第04章--结晶分离及升华技术课件.ppt

4.14.1   沉淀分离法及盐析法沉淀分离法及盐析法沉沉淀淀法法：：在在试试样样中中加加入入沉沉淀淀剂剂或或改改变变pHpH值值，，使使所所需需的的组组分分溶溶解解度度减减小小或或者者与与沉沉淀淀剂剂形形成不溶物而沉淀出来的办法成不溶物而沉淀出来的办法•沉淀过程沉淀过程 从任何均相流体中析出固体物质的过程从任何均相流体中析出固体物质的过程•沉淀过程发生的必要条件沉淀过程发生的必要条件 溶液体系对某种溶质是过溶液体系对某种溶质是过饱和的•使溶质达到过饱和的方法使溶质达到过饱和的方法 ① ①冷却法②②蒸发法③③溶剂转化法溶剂转化法④④盐析法⑤⑤反应沉淀分离法反应沉淀分离法4.1.1 4.1.1 重金属盐沉淀法（铅盐沉淀法）重金属盐沉淀法（铅盐沉淀法）(1) (1) 原理原理：利用中性醋酸铅或碱式醋酸铅：利用中性醋酸铅或碱式醋酸铅在水或稀的醇溶液中能与许多物质生成在水或稀的醇溶液中能与许多物质生成难溶的铅盐或络盐而得到分离难溶的铅盐或络盐而得到分离①①中性醋酸铅可以沉淀：有机酸、蛋白质、中性醋酸铅可以沉淀：有机酸、蛋白质、氨基酸、鞣质、酸性皂甙、树脂及部分氨基酸、鞣质、酸性皂甙、树脂及部分黄酮甙等酸性或酚类物质。

黄酮甙等酸性或酚类物质②②碱式醋酸铅沉淀：上述所有、甙类、糖碱式醋酸铅沉淀：上述所有、甙类、糖类及一些生物碱等碱性物质类及一些生物碱等碱性物质例如：例如：具有二羟基结构的黄酮具有二羟基结构的黄酮利用铅盐沉淀分离利用铅盐沉淀分离 在中药的乙醇或甲醇提取液中加入饱和的中性在中药的乙醇或甲醇提取液中加入饱和的中性乙酸铅水溶液，可使具有邻二酚羟基或羧基的黄酮乙酸铅水溶液，可使具有邻二酚羟基或羧基的黄酮类化合物沉淀析出此类化合物沉淀析出此↓↓悬浮于乙醇中，通入悬浮于乙醇中，通入H2S进行复分解，滤除硫化铅沉淀，滤液中可得黄酮类进行复分解，滤除硫化铅沉淀，滤液中可得黄酮类化合物(2) (2) 一个试样可以依次用中性醋酸铅、碱性醋酸一个试样可以依次用中性醋酸铅、碱性醋酸铅将试液的组分分成三部分：铅将试液的组分分成三部分：(3) (3) 脱铅方法脱铅方法 ：：①①通通H H2 2S S气体 (使沉淀转化为溶解度更小的使沉淀转化为溶解度更小的PbS↓) ) ②②加入强酸性阳离子交换树脂加入强酸性阳离子交换树脂使铅离子转移到（使铅离子转移到树脂上）树脂上）③③加入磷酸或稀硫酸使沉淀转化为加入磷酸或稀硫酸。

使沉淀转化为Ksp小的小的PbSO4↓↓orPb3(PO4)↓↓））4.1.2 4.1.2 试剂沉淀法试剂沉淀法加入某些特殊的试剂使目标物质沉淀出来加入某些特殊的试剂使目标物质沉淀出来有机物中含：有机物中含：鞣质鞣质—用明胶或蛋白质将其沉淀出来用明胶或蛋白质将其沉淀出来 胰岛素胰岛素—用用Zn离子将其沉淀出来（二者形成复合物离子将其沉淀出来（二者形成复合物↓↓）生物碱生物碱—用某些沉淀试剂，使其生成不溶性复盐而用某些沉淀试剂，使其生成不溶性复盐而↓↓出来蛋白质蛋白质—调节调节pH=PI（等电点）使其（等电点）使其↓↓出来橙皮甙、芦丁、黄苓甙、甘草皂甙橙皮甙、芦丁、黄苓甙、甘草皂甙—加酸可以使其加酸可以使其↓↓出来出来 洋地黄皂甙洋地黄皂甙—加甾体皂甙形成难溶的分子复合物加甾体皂甙形成难溶的分子复合物→→ 再分离、分解再分离、分解/ /还原 4.1.3 4.1.3 盐析法盐析法（（1 1）） 原理原理: :在有机物的水溶液中加入大量的无机盐，在有机物的水溶液中加入大量的无机盐，会使有机物溶解度减小而沉淀出来。

