有：可的松氢化可的松n人工合成药物：地塞米松氢化泼尼松(泼尼松龙)n结构特点：含有21个CA环：4-3-酮结构（,-不饱和酮）17位：醇酮基，有还原性n供分析官能团：A环的4-3-酮17位的醇酮基17、21-二羟基-20-酮11位羟基或羰基受立体效应影响,无利用价值。

n2雄性激素及蛋白同化激素睾丸素的衍生物 代表药物：甲睾酮丙酸睾酮蛋白同化激素在睾丸素基础上结构修饰得到，如苯丙酸诺龙n结构特点：含有19个CA环的4-3-酮17位羟基、甲基、酯 供分析官能团： A环4-3-酮n3孕激素黄体酮醋酸甲地孕酮安宫黄体酮米非司酮n结构特点：含有21个CA环的4-3-酮17位甲酮基 供分析官能团： A环的4-3-酮 17位上的甲酮基n4雌激素雌二醇炔雌醇n结构特点： 含有18个CA环：苯环，3位上有酚羟基，10位无甲基17位：羟基、乙炔基 供分析官能团：A环的酚羟基及17位的羟基乙炔基l口服避孕药A环有4-3-酮结构；有的第17位有羟基和乙炔基；第10位无甲基炔诺酮异炔诺酮小结甾体激素碳原子数 A环17位取代基肾上腺皮质激素214-3-酮醇酮基雄性激素194-3-酮-OH-CH3孕激素214-3-酮甲酮基雌激素18苯环C3-酚OH-OH-CCH第二节鉴别试验一、呈色反应 1母核能与H2SO4，H3PO4，HClO4，HCl等呈色和荧光； 机制：母核的质子化 如：与硫酸显色反应与硫酸显色反应 显 色 荧光 加水稀释泼尼松龙泼尼松龙 深红深红 -絮状絮状 灰灰泼尼松泼尼松橙橙-黄黄蓝绿蓝绿炔雌醚炔雌醚橙红橙红黄绿黄绿 红色红色 炔雌醇炔雌醇橙红橙红黄绿黄绿絮状絮状 玫红玫红醋酸可的松醋酸可的松 黄或微带橙黄或微带橙 - 褪色并澄清褪色并澄清vKober反应：指雌激素与硫酸乙醇共热呈色，用水或稀硫酸稀释后，重新加热发生颜色改变，并在515nm附近有最大吸收的反应。

特征反应）n2官能团nC17-醇酮基: 肾上腺皮质激素类药物特征反应 机理：C17-醇酮基有强还原性，与氧化剂作用，被氧化成水合醛TTC：氯化三苯四氮唑(红四氮唑RT）BT：蓝四氮唑生成Formazan，用于皮质激素类药物鉴别和含量测定水合醛n羰基3位,20位羰基可与羰基试剂反应羰基试剂:羟胺、2,4-二硝基苯肼、异烟肼、氨基脲、苯肼等甲酮基-孕激素特征反应第17位的甲酮基和亚硝基铁氰化钠作用,形成蓝紫色的络合物黄体酮黄体酮蓝紫色蓝紫色亚硝基铁氰化纳亚硝基铁氰化纳其他甾体其他甾体淡橙色淡橙色不显色不显色n乙炔基白炔雌醇酚羟基：红色偶红色偶氮染料氮染料重氮苯磺酸重氮苯磺酸雌激素雌激素类药物类药物有机氟F有机破坏有机氯Cl茜素氟蓝 硝酸亚铈硝酸硝酸银AgCl 呈色 (蓝紫色) 氧瓶燃烧 有机卤素丙酸氯倍他索香香水解产物的反应水解产物的反应特臭特臭特臭特臭KOHKOH 二制备衍生物测定m.p.n代表药物有：可的松氢化可的松黄体酮雌二醇炔雌醇甲睾酮丙酸睾酮三、薄层色谱法TLCTLC法法 主要用于甾体激素类药物主要用于甾体激素类药物制剂的鉴别制剂的鉴别方法：对照品法方法：对照品法 要求供试品溶液所显主斑点的要求供试品溶液所显主斑点的颜色颜色和和位置位置与对照品溶液的主斑点与对照品溶液的主斑点相同。

