不同发育阶段小鼠的雌性生殖器官变化.docx

不同发育阶段的昆明小鼠的卵巢的形态学观察The morphological observation of the ovary of the Kunming mouses at the different development stages 摘要本实验选用不同年龄阶段的昆明小鼠，并对它们解剖，取其生殖器官，固定、逐级脱水、做组织切片，并用 HE 染色，显微镜观察比较不同年龄阶段小鼠卵巢内卵泡、黄体的变化实验观察表明三个月龄的小鼠的卵巢中出现生长卵泡、成熟卵泡及少量黄体，随发育阶段的不同，初级卵泡数量减少，黄体数量不断增加，到了产后阶段，发生明显变化，黄体量很多本实验支持小鼠的性成熟是在两个月到三个月之间的看法关键词：小鼠卵巢；组织切片；固定1.前言小鼠(Mus musculus)是最重要的哺乳动物发育生物学的研究模型，由于其胚胎发育过程与人类比较接近，可以作为很多人类疾病的动物模型而备受关注卵巢是雌性哺乳动物的生殖器官，具有排卵和分泌类固醇激素的功能 [1]，卵巢发育具有相当的复杂性与重大意义，迄今为止，其发育过程中还有许多机制和调控机理仍不甚明了本实验通过研究不同发育时期小鼠卵巢的基本结构，为正常小鼠的资源数据库提供资料，以便后人的继续研究。

2. 材料和方法本实验用的雌性昆明小鼠，购于山西医科大学实验动物中心，2015 年 4 月~5 月期间先后购买 4 只七日龄的小乳鼠，一个月、两个月、三个月、四个月、五个月、六个月、八个月以及产后的小鼠各 2 只我们将小鼠生殖器官取材，固定、经逐级酒精脱水、二甲苯透明、浸蜡、包埋、切片(6~8um) [2]HE 组织学常规染色，显微镜下观察，并作了显微测量3. 观察结果卵巢是产生卵子的器官，左右各一个，位于肾脏下方，颜色呈浅粉色或红色，质较韧硬，形似豆状，长度在 4mm 左右，其表面凸隆，性成熟后，由于卵泡的膨大和排卵后结瘢，致使其表面凹凸不平卵巢的大小、形状和颜色，因月龄不同而异输卵管是卵子受精及通过的管道，呈盘曲状，左右各一条，位于卵巢与子宫角之间，前段喇叭口朝向卵巢，后端紧接于子宫子宫为“Y”字形，分为子宫角、子宫体和子宫颈左右子宫会合于子宫颈末端，突出于阴道，形如小丘 解剖时我们对小鼠的体长、尾长以及生殖系统的颜色、生殖管和生殖腺的长度做了测量（参见表 1）：表 1 不同时期小鼠体长尾长Table 1Mouse body length and tail length at different developmentstages生殖管长度(mm) 生殖腺长度(mm)月龄 体长（mm） 尾长（mm）生殖器官（卵巢）颜色 左 右 左 右四个月 110 97 浅粉色 14 14 5 3.5五个月 100 101 浅红色 18 18 3 4六个月 102.5 96 浅粉色 15 15 5 3八个月 108 97 浅粉色 11 13 3 5产后 110 105 红色 18 15 3 2从测量结果可以看出，四个月后的小鼠体型大小基本不变，说明小鼠四个月后达到体成熟。

产后小鼠的生殖器官颜色及长度与产前小鼠比较发生了很大变化3.1 不同时期小鼠卵巢的切片原始卵泡位于皮质浅部，体积小，数量多，卵泡中央有一个初级卵母细胞，周围为单层扁平的卵泡细胞（又称颗粒细胞） 生长卵泡是卵巢的组织结构成分之一，分为：初级生长卵泡、次级生长卵泡两种初级生长卵泡有一层或多层立方形卵泡细胞次级生长卵泡卵泡细胞之间出现卵泡腔，卵泡细胞密集排列成数层，称为颗粒细胞层成熟卵泡是卵泡发育的最后阶段卵泡体积很大，并向卵巢表面突出成熟卵泡的卵泡腔很大，颗粒层甚薄，颗粒细胞也不再增殖卵泡的发育阶段：原始卵泡→生长卵泡→成熟卵泡当排卵后，卵泡的剩余部分就变为黄体，随后黄体逐渐形成白体实验用不同时期小鼠的卵巢切片在光学显微镜下拍的照片（见图 1，图 2，图 3）:图 1 两个月小鼠卵巢 10×10Figure 1 The ovary ofthetwo months mouse 图 2 四个月小鼠卵巢 10×10Figure 2 The ovary of the four months mouse初级卵泡成熟卵泡图图3产后小鼠的卵巢10×10Figure 3 The ovary of the postpartummice 3.2 不同时期小鼠卵巢变化将不同切片放在显微镜下观察比较，可以看出不同发育时期小鼠卵巢的变化（参见表 2）：表 2 不同发育时期小鼠卵巢的变化Table 2 Changes of mouse ovariesindifferent periods月龄 卵泡或黄体所在位置 特点一个月 观察不到 无两个月 初级卵泡在卵巢皮质的浅部 观察到基本为原始卵泡，卵 泡体积小，数量多三个月 卵泡移动到卵巢皮质较深的 部位观察到原始卵泡减少，出现一些生长卵泡、成熟卵泡及少量黄体，卵泡的总体数量在减少。

