PBS缓冲液配制精编版.docx

PBS缓冲液配制0.01M磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法称取8gNaCl、0.2gKCl、1.44gNa2HPO4和0.24gKH2PO4,溶于800ml蒸储水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸储水定容至1L即可在15lbf/in2（1034M05Pa）高压下蒸气灭菌（至少20分钟），保存存于室温或4c冰箱中需要注意的是，通常所说的浓度0.01M指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na离子或K离子的浓度，Na离子和K离子只是用来调节渗透压的如果是用于免疫组化的话，则需要在配置的时候分别加入100u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒NaCl8.0g;KCl0.2g;Na2HPO41.44g;KH2PO40.24g;力口蒸储水至1000ml,调节pH到7.4（用Na2HPO4或KH2PO4调节）用于免疫反应时可加入0.1%叠氮钠（0.1g/100mlPBS）;当试剂中含有辣根过氧化物酶时，严禁使用叠氮钠，可改用0.01%柳硫汞PBS缓冲液配方PHH2ONaCl7.610008.5Na2HPO4 2.2NaH2PO4 0.17.410008.52.20.27.210008.52.20.37.010008.52.20.4根据经验来看，新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在7.2-7.4之间，可是在温度的影响下，尤其在夏天，其电离常数发生了改变，在经过昼夜的时间后，PH值会明显改变（我亲自测过偏酸）。

所以做实验的同学可要注意了，PH值可能会影响实验结果，甚至可能导致阴性所以务必记得这个时候和天气，要加强实验条件控制问题每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS,如果发生偏酸或偏碱，注意重新换新液PBS缓冲液称取NaCl8g,KCl0.2g,Na2HPO4?12H2O3.63g,KH2PO40.24g,溶于900ml双蒸水中，用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用PBST缓冲液取300口Tween-20加入PBS100ml中，混匀后即刻使用现用现配如果是把所有固体加大十倍，配置为浓缩液，工作时候十倍稀释，那么，在刚配好浓缩液时，PH在6.5左右，明显偏酸不能用盐酸调虽然可以用氢氧化钠颗粒调，但是有更方便的方法十倍稀释以后，PH自动升高到所需要的值不需要其它任何处理这个可以先取少量试一试，配好之后再测一次~PH8.0的PBS配方详细1 .NaCl137mmol/L,KCl2.7mmol/L,Na2HPO44.3mmol/L,KH2PO41.4mmol/L2 .向烧杯中加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解3 .滴加浓盐酸将pH值调节至8.0,然后加入去离子水将溶液定容至1L。

4 .[Wj温[Wj压火菌后，室温保存注意：上述PBSBuffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充1mMCaCl2和0.5mMMgCl20.05mol/LPBS（磷酸缓冲液PhosphateBufferSolution,PBS）的配制：甲液：0.05mol/LNa2HPO4溶液：称取磷酸氢二钠9.465g7.099g,加蒸储水至1000ml;乙液：0.05mol/LKH2P04溶液：称取磷酸二氢钾，9.07g6.803g,加蒸储水至1000m1将甲乙液分装在棕色瓶内，于4c冰箱中保存，用时甲、乙两液各按不同比例混合，即可得所需pH的缓冲液，见下表：pH甲液ml乙液mI5.292.597.55.595.095.05.9110.090.06.2420.080.06.4730.070.06.6440.060.06.8150.050.06.9860.040.07.1770.030.07.3880.020.07.7390.010.08.0495.05.0你要配制pH=6.8的PBS,可用甲、乙液各50ml混合即可。