二氧化碳固定.ppt

第二节 二氧化碳固定,1945年美国的,Calvin M,等人利用单细胞小球藻作为实验材料，应用,14,C,示踪技术和双向纸层析法，经过十年的研究揭示了光合作用暗反应阶段碳素同化及受体再生的循环途径，因此称为卡尔文循环（,Calvin,Benson,cycle）由于途径中的最初产物是三碳化合物（3-磷酸甘油酸），故也称作,C,3,途径10.1.3,卡尔文循环（,C,3,途径）,10.1.3.1,CO,2,的固定,整个循环可分为三个阶段：(1),CO,2,固定,CO,2,的固定（,CO,2,fixation），,即游离的,CO,2,经酶促反应转变为有机物分子中的羧基,也称作,CO,2,的羧化（,carboxylation）CO,2,的受体是核酮糖-1,5-二磷酸（,ribulose,-1,5-,bisphosphate,，,RuBP,），,催化此反应的酶是核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶（,ribulose,-1,5-,bisphosphate,carboxylase/,oxygenase,，,Rubisco,）10.1.3.1,CO,2,的固定,整个循环可分为三个阶段：(1),CO,2,固定,上述反应在夜间或黑暗条件下受阻,CO,2,的固定反应是卡尔文循环的限速步骤。

其关键酶,Rubisco,是个双功能的酶它的活性中心有两种功能：既可以催化上述羧化反应，又可以催化加氧反应（在光呼吸中）该酶位于叶绿体基质中，约占叶子可溶性蛋白的50%，是植物中含量最丰富的酶10.1.3.1,CO,2,的固定,Rubisco,活性中心受,CO,2,和,Mg,2+,以及,ATP,的活化酶的最适,pH8已知底物,RuBP,与,Rubisco,结合较牢，反而降低了羧化反应的速度，在,Rubisco,激活酶（,Rubisco activase,）,的调节下，可以促进,RuBP,的释放，活化了,Rubisco,活化过程 中,Rubisco,激活酶需要,ATP，,因,ATP,来自于光反应，所以光是,Rubisco,的间接激活剂这一阶段包括两步反应：（1）在磷酸甘油酸激酶催化下，发生高能键的转移，产生1，3-二磷酸甘油酸（,BPG）；,（2）,在磷酸甘油醛脱氢酶的催化下，还原产生3-磷酸甘油醛（,G3P）第二步酶是光调节酶反应中消耗的,ATP,和,NADPH,来自于前面介绍的光合作用光反应所产生的化学能和还原力10.1.3.2,羧化产物的还原,在磷酸丙糖异构酶的催化下，3-磷酸甘油醛（,G3P）,异构为磷酸二羟丙酮（,DHAP）；,接着在醛缩酶的催化下，缩合成果糖-1,6-二磷酸（,FBP）；,然后在光调节酶：果糖-1,6-二磷酸酶（,fructose-1,6-,bisphosphatase,FBPase,）,的催化下，水解去掉一个磷酸基团，变为果糖-6-磷酸（,F6P）；,再经磷酸葡萄糖异构酶催化，就变为葡糖-6-磷酸（,G6P）,10.1.3.3,受体的再生,10.1.3.3,受体的再生,磷酸丙糖是代谢中的一个转折点，除了参与卡尔文循环中的反应外，还有其它去路：转化为淀粉，作为植物贮存形式备用；外运到细胞质中先形成蔗糖，再转移到植物生长的区域；在发育的叶片中，相当一部分磷酸丙糖转移到细胞质，进入糖酵解、,TCA,循环等途径为生物供能。

10.1.3.3,受体的再生,10.1.3.3,受体的再生,醛缩酶还可将上述反应产生的4-磷酸赤藓糖与磷酸二羟丙酮缩合，形成七碳糖：景天庚酮糖-1,7-二磷酸（,SBP）在景天庚酮糖二磷酸酶（,sedoheptulose bisphosphatase,，,SBPase,）,的作用下，,SBP,被水解，去除一个磷酰基，成为景天庚酮糖-7-磷酸（,S7P）此水解酶是光调节酶，也是植物中特有的酶,10.1.3.3,受体的再生,10.1.3.3,受体的再生,10.1.3.3,受体的再生,转羟乙醛酶还可以催化酮糖供体“景天庚酮糖-7-磷酸”将羟乙醛基转移给醛糖受体“3-磷酸甘油醛”，产生5-磷酸核糖（,R5P）,和5-磷酸木酮糖（,Xu5P）10.1.3.3,受体的再生,再经两种异构酶催化，可发生五碳糖的转变，其共同的目标是形成5-磷酸核酮糖（,Ru5P）Xu5P,经磷酸核酮糖差向异构酶催化，,C3,上羟基位置的改变，就可以变成,Ru5P10.1.3.3,受体的再生,R5P,经磷酸核糖异构酶催化，醛糖就可以变成酮糖,Ru5P,10.1.3.3,受体的再生,最后在磷酸核酮糖激酶（,phosphoribulose,kinase）,催化下,消耗1,ATP,产生1,5-二磷酸核酮糖（,RuBP,），,完成了受体的再生。