四个月 卵泡在卵巢皮质较深部位 观察到有少量原始卵泡，大量生长卵泡，一些成熟卵泡黄体和黄体，卵泡和黄体的总体数量在减少五个月 卵泡和黄体都在卵巢皮质深 部观察到少量原始卵泡，大量生长卵泡和成熟卵泡，黄体增多，卵泡和黄体的总体数量在减少六个月 卵泡和黄体都在卵巢皮质深 部观察到少量原始卵泡，生长卵泡，大量成熟卵泡，黄体增多，卵泡和黄体的总体数量减少八个月 卵泡和黄体都在卵巢皮质深 部观察到少量原始卵泡、生长卵泡和一些成熟卵泡，黄体出现很多，卵泡和黄体的总体数量减少产后黄体几乎占据卵巢绝大部分，卵泡被散落在卵巢皮质较小不同部位观察到少量原始卵泡、生长卵泡和成熟卵泡，有大量的黄体，出现白体，卵泡和黄体的总体数量非常少我们所观察到的切片中从第三个月小鼠的卵巢中出现些生长卵泡、成熟卵泡及少量黄体，随发育阶段的进展，初级卵泡不断减少，黄体不断增加，到了产后阶段，发生明显变化，除很少原始卵泡、生长卵泡和成熟卵泡外，有大量黄体存在，还有一些白体卵泡和黄体的位置也发生了一定变化，卵泡从开始皮质浅部移动到皮质深部后又被挤到了皮质较小部位而黄体则是从最初在卵巢中占很少位置，后来移动到皮质深部，几乎占据整个卵巢。

小鼠三个月时发生排卵，形成了黄体4. 讨论本实验研究的是不同发育阶段小鼠的雌性生殖系统中卵巢的形态学研究，观察卵巢中卵泡及黄体变化实验结果是小鼠的性成熟是发生在两个月到三个月月龄之间，与发育生物学 [3]中介绍说小鼠的性成熟是相符我们支持“小鼠的性成熟是在两个月到三个月之间”的看法卵泡的发育受多种激素的调控，例如 FSH（促卵泡激素）和 LH（促黄体生成素） ，这两种激素共同调控卵泡的生长发育 [4]，我们可以检测这两种激素在卵泡不同时期的含量，也可以探讨通过如何控制 Notch 信号通路来调控激素的含量，刺激卵泡的生长发育 [5]，进而研究这些激素的作用机制今后可以尝试认识激素替代物对卵泡生长发育的影响，也可以通过体外注射这些激素替代物来探索对小鼠的生殖发育的调控机制，以便通过导入激素替代物来调节卵泡发育，运用到人类不孕症的治疗参考文献[1] 罗阳小鼠卵巢不同发育阶段的转录组学研究.中南大学 [D]. 2012.05.[2] 芮菊生,杜懋琴,陈海明等 组织切片技术[M]. 人民教育出版社 .1980.11.[3] 桂建芳，易梅生发育生物学[M]. 科学出版社出版.2002.[4]高志华牛腔前卵泡体外无血清培养及超微结构研究[D].2003[5]姜晓龙 DAPT 阻断 Notch 信号通路对绵羊卵泡颗粒细胞功能的影响 [D].2015[6] 闫利平 Imp2 对大鼠卵泡发育影响的研究.曲阜师范大学 [D].2009.不同发育阶段的昆明小鼠的卵巢的形态学观察The morphological observation of the ovary of the Kunming mouses at the different development stages 赵艳艳，邱幼祥（Zhao yanyan, Qiu Youxiang）山西，吕梁，吕梁学院，生命科学系(Department of Life Science, Lvliang University, Lvliang, Shanxi, China )。