会使有机物溶解度减小而沉淀出来2 2）） 特点特点: :不会破坏蛋白质、肽、酶等生物活性，不会破坏蛋白质、肽、酶等生物活性，处理量大，操作方便处理量大，操作方便3 3）） 盐的种类盐的种类：：①①盐析性盐：能使蛋白质水溶性减小的盐盐析性盐：能使蛋白质水溶性减小的盐常用的有：常用的有：Na2SO4、、KH2PO4、、Na2HPO4、、(NH4)2SO4、、KOAC、、NaOAc、、NaCl ②②盐溶性盐盐溶性盐 ：使蛋白质的溶解度反而增大使蛋白质的溶解度反而增大常用的有：盐酸胍、脲、硫氰酸盐等（它们的加入常用的有：盐酸胍、脲、硫氰酸盐等（它们的加入还会破坏蛋白质的活性）还会破坏蛋白质的活性）（（4 4）） 盐析性盐加入蛋白质水溶液中会产生两种影响盐析性盐加入蛋白质水溶液中会产生两种影响 ①①使蛋白质溶解度增大使蛋白质溶解度增大因为：盐的离子与蛋白质的亲水基团因为：盐的离子与蛋白质的亲水基团（（-OH，，COOH，，-NH2））作用，降低蛋白质的活度系数作用，降低蛋白质的活度系数②②使蛋白质溶解度减小使蛋白质溶解度减小因为：盐会破坏蛋白质表面水化膜，使蛋白质的因为：盐会破坏蛋白质表面水化膜，使蛋白质的疏水基团疏水基团（（-ph，，-CH3，，-CHn，，C=C））之间疏之间疏水力增加，即蛋白质之间疏水力增大。

水力增加，即蛋白质之间疏水力增大盐浓度（离子强度）与蛋白质溶解度的关系怎样衡量？盐浓度（离子强度）与蛋白质溶解度的关系怎样衡量？ 蛋白质溶解度与离子强度的关系：蛋白质溶解度与离子强度的关系：                               lgs=lgso - ks·I式中：式中：s为某离子强度下蛋白质的溶解度；为某离子强度下蛋白质的溶解度；            so为为I=0时蛋白质的溶解度；时蛋白质的溶解度；           ks是盐析系数，它与蛋白质有关，还与盐的种类、是盐析系数，它与蛋白质有关，还与盐的种类、pH值及温度有关；值及温度有关；          I是离子强度是离子强度I=∑（（MZ2））/ 2，，M是离子摩尔数，是离子摩尔数，Z是对应离子的价数是对应离子的价数 例如：提取麻黄碱、苦参碱例如：提取麻黄碱、苦参碱 向其中加入向其中加入NaCl溶液，让其溶解度减小溶液，让其溶解度减小 以提高有机溶剂萃取率以提高有机溶剂萃取率4.1.4 4.1.4 有机溶剂沉淀法有机溶剂沉淀法（（1 1）原理）原理：样品为少量的浓溶液，溶剂为：样品为少量的浓溶液，溶剂为A，加入，加入大量与大量与A相溶而与溶质不溶或微溶的有机溶剂相溶而与溶质不溶或微溶的有机溶剂B，，溶质的溶解度在有机溶剂溶质的溶解度在有机溶剂A 中减小而析出。

中减小而析出条件条件：：①①有机溶剂有机溶剂B B与与A必须有互溶性必须有互溶性 ② ②样品在有机溶剂样品在有机溶剂B B中微溶或不溶中微溶或不溶2 2）溶剂的选择）溶剂的选择：：①①溶质在水溶质在水(A)中溶解度大，在有机溶剂中溶解度大，在有机溶剂(B)中不溶②②溶剂溶剂(B)与水与水(A)互溶③③溶剂与提取物无化学作用溶剂与提取物无化学作用 ④④无毒性、价廉无毒性、价廉（（3 3）应用）应用例子：高分子材料中例子：高分子材料中“高聚物高聚物”与与“添加剂添加剂”分分离4 4）缺点）缺点：：①①选择性不强选择性不强 ② ②消耗大量溶剂消耗大量溶剂4.2 4.2 重结晶重结晶目的：纯化固体目标物4.2.1 4.2.1 4.2.1 4.2.1 基本原理基本原理基本原理基本原理: : : : 利用在一定溶剂中各种组分溶解度的不同和有机利用在一定溶剂中各种组分溶解度的不同和有机物在加热、冷却时溶解度大、小不同的性质来除去少物在加热、冷却时溶解度大、小不同的性质来除去少量杂质的方法即：量杂质的方法即： 注意：注意：①①杂质溶解度越大杂质溶解度越大②②被提纯物在加热和常温下被提纯物在加热和常温下 溶解度差别越大溶解度差别越大 则重结晶的回收率越高。