相同33003000cm-130002700cm-119001650cm-116501450cm-1四、红外光谱法 IR 法中国药典上收载的甾体激素类药物均有红外光谱图37503300cm-1醋酸可的松醋酸可的松结构特征结构特征：4 433酮、酮、C C17 17 OHOHC C20 20 酮基、酮基、 C C11 11 酮基酮基醋酸酯醋酸酯醋酸酯,C20酮,C11酮基,43酮基结构特征：酚羟基、C17 OH C17 乙炔基炔雌醇一、有关物质TLC（多采用自身稀释对照法， 已经介绍） HPLC（可与含量测定同时进行）（合成起始物、中间体、副产物、降解产物）第三节杂质检查硒硒二、二、来源来源 合成中用合成中用二氧化硒二氧化硒(SeO(SeO2 2) )脱氢脱氢剧毒剧毒原理原理方法方法三、有机溶剂残留量(甲醇和丙酮) 气相色谱法四、游离磷酸 原理：第四节含量测定一、紫外分光光度法1原理 “C=C-C=C”或“C=C-C=O”共轭体系，有紫外吸收4-3-酮结构，max在240nmA环为苯环，max在280nm 2讨论前提是原料药中“其它甾体”必须合格，否则，不适用需进行分离后再测定如炔孕酮 测定制剂时，赋形剂在240nm附近有吸收需经前处理后测定。

如醋酸地塞米松片,氢化可的松片和注射液,醋酸可的松片和注射液,醋酸泼尼松片,甲睾酮片,醋酸甲地孕酮片,炔雌醇片,炔诺酮片习题：醋酸氢化可的松滴眼液的含量测定方法如下：取本品，摇匀，精密量取2ml，置100ml量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀；精密量取10ml，置另一100ml量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，在241nm波 长 处 测 得 吸 收度A=0.408，求醋酸氢化可的松的标示百分含量已知：醋酸氢化可的松的吸收系数E1%1cm =395；本品规格为3ml15mg . (103.3%)n二.四氮唑比色法n 1四氮唑盐的种类：（1）红四氮唑：2,3,5三苯基氯化四氮唑2,3,5triphenyltetrazoliumchloride）缩写TTC或RT（Redtetrazolium）还原产物为不溶于水的深红色三苯甲（2）蓝四氮唑：3,3二甲氧苯基双4，4（3,5二苯基）氯化四氮唑3,3-dianisole-bis4,4-(3,5-diphenyl)triphenyltetrazoliumchloride缩写BT(Bluetetrazolium)，还原产物为暗兰色的双甲，n2原理 17位-醇酮基具有还原性，在碱性条件下能将四氮唑盐定量地为有色的甲 ，在一定波长下具有最大吸收，可用比色法进行含量测定OH OH - - 还原还原 3、测定法nATTC法:BP;Ch.PnBBT法:USP暗处放置40-45min4、讨论结构溶剂和水分碱种类和加入顺序空气中氧和光线反应温度和时间反应速度呈色强度和稳定性4、讨论（1）官能团位置的影响 a C11： 11位酮基反应速度快于11位羟基 可的松氢化可的松bC21：-羟基（C21-OH） 21-OH酯化后，较母体羟基反应速度慢即：游离体酯类如：可的松醋酸可的松简单酯复杂酯，醋酸酯磷酸酯琥珀酸酯三甲基醋酸酯n（2）溶剂和水分的影响：na常用无水乙醇含水量5%，对结果无影响含水量为10%，吸收度约降低10%含水量为30%，反应完全受到抑制nb用无醛醇醇中不能含有醛类醛有还原性，使吸收度（3）试剂质量及加入顺序 a.灵敏度：BTTTC；BT：淡黄色，空白值高，稳定性差；TTC：无色，空白值较低，稳定性好.USP规定：BT：极淡黄色，空白A值与乙醇比较0.030.06 b.加入顺序：先加TTC或BT，后加(CH3)4N+OH-原因：醇酮基与(CH3)4N+OH-长时间接触，有部分分解。

