过氧化氢催化荧光法测定维生素c.doc

化学工程与现代材料学院2015届本科毕业论文过氧化氢催化荧光法测定维生素C 专 业 化 学 姓 名 张满强 学 号 11043114 指 导 教 师 刘萍 完 成 时 间 2014.06 陕西 商洛独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包括其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得商洛学院或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意学位论文作者签名： 日期： 年 月 日关于论文使用授权的说明本人完全了解商洛学院有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。

□公开 □保密（____年____月） (保密的学位论文在解密后应遵守此协议)签名： 导师签名： 日期： 年 月 日 过氧化氢催化荧光法测定维生素C化学专业 张满强 指导教师 刘萍摘要：维生素C也称抗坏血酸，它是动物和人体生命活动必须的一种物质，当机体从外界摄取的维生素C不能满足其生命活动的需要或摄入的量超过人体吸收的最大能力，就会引起新陈代谢功能的紊乱甚至死亡因此探究一种简单、灵灵敏的、快速的维生素C测定方法具有重要意义本论文利用在PH为6.8的磷酸介质中（由氢氧化钠和磷酸二氢钾配置），70℃水浴加热12min，维生素C对过氧化氢氧化二氯荧光素的反应具有显著地催化作用，由此建立了催化动力学荧光法测定维生素C的新方法探讨了该催化反应的较优试验条件并测定了动力学参数，在最佳条件下，非催化体系荧光强度F与催化体系荧光强度F之间的差值△F与维生素C浓度在0.13～2.4 mg/L范围内呈良好的线性关系，方法的检出限为0.78 mg/L，反应为零级反应，表观速率常数为3.5×10-4 mol/L·s-1。

表观活化能为Ea = 47.31 kJ/mol该方法灵敏度高、仪器简单关键词：催化荧光法；过氧化氢；二氯荧光素；维生素CIDetermination of vitamin C by hydrogen peroxide catalytic fluorimetryChemistry Specility ZhangManqiang Tutor LiuPingAbstract:Vitamin C also known as ascorbic acid, it is the activities of animal and human life must be a substance, when the body from outside the uptake of vitamin C can not meet the need or intake amount exceeds the human body absorption maximum capacity, it will cause metabolic disorders and even death. Therefore, to explore a simple, sensitive, rapid Lingling vitamin C determination method has important significance. At pH 6.8 phosphate medium (by sodium hydroxide and potassium dihydrogen phosphate configuration), 70℃ water bath heating 12min, the reaction of vitamin C on the hydrogen peroxide oxidation of dichlorofluorescein has significant catalytic effect, which resulted in the establishment of the Catalytic Kinetic Spectrofluorimetric Determination of Vitamin vitamin C of the new method by this thesis. Discusses the optimized experimental conditions for the catalytic reaction and kinetic parameters were determined. Under the optimum conditions, the non catalytic fluorescence intensity of the system f and catalytic fluorescence intensity of the system f between difference delta f and the concentration of vitamin C in 0 ~ 9.024 mg / L﹡range showed a good linear relationship, the method detection limit was 0.78 mg / L, and the reaction is zero order reaction, the apparent rate constant is 3.5× 10-4 mol / L - s-1. The apparent activation energy of Ea = 47.31 kJ/mol. The method has high sensitivity, simple apparatus. Key words:Catalytic Fluorescence Method; Hydrogen peroxide; Two dichlorofluorescein ; vitamin CII目 录摘要 I关键词 IAbstract IIKey words II1 绪 论 11.1 催化动力学荧光法简介 11.2 维生素C简介 11.3 目前测定维生素C的方法 21.4 目前利用二氯荧光素测定的物质 42 试验部分 52.1 引言 52.2 主要仪器及试剂 52.3 溶液的配制 62.4 试验方法 63 结果与讨论 73.1 荧光曲线 73.1 条件优化 73.3正交试验 143.4 工作曲线和检出限 153.5干扰试验 163.6样品分析 164 结 论 17参考文献 18致 谢 201 绪 论1.1 催化荧光动力学分析法简介荧光动力学分析始于50年代,它是基于化学反应的速率与反应物的浓度有关,在某些情况下还与催化剂、活化剂、阻化剂或解阻剂的浓度有关,因而,可通过应用荧光法来监测反应速率从而对待测物进行检测,该法也称为荧光速率法。