则重结晶的回收率越高4.2.2 4.2.2 溶剂的选择溶剂的选择 ( (重结晶的关键重结晶的关键) )（（1 1）理想的溶剂应符合下列条件：）理想的溶剂应符合下列条件： ① ① 不与被提纯物质起反应不与被提纯物质起反应 ② ② 样品中被提纯的组分在该溶剂中加热时溶解度样品中被提纯的组分在该溶剂中加热时溶解度大而常温下溶解度小，这两者之差越大越好大而常温下溶解度小，这两者之差越大越好③ ③ 杂质在溶剂中溶解度大，可以留在母液中，不杂质在溶剂中溶解度大，可以留在母液中，不会结晶出来；或者溶解度极小，很难溶于热溶会结晶出来；或者溶解度极小，很难溶于热溶剂中而过滤除去剂中而过滤除去④ ④ 溶剂容易挥发，使结晶容易干燥溶剂容易挥发，使结晶容易干燥⑤ ⑤ 被重结晶的有机物可以得到好的晶体被重结晶的有机物可以得到好的晶体（（2 2）溶剂的选择）溶剂的选择粗选：经验和“相似相溶”规则 表4-1 重结晶常用溶剂精选：试管实验筛选法方法如下页 判断标准：只有当溶剂的量在2－3mL内，试样能全溶于沸腾的溶剂中，而在冷却后有较多的结晶析出者，方可作为结晶的候选溶剂。

通常要做出几种溶剂试验，相互比较，选出结晶速度适当，产率高者，作为最佳溶剂§没有合适的单一溶剂，可使用混合溶剂混合溶剂筛选方法：选用两种互溶的溶剂，其中一种必须对样品是易溶的，另一种则是难溶或不溶的将少量的样品溶于易溶的溶剂中，然后向其中逐渐加入已预热的难溶溶剂，至溶液刚好出现混浊为止再滴加1—2滴易溶溶剂，使混浊消失冷却，结晶析出，则这种溶剂适用纪录两种溶剂的体积比实际操作时，可按上述程序进行，也可按比例配制好后使用4.2.3 4.2.3 4.2.3 4.2.3 操作技术操作技术操作技术操作技术工工作作程程序序：：热热饱饱和和溶溶液液配配制制→→热热过过滤滤→→冷冷却却析析晶晶→→减减压压抽滤抽滤→→晶体洗涤晶体洗涤→→干燥干燥→→目标物目标物（（1 1）溶解：）溶解：加入溶剂要适量加入溶剂要适量 (一般所加的溶剂比一般所加的溶剂比被结晶物制成饱和溶液多被结晶物制成饱和溶液多20%左右)热饱和溶液配制热饱和溶液配制：将待结晶的物质和略少于需要量的溶剂置于烧瓶或锥形：将待结晶的物质和略少于需要量的溶剂置于烧瓶或锥形瓶中，（装上冷凝器）加热至沸腾若未完全溶解时，可补加少量溶剂，瓶中，（装上冷凝器）加热至沸腾。