Rubisco,*,；,磷酸甘油酸激酶；,磷酸甘油醛脱氢酶,*,；,磷酸丙糖异构酶；,醛缩酶；,FBPase,*,；,磷酸葡糖异构酶；,磷酸葡糖酶；,转羟乙醛酶；,醛缩酶；,SBPase,*,；,转羟乙醛酶；,磷酸核酮糖差向异构酶；,磷酸核糖异构酶；,磷酸核酮糖激酶,*,10.1.3.3,受体的再生,总反应式,光合作用的卡尔文循环中，每同化一分子,CO,2,，,需要消耗三分子,ATP,和二分子的,NADPH,或,在这样的弱碱性条件下，,Rubisco,，,磷酸甘油醛脱氢酶，,FBPase,，,SBPase,，,磷酸核酮糖激酶这些卡尔文循环关键酶均有激活作用,10.1.3.4,卡尔文循环调节,（,C,3,途径）,C,4,途径,是一种在光合作用中与卡尔文循环有一定联系的辅助途径该途径的作用是固定、浓缩和转运,CO,2,到,C,3,途径所在的维管束鞘细胞中，使其中的,CO,2,浓度升高，提高其光合作用速率因,CO,2,固定最初产物是四碳二羧酸，固称为,C,4,途径通过,C,4,途径固定、同化,CO,2,的植物，简称为,C,4,植物，如玉米、甘蔗、高粱、苋菜、狼尾草、黍等10.1.4,C,4,途径,C,3,植物与,C,4,植物光合作用的差异在于暗反应阶段：,C,3,植物的,CO,2,固定及碳素同化途径均在叶肉细胞的叶绿体中进行。

C,4,植物的,CO,2,固定先在靠近叶表面的叶肉细胞中进行，然后经,C,4,途径的四碳二羧酸的转移，把,CO,2,运输到叶片内部维管束鞘细胞的叶绿体中，再进行卡尔文循环可见,C,4,植物碳同化过程应包括,C,4,途径和,C,3,途径10.1.4.1,C,4,途径与,C,3,途径的关系,10.1.4.1,C,4,途径与,C,3,途径的关系,C,4,途径将,CO,2,和,Rubisco,从,氧含量较高的叶片表面转移到氧浓度较低的内部维管束鞘细胞之中，再进行,CO,2,的固定反应其转移的目的是避免,Rubisco,发生另一种浪费资源的加氧反应热带禾本科植物采用,C,4,途径的原因之一是克服了高温条件下,CO,2,和,Rubisco,的亲和力的下降10.1.4.1,C,4,途径与,C,3,途径的关系,C,4,途径,CO,2,的最初受体是一种三碳化合物磷酸烯醇式丙酮酸（,PEP），,在,PEP,羧化酶催化下，固定,CO,2,，,生成草酰乙酸（,OAA）,10.1.4.2,C,4,途径中主要的酶促反应,这个反应在叶肉细胞质中进行PEP,羧化酶对,CO,2,的亲和力很强，其,Km7,mol/L，,而此时的,Rubisco,的,Km450,mol/L。

PEP,羧化酶从高,O,2,低,CO,2,的叶肉中固定,CO,2,，,为,CO,2,的转移、同化奠定了基础PEP,羧化酶是一种调节酶，被,CO,2,固定的反应产物,OAA,所抑制，受,EMP,途径中的葡萄糖-6-磷酸（,G6P）,的活化该酶遇到光也活化，视作光合作用的酶10.1.4.2,C,4,途径中主要的酶促反应,在叶肉细胞的叶绿体中，经,NADP-,苹果酸脱氢酶催化，转变为苹果酸10.1.4.2,C,4,途径中主要的酶促反应,在叶肉细胞质内，由谷草转氨酶催化，转变为天冬氨酸,10.1.4.2,C,4,途径中主要的酶促反应,上述苹果酸或天冬氨酸均能够从叶肉细胞转移到维管束鞘细胞中这些四碳二羧酸起着,CO,2,携带体的作用在维管束鞘细胞中，它们发生脱羧反应，放出,CO,2,，,以利于,CO,2,进入卡尔文循环，再参与糖的合成脱羧反应因植物不同；也相应有差异，主要有三种形式：,10.1.4.2,C,4,途径中主要的酶促反应,在维管束鞘细胞的叶绿体中，经,NADP-,苹果酸酶催化，氧化脱羧变为丙酮酸属于这类的植物是玉米、甘蔗、高粱等10.1.4.2,C,4,途径中主要的酶促反应,在维管束鞘线粒体中，经,NAD-,苹果酸酶作用，氧化脱羧，形成丙酮酸。