Ch.P:氢化可的松软膏,醋酸地塞米松注射液,醋酸可的松眼膏,醋酸泼尼松眼膏,醋酸泼尼松龙注射液 n（4）氧及光线的影响 对光敏感，在暗处显色TTC法形成的甲对空气中氧敏感，使颜色强度，稳定性BP规定：加入试剂后，要往容器中充N2，以置换反应容器中的空气n（5）液性： 必要条件：强碱性 以(CH3)4N+OH-结果较满意 （6）温度与时间一般室温或30 Ch.P:25，暗处反应40-45min三.异烟肼法1原理: C3酮基及某些其他位置上的酮基能与羰基试剂异烟肼在酸性条件下形成黄色异烟腙，在一定波长下具有最大吸收，可用于定量max420nm 2、反应条件（1）溶剂：无水乙醇，无水甲醇（2）酸的种类、浓度及异烟肼的浓度常用HClHCl：异烟肼=2M:1M时，获最大吸收度 HCl浓度：0.0074mol/L （1000ml醇中含0.625mol浓HCl）异烟肼浓度：0.0365mol/L (0.5mg/ml)（3）水分、O2与光线的影响 甾体激素与异烟肼的缩合反应为可逆反应，所以含水量升高可促使反应逆转而水解，使吸收度降低(H2OA） 含水量含水量腙水解腙水解A%A%具塞玻璃容器中,光线和氧影响不大温度温度(4)(4)t t 3、反应的专属性 在该反应条件下,对43酮具有一定的专属性 C20酮基反应慢， C17酮基反应慢； C11酮基不反应 43酮：室温下，30反应完全。

如：醋酸地塞米松软膏 四.kober反应及铁一酚试剂比色法1、Kober反应： 指雌激素与硫酸乙醇共热呈色，用水或稀硫酸稀释后，重新加热发生颜色改变，并在515nm附近有最大吸收的反应特征反应） n改进方法：n2铁酚试剂法铁酚试剂的组成硫酸亚铁铵浓硫酸过氧化氢苯酚浓硫酸和过氧化氢的作用n浓硫酸和过氧化氢将2价铁氧化成3价铁三价铁的作用能够加快黄色生成的速度能促进黄色向红色的转变能增加红色的稳定性苯酚的作用n可消除反应产生的荧光n能够促进红色的生成白五 硝酸银一NaOH滴定法+HNO3+NaOH滴定，同时做空白 六 非水溶液滴定法HClO4滴定，同时做空白米非司酮, C10位为七 HPLC法广泛用于此类药物原料和制剂的含量测定一般为内标法掌握甾体激素类药物的基本结构与分类；各类药物的结构特征及其与分析方法的关系熟悉甾体激素类药物的紫外分光光度法、四氮唑比色法和异烟肼比色法；柯柏反应比色法 了解 甾体激素类药物的特殊杂质及其检查方法基本要求1 1 甾体激素类药物的结构中能和四氮甾体激素类药物的结构中能和四氮唑盐发生显色反应的基团唑盐发生显色反应的基团 A. A. 酚羟基酚羟基 B. B. 活泼次甲基活泼次甲基 C. C. 甲酮基甲酮基 D. CD. C17 17 - -醇酮基醇酮基 E. E. 酮基酮基D问题问题2 25 5 A A维生素维生素B1 BB1 B醋酸地塞米松醋酸地塞米松 C C两者皆是两者皆是 D D两者皆不是两者皆不是 2. 2. 异烟肼比色法异烟肼比色法 3. 3. 硫色素反应硫色素反应 4. 4. 紫外分光光度法紫外分光光度法 5. 5. 绿奎宁（绿奎宁（ThaciaquinThaciaquin）反应）反应B BA AC CD D 6.6.可用于氢化可的松鉴别的试剂有可用于氢化可的松鉴别的试剂有 A A氨制硝酸银氨制硝酸银 B B异烟肼异烟肼 C C红四氮唑红四氮唑 D D硫酸硫酸 E E重氮苯磺酸重氮苯磺酸ABCD7 7 可用于甾体激体类药物的测定方可用于甾体激体类药物的测定方 法有法有 A A高效液相色谱法高效液相色谱法 B B四氮唑盐法四氮唑盐法 C C紫外分光光度法紫外分光光度法 D D异烟肼比色法异烟肼比色法 E EKoberKober反应比色法反应比色法ABCDE8. 8. 能与亚硝基铁氰化钠反应生成兰能与亚硝基铁氰化钠反应生成兰紫色的药物是紫色的药物是 A A雌二醇雌二醇 B B黄体酮黄体酮 C C醋酸可的松醋酸可的松 D D苯丙酸诺龙苯丙酸诺龙 E E以上都不对以上都不对B9. 。