催化荧光动力学分析法是荧光动力学分析法的主要类型,我们将这类方法分为由无机物、有机物、酶催化3类方法催化荧光法基于催化反应来检测物质含量,由于测量对象并非待测物本身,而是经“化学放大”了的其它物质,因而检测灵敏度很高,检测限可达ng甚至pg级近年来分析仪器日趋自动化,使得催化荧光动力学分析呈现许多新的特点,其中最为突出的是与流动及停流注射技术的结合使其时间精度、实验条件控制和实验自动化程度得以提高;且催化荧光动力学分析自身也涌现出一些新技术如激光诱导荧光分析、时间分辨荧光分析等,以及一些新应用如应用于生物反应器控制、药物监测和生物分析等方面Mottola，Crouch等 均阐述了动力学在分析化学中 的重要作用及发展Valcárcel等探讨了荧光动力学分析法在无机分析中的应用Kawas等则对流动注射和停流技术在催化动力学分析中的应用进行了评述 1.2 维生素C简介1.2.1理化性质维生素C（又称抗坏血酸）分子式为C6H8O6是一种含有6个碳原子的酸性多羟基化合物，熔点在190℃～192℃，分子量为176.1无色晶体易溶于水不溶于有机溶剂，在酸性条件下稳定存在遇空气中氧、热、光、等碱性物质，特别是由氧化酶及痕量金属离子存在时，可促进其氧化破坏。

因此维生素C应该避光、避热保存1.1.2生理作用 （1）维生素C进入人体后可促进抗体的形成，提高白细胞的吞噬能力增强人体对疾病的抵抗力和对寒冷的耐受能力，进而增强人体的免疫力2）预防缺铁性贫血食物中铁存在的离子形式包括Fe2+和Fe3+两种，而人体能够吸收的只有 Fe2+铁是合成血红细胞的重要材料，人体缺铁可患缺铁性贫血症（IDA），又称营养性贫血维生素C具有较强的还原性，它可将食物中的Fe3+还原成Fe2+，促进食物中铁在肠道内的吸收，有利于预防缺铁性贫血（IDA）3）预防和治疗坏血病坏血病又称维生素C缺乏症维生素C是胶原蛋白形成所必需的，它有助于保持间质物质的完整，如结缔组织，骨样组织以及牙本质严重缺乏可引起坏血病，这是一种急性或慢性疾病，特征为出血，类骨质及牙本质形成异常儿童主要表现为骨发育障碍，肢体肿痛，假性瘫痪，皮下出血成人表现为齿龈肿胀、出血，皮下瘀点，关节及肌肉疼痛，毛囊角化等因此保证膳食中维生素C的足量供应，有利于预防和治疗坏血病4）抗衰老科学实验证明，自由基和过氧化脂质是人体衰老的重要诱因充足的维生素 C 可抑制体内自由基、过氧化脂质等有害物质的形成，从而延缓人体的衰老。

1.3 目前测定维生素C的方法1.3.1光度法(1)分光光度法分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸光度或发光强度，对该物质进行定性和定量分析的方法赵兴红等用邻二氮菲-铁比色法测定维生素C,谢全彪等利用分光光度法同时测定食品中的维生素C和山梨酸,都取得较好的结果比较常用的分光光度法是维生素C的二氯靛酚分光光度法;An-war提出的新分光光度法,该法基于在邻二氮菲存在下,于pH=5.5用维生素C将Fe3+还原成Fe2+于515 nm测其吸光度,线性响应为0.2～1.0ug/mL变异系数为0.96%2）动力学光度法动力学光度法是利用反应速度与物质浓度（反应物、产物等）之间的定量关系，测量与反应速度成比例的吸光度，计算出待测组分的浓度李建平等应用光度法催化动力学根据对氨基苯磺酸与亚硝酸根进行重氮化反应生成重氮盐,抗坏血酸对重氮盐的分解有催化作用测定维生素C片剂与荔枝晶中的抗坏血酸含量1.3.2电极法（1）碘离子选择电极法杨秀芳等应用电极法提出用碘离子选择电极测定维生素C与碘在乙醇溶液中发生氧化还原反应时定量释放出游离碘离子溶液中的电位以测定样品中Vc含量的方法2）聚中性红修饰电极法中性红是一种吩嗪类染料,能够在电极上发生电化学聚合。