临床基础检验学：红细胞及白细胞计数.ppt

•红细胞计数(red blood cell count，，RBC)•白细胞计数(white blood cell count，，WBC)一、细胞发育演变一、细胞发育演变红细胞红细胞/ /白细胞白细胞计数计数: :测定单位体积血液中细胞数量测定单位体积血液中细胞数量•血细胞分析依法仪器法•显微镜计数法手工法二、细胞计数定义二、细胞计数定义 【【RBC原理】原理】等渗稀释液将血液稀释一定倍数，充入计数池后，在显微镜下计数一定区域内的红细胞数量，换算求出每升血液中的红细胞数量 【WBC原理】用白细胞稀释液（醋酸）将血液稀释一定倍数，同时破坏红细胞，充入血细胞计数池，在显微镜下计数一定区域内的白细胞数量，经换算出每升血液中白细胞数量三、细胞计数原理三、细胞计数原理　　1.微量吸管：　　2.血细胞计数盘：改良Neubauer计数盘3.试剂 红细胞稀释液：Hayem液，NS，枸橼酸钠甲醛盐水等 白细胞稀释液：冰乙酸、结晶紫四、基本器材四、基本器材0.1mm0.1mm计数原则计数原则计数原则计数原则总原则：循一定方向总原则：循一定方向 压线细胞数上不数下压线细胞数上不数下 数左不数右数左不数右（（1 1）压单线细胞）压单线细胞（（2 2）压双线细胞）压双线细胞 ：以压外线为压线：以压外线为压线【试剂】【试剂】 红细胞稀释液：任选一种 1.Hayem稀释液：氯化钠1.0g、硫酸钠（含10个结晶水）5.0g，氯化高汞0.5g，蒸馏水加至200mL，过滤后使用。

氯化钠---调节渗透浓度 硫酸钠---提高比重防止红细胞粘连 氯化高汞---防腐剂，有毒2.柠檬酸盐甲醛盐水氯化钠 0.6g 调节渗透压柠檬酸钠 1.0g 调节渗透压，抗凝36%甲醛 1ml 防腐蒸馏水加至100ml，过滤2次后使用3.生理盐水或加1%甲醛的生理盐水五、细胞计数流程五、细胞计数流程【计算】 N/4×10 ×20 ×106/L=N /20N /20××10109 9=白细胞/L式中：在法定计量单位制中用△.△△×109/L表示 N：为4个大方格内白细胞总数 ÷4：为每大方格（即0.1μl）内白细胞平均数×10：1个大方格的容积为0.1μl，换算成1μl×20：血液的稀释倍数×106：将μl换算成L【报告方式】【报告方式】X.X X.X ×× 10109 9/L/L 镜下情况【方法学评价】方法方法 优优 点点 缺缺 点点显微镜法WHO参考方法简单，经济校准用基层单位和分散检测仪器复核费时吸管、计数板、分布及技术水平影响精密度和准确度较低分析仪法筛检方法高效、简便、易标准化，准确度和精密度高大规模普查昂贵人为因素干扰非病理因素干扰六、方法学评价六、方法学评价•血细胞计数误差的种类及消除方式血细胞计数误差的种类及消除方式误差种类 原 因误差减少方法技术误差采血部位不当避免凝固、溶血、组织液稀释倍数不准、混合不匀充液不当器材处理及使用不当细胞识别错误检测t、检测T、计数原则规范操作正确使用器材提高操作技能仪器误差器材（计数板、盖片、吸管等）不准确、不精密校正各种器材分布误差血细胞在计数池分布不均匀扩大细胞计数范围和（或）数量七、细胞计数质量保证七、细胞计数质量保证采血管、盖玻片白细胞数量（×109/L） 措施＜3扩大计数范围缩小稀释倍数＞30适当减少采血量增加稀释倍数【注意事项】【注意事项】1.挤压，针刺深度2.采血应顺利3.稀释倍数要准确（血量/稀释液量）4.压线细胞计数：数上不数下、数左不数右5.稀释液、小试管、计数板均清洁干燥6.充池一次完成，不能满溢、不足、有气泡7.每个中方格之间红细胞相差>20个要重新充池2次计数不超5%；各大格白细胞数相差8个以内。

8.有核红细胞对白细胞计数的干扰处理实际白细胞实际白细胞/L= 　　　　　　　　　　　　 ××校正前校正前WBC100100+有核红细胞数有核红细胞数1.RBC1.RBC  成年男性： (4～5.5)×1012/L成年女性： (3.5～5.0)×1012/L新生儿： (6.0～7.0)×1012/L医学决定水平：＞ 6.8×1012/L，＜ 3.5×1012/L2.WBC2.WBC成人：成人： （（4 4～～1010）） 10109 9/L/L新生儿新生儿：： （（1515～～2020）） 10109 9/L/L6 6月～月～2 2岁：岁：（（1111～～1212）） 10109 9/L/L八、细胞计数参考区间八、细胞计数参考区间 九、细胞计数临床意义九、细胞计数临床意义1.红细胞计数临床意义生理性变化 (1)年龄与性别的差异(2)精神因素(3)剧烈体力运动和劳动(4)气压降低(5)妊娠中、后期病理性变化 贫血：①丢失过多； ②红细胞寿命缩短； ③造血原料不足；④骨髓造血功能减退红细胞增多：①原发性红细胞增多；②继发性红细胞增多：引起低氧血症的疾病如心血管病、肺疾病、肾上腺皮质功能亢进（库欣病）等；③相对性红细胞增多:剧烈呕吐、严重腹泻、 大量流汗、大面积烧伤新生儿：新生儿：RBCRBC明显增高、两周后下降，明显增高、两周后下降，6-76-7岁最低岁最低 男性：男性：2525岁岁-35-35岁达高峰岁达高峰 女性：女性：1313岁岁-15-15岁达高值，岁达高值，2121岁岁-35-35岁低水平，以后渐增高岁低水平，以后渐增高 •关于血细胞计数误差来源,不属于技术误差的是取血部位不当稀释倍数不准充液不当计数域误差•取10μl血加至3.99ml红细胞稀释液中混匀,静置后滴入计数盘,计数中央大方格中10个中方格内红细胞数为500个,应报告红细胞数为2.50×1012/L5.00×1012/L6.25×1012/L10.00×1012/L病例分析•男，54 岁，反复发作的右上腹及剑突下疼痛史5年，本次无明显诱因上腹隐痛3天，伴发热38.6℃，全身乏力，不思饮食，恶心、无呕吐，尿色如浓茶。

查体：急性病容，咽部微红，扁桃体不肿大，皮肤巩膜未见明显黄染上腹部有轻度压痛，右侧为甚•实验室检查：感染科就诊，检查血常规WBC 18.6 x 109/L ，检验人员镜检白细胞分类时，发现镜下白细胞没有仪器法那么多，检验人员用手工方法给患者复查了白细胞，手工方法 WBC 6.2 X 109/L ，一个患者，一样的血液，得到了两个结果到底相信哪个结果？为什么？病例分析u肝病患者红细胞膜脂类异常/贫血/红细胞内含有大量的 sHb. Hb-CO;u溶血剂使红细胞溶解不完全造成白细胞计数假性增加;u血液分析仪计数的白细胞是加溶血素溶解红细胞后计数自细胞的;u本例因慢性肝脏疾病红细胞膜脂类物质增多，血液分析仪每次计数加溶血素是固定的，所以使红细胞溶解不完全，未溶解的红细胞按白细胞计数，所以使白细胞计数假性增高。