若未完全溶解时，可补加少量溶剂，直至沸腾时能够完全溶解为止但要注意判断是否有杂质存在，以免加入直至沸腾时能够完全溶解为止但要注意判断是否有杂质存在，以免加入溶剂过量溶剂过量注意事项：注意事项：①①一般溶剂的量是按饱和溶液的需要量多加一般溶剂的量是按饱和溶液的需要量多加20%，这是一个参考值，在实，这是一个参考值，在实际工作中，主要由实验确定际工作中，主要由实验确定②②溶液中的颜色或树脂状悬浮物可通过加入溶液中的颜色或树脂状悬浮物可通过加入1－－5%的活性碳进行脱色活的活性碳进行脱色活性碳的量不宜过多，且必须在样品溶解完全后，等溶液稍冷之后再加入性碳的量不宜过多，且必须在样品溶解完全后，等溶液稍冷之后再加入此后，再加热此后，再加热5－－10min③③使用易燃、有毒溶剂时，应注意装上冷凝器和避免使用明火加热使用易燃、有毒溶剂时，应注意装上冷凝器和避免使用明火加热（（2 2）） 热过滤：热过滤：为除去固体杂质或为脱有色杂质的为除去固体杂质或为脱有色杂质的颜色而加入的活性颜色而加入的活性C C，一定要趁热过滤其技术？，一定要趁热过滤其技术？热过滤：热过滤：（要求尽可能在较短时间内和溶液保温下完成）（要求尽可能在较短时间内和溶液保温下完成）•利用折叠滤纸和预热的普通漏斗进行的重力过滤法。

漏斗利用折叠滤纸和预热的普通漏斗进行的重力过滤法漏斗预热方法有两种：沸腾溶剂直接预热，适用于水溶剂，装预热方法有两种：沸腾溶剂直接预热，适用于水溶剂，装置如图置如图4 4－－1；用保温热水漏斗套保温过滤，适用于所有溶；用保温热水漏斗套保温过滤，适用于所有溶剂，装置及加热方法如图保温漏斗夹层中的水量一般为剂，装置及加热方法如图保温漏斗夹层中的水量一般为2/3，过滤前应预先将其加热到所需要的温度，然后熄灭火，过滤前应预先将其加热到所需要的温度，然后熄灭火源即可起到保温过滤作用源即可起到保温过滤作用滤纸折叠方法：滤纸折叠方法：折叠滤纸可提高过滤速度扇形滤纸是其中折叠滤纸可提高过滤速度扇形滤纸是其中常用的一种，其折叠方法如下图使用前将滤纸内外翻转常用的一种，其折叠方法如下图使用前将滤纸内外翻转即可 图4-1 常压热过滤和减压过滤装置 图4-2 扇形滤纸的折叠方法（（3) 3) 结晶：结晶：滤液在放置冷却过程中，溶质的溶滤液在放置冷却过程中，溶质的溶解度随母液的温度降低而减小，会有结晶逐渐析解度随母液的温度降低而减小，会有结晶逐渐析出其技术？出其技术？析晶：析晶：有自然冷却法和强制冷却法两种。

有自然冷却法和强制冷却法两种自然冷却法自然冷却法/ /室温冷却法析晶较慢，效果较好室温冷却法析晶较慢，效果较好强制冷却法强制冷却法/ /快速冷却法析晶较快若搅拌会快速冷却法析晶较快若搅拌会使结晶颗粒较细，其表面常会吸附杂质；但结使结晶颗粒较细，其表面常会吸附杂质；但结晶速度过慢，将导致晶体颗粒过大，结晶中会晶速度过慢，将导致晶体颗粒过大，结晶中会包藏有溶液和杂质包藏有溶液和杂质诱导结晶的方法：玻棒擦壁；晶种法；诱导结晶的方法：玻棒擦壁；晶种法；(4) (4) 减压过滤与干燥：减压过滤与干燥：减压减压过滤过滤- -母液与结晶分离母液与结晶分离洗涤洗涤- -晶体表面的母液和杂质，要用重结晶的溶剂洗晶体表面的母液和杂质，要用重结晶的溶剂洗干燥干燥- -抽滤得到的结晶总附有少量溶剂其方法？抽滤得到的结晶总附有少量溶剂其方法？固液分离和结晶洗涤固液分离和结晶洗涤•固液分离：用减压抽滤法完成，瓶中残留结晶的转移可固液分离：用减压抽滤法完成，瓶中残留结晶的转移可用少量母液反复冲洗完成将晶体尽量抽干，必要时可用少量母液反复冲洗完成将晶体尽量抽干，必要时可用玻璃塞或镍刮刀挤压晶体用玻璃塞或镍刮刀挤压晶体。

