高效液相色谱法测丹参酮含量.docx

高效液相色谱测定丹参酮II A含量【原理】利用各组分在两相中的分配系数的不同而获得分离仪器与试剂】1.仪器：液相色谱仪；微量注射器；C18反相色谱柱；棕色瓶(25ml, 50ml)；吸量管(2ml)；超神提取器2. 试剂：甲醇(色谱纯)；蒸馏水3•试药：丹参酮IIA对照品，单身药材实验内容】 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇 - 水(73： 27)为流动相；检测波长为270 nm，理论塔板数按丹参酮IIA峰计算应 不低于 2000.对照品溶液的制备 取丹参酮IIA对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中， 加甲醇制成每1ml含16.25ug的溶液，即得供试品溶液的制备 取本品 20 片，精密称定，研细，精密称定，置具塞棕色瓶中，精密加入甲醇100 ml，密塞，称定重量，超声处理15分钟，放冷，再 称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，置棕色瓶中，即得测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪， 测定，即得实验数据及处理】运用外标法定量分析，分别精密量取一定量的对照品和试样，分别进样相同 体积的对照品溶液和试样溶液，在完全相同的色谱条件下进行色谱分析，测的 峰面积，用下式可以计算出供试品的浓度。

C /C =A /A => C = (A /A )*C 供 对 供 对 供 供 对 对20片总重量：0. 6025gC =16.25 u g/ml对A =2999.47 (mv/sec)供A =1088.09 (mv/sec)对C =(A /A )*C供 供 对 对=(2999. 47/1088. 09)*16. 25=44.80u g/mlW (%) = (Mm /M”)X100%丹参酮IIA 药材=(44.80 X 10-6g/0・6025g ) X100%=0.744%20片复方丹参片中含丹参酮II A量：4・48mg 每片含丹参酮II A量：0. 224mg。