10.1.4.2,C,4,途径中主要的酶促反应,脱羧后，形成的丙酮酸先经转氨酶作用变为,丙氨酸,，从维管束鞘细胞转移到叶肉细胞的叶绿体中，再经转氨酶作用又转变回,丙酮酸,，然后通过,丙酮酸磷酸双激酶（,pyruvate phosphate,dikinase,）,的催化才转变成,PEP，,完成,C,4,途径受体的再生10.1.4.2,C,4,途径中主要的酶促反应,葡萄糖异生作用（,gluconeogenesis,）,是指以非糖有机物作为前体合成为葡萄糖的过程这是植物、动物体内一种重要的单糖合成途径非糖物质包括乳酸、丙酮酸、甘油、草酰乙酸、乙酰,CoA,以及生糖氨基酸（如丙氨酸）等植物果实成熟期间，有机酸含量下降，糖份含量增加，就是葡糖异生作用的结果动物机体内葡萄糖异生作用是必不可少的它对维持血糖浓度的恒定，为大脑、肌肉、眼晶状体、中枢神经系统等组织利用葡糖分解供能提供了保障10.2,糖异生作用,葡萄糖异生途径几乎是,EMP,途径的逆转，但要绕过,EMP,途径三处不可逆反应，采用葡萄糖异生作用特有的酶催化、转移，才能完成非糖有机物合成为葡萄糖的过程葡萄糖异生途径三处迂回路径是:,10.2.1,葡萄糖异生途径,(1)丙酮酸,磷酸烯醇式丙酮酸,10.2.1,葡萄糖异生途径,(2)果糖,1,6-二磷酸,果糖-6-磷酸,10.2.1,葡萄糖异生途径,(3)葡萄糖-6-磷酸,葡萄糖,10.2.1,葡萄糖异生途径,10.3.1,糖核苷酸的作用,10.3,蔗糖和多糖的生物合成,在高等植物、动物体内，游离的单糖不能参与双糖和多糖的合成反应，延长反应中提供的单糖基必须是活化的糖供体，这种活化的糖是一类糖核苷酸，即糖与核苷酸结合的化合物。

糖核苷酸的作用是作为双糖或多糖，甚至是糖蛋白等复合糖合成过程中参与延长单糖基的活化形式或供体最早发现的糖核苷酸是,尿苷二磷酸葡萄糖（,uridine diphosphate,glucose,UDPG）,10.3,蔗糖和多糖的生物合成,UDPG,结构式,10.3,蔗糖和多糖的生物合成,UDPG,合成,反应,10.3.2,蔗糖的生物合成,该途径存在于光合组织的细胞质中被认为是植物合成蔗糖的主要途径磷酸蔗糖合酶（,sucrose phosphate synthase）,属于转移酶类它利用,UDPG,作为葡萄糖的供体，以,F6P,为葡萄糖的受体，反应产物是蔗糖-6-磷酸；再通过磷酸蔗糖酶水解，脱去磷酸基团而生成蔗糖1),磷酸蔗糖合酶途径,(1),磷酸蔗糖合酶途径,10.3.2,蔗糖的生物合成,在非光合组织中蔗糖合酶（,sucrose synthase）,活性较高蔗糖合酶也属于转移酶类，可催化糖基转移2)蔗糖合酶途径,10.3.3,淀粉和糖原,的生物合成,淀粉合酶（,starch synthase,）,10.3.3.1 直链淀粉的生物合成,式中；引物的,n3；,活化的葡糖基从引物的非还原端延长；淀粉合酶催化连接的键是,-1，4糖苷键。

10.3.3,淀粉和糖原,的生物合成,D,酶,10.3.3.1 直链淀粉的生物合成,D,酶是一种糖苷基转移酶，作用的键是,-1，4,糖苷键；转移的基团主要是麦芽糖残基；催化的底物可以是葡萄糖、麦芽多糖；起着加成反。