•洗涤：停止抽气，滴加少量的洗涤液润湿晶体表面，再洗涤：停止抽气，滴加少量的洗涤液润湿晶体表面，再抽干依次反复抽干依次反复2-32-3次如果结晶较多且又紧密时，可在次如果结晶较多且又紧密时，可在加入洗涤液后，用镍刮刀将结晶轻轻掀起并加以搅动，加入洗涤液后，用镍刮刀将结晶轻轻掀起并加以搅动，使全部结晶湿润最后用刮刀将结晶移至干净的表面皿使全部结晶湿润最后用刮刀将结晶移至干净的表面皿上进行干燥上进行干燥 减减 压压 抽抽 滤滤 技技 术术 ：： 使使 用用 的的 是是 布布 氏氏 漏漏 斗斗（（Buchner））筛筛板板上上的的滤滤纸纸大大小小应应和和布布氏氏漏漏斗斗底底部部恰恰好好合合适适，，抽抽滤滤前前用用溶溶剂剂润润湿湿滤滤纸纸并并与与漏漏斗斗底底部部贴贴紧紧在在过过滤滤过过程程中中漏漏斗斗里里应应一一直直保保持持有有较较多多的的溶溶液液在在未未过过滤滤完完以以前前不不要要抽抽干干，，同同时时注注意意调调节节真真空空度度以以防防止止由由于于压压力力过过低低而而导导致致溶溶液液沸沸腾腾方方法法是是用用手手稍稍稍稍捏捏住住抽抽气气管管，，使使吸吸滤滤瓶瓶中中仍仍保保持持一一定定的的真真空空度度，，而能继续迅速抽滤。

而能继续迅速抽滤4.3 4.3 多步结晶多步结晶•当某个待纯化的样品中含有两个以上的成当某个待纯化的样品中含有两个以上的成分，难以用简单的重结晶法得到纯组分时，分，难以用简单的重结晶法得到纯组分时，可以用分步结晶法来完成纯化工作可以用分步结晶法来完成纯化工作 4.4 4.4 升华技术升华技术目的目的：分离易挥发且热稳定的固体物质，是一种：分离易挥发且热稳定的固体物质，是一种纯化固体有机物的方法之一纯化固体有机物的方法之一 条件条件：固体物质必须在其熔点之下具有相当高蒸：固体物质必须在其熔点之下具有相当高蒸气压1 1）基本原理）基本原理：物质从固态不经过液态而直接：物质从固态不经过液态而直接转变为蒸气，然后物质的蒸气不经过液态又直转变为蒸气，然后物质的蒸气不经过液态又直接转变为固态的过程即：固体接转变为固态的过程即：固体→→气体气体→→固体固体      物质的三相平衡图：当物质处于一定温度和压力时，物质的三相平衡图：当物质处于一定温度和压力时，其固、液、气三相处于平衡状态，该条件称为物质的三相其固、液、气三相处于平衡状态，该条件称为物质的三相点一般说来，不同的物质具有不同的三相点。

点一般说来，不同的物质具有不同的三相点PTLiquidSolidGas图4-3 物质的三相平衡图 图图4-4 4-4 常压升华装置常压升华装置 图图4-5 4-5 减压升华装置减压升华装置（（2 2）） 装置及操作装置及操作：：①①常压升华常压升华 ② ②减压升华减压升华（（3 3）常用升华法分离的物质）常用升华法分离的物质化合物化合物熔点熔点/℃/℃熔点下的蒸气压熔点下的蒸气压/kPa/kPa二氧化碳（固体）二氧化碳（固体）－－5757527527六氯环己烷六氯环己烷186186104104樟脑樟脑17917949.349.3碘碘1141141212蒽蒽2182185.55.5邻苯二甲酸酐邻苯二甲酸酐1311311.21.2萘萘80800.90.9苯甲酸苯甲酸1221220.80.8升华法只适用于纯化那些在不太高温度下又足够蒸气压（高于升华法只适用于纯化那些在不太高温度下又足够蒸气压（高于20mmHg））的固体物质下表列出了一些固体化合物在熔点时的蒸气压的固体物质下表列出了一些固体化合物在熔点时的蒸气压注意事项：注意事项：升华操作的关键是加热速度不能太快，否则蒸气压会超过三相点的压力，物质将会由固体直接转变为液体，导致升华失败。

冷却面与升华物质的距离尽可能近些因升华发生在固体物质的表面，所以应将待升华物质预先研细图（a）中，在蒸发皿和漏斗连接处需盖一张钻有许多小孔的滤纸漏斗的颈部应提前用玻璃丝或棉花堵塞，减少蒸气外逸必要时可在漏斗外用湿滤纸或湿布冷却在常压下虽具有一定蒸气压，但不易升华的化合物，可采用减压升华，如苯甲酸如果量较多时，可采用（b）装置进行。