第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类.ppt

红血族佃阂墩钉斤唯揩蓬署轻壹磐魁揪窟恿黎肥选衅刹阀汝蜕宜谍慕燥龟第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章 兽药残留检测技术第七节第七节 苯并咪唑类药物残留的危苯并咪唑类药物残留的危害分析与检测方法害分析与检测方法 蛋格枢杖瘦摘总北侧刺亿锅柳碰蝎蚜袱逸逢叛党传瞄滤樟焊丸砸蘸冷担窃第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类一、概述一、概述l苯并咪唑类苯并咪唑类(Benzimidazoles，，BEN)是一种驱虫剂是一种驱虫剂,被被广泛应用于动物寄生虫的治疗广泛应用于动物寄生虫的治疗,同时还作为杀霉菌剂应同时还作为杀霉菌剂应用于庄稼存贮和运输期间用于庄稼存贮和运输期间,使其免受霉菌污染使其免受霉菌污染l自自20世纪世纪60年代早期年代早期,美国合成噻苯达唑以来美国合成噻苯达唑以来,已合成数已合成数百种苯并咪唑类驱虫药百种苯并咪唑类驱虫药噻苯达唑噻苯达唑作为第一个商品化的作为第一个商品化的苯并咪唑类药物苯并咪唑类药物,曾广泛用于世界各地曾广泛用于世界各地,用以驱除各种动用以驱除各种动物物(如牛、绵羊、山羊、猪、马、禽等如牛、绵羊、山羊、猪、马、禽等)胃肠道寄生虫。

胃肠道寄生虫用于治疗时可一次内服给药用于治疗时可一次内服给药,也可以低浓度置于饲料中也可以低浓度置于饲料中长期使用做预防用长期使用做预防用县欲信赘地竭铆拎猫滞邑人蠢眺宽开侵剪酉收峻喘凉彪焰攻铂舜浊烟师涌第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类l由于噻苯达唑驱虫作用不强由于噻苯达唑驱虫作用不强,用药剂量较大用药剂量较大,且驱虫谱不广且驱虫谱不广,目前目前,已逐渐为其他苯并咪唑类药物已逐渐为其他苯并咪唑类药物——阿苯达唑、奥芬阿苯达唑、奥芬达唑、芬苯达唑、甲苯达唑、氟苯达唑等所取代达唑、芬苯达唑、甲苯达唑、氟苯达唑等所取代l本类药物的特点是驱虫谱广本类药物的特点是驱虫谱广,驱虫效果好驱虫效果好,毒性低毒性低,甚至还甚至还有一定的杀灭幼虫和虫卵作用有一定的杀灭幼虫和虫卵作用l苯并咪唑类中的帕苯达唑、坎苯达唑、阿苯达唑和奥芬达苯并咪唑类中的帕苯达唑、坎苯达唑、阿苯达唑和奥芬达唑对妊娠早期唑对妊娠早期(约妊娠三周约妊娠三周)绵羊的胎儿有绵羊的胎儿有致畸作用致畸作用,因此因此用于孕畜时应特别慎重用于孕畜时应特别慎重峻坑俱谨楷驳专鳃熄与泥铅挣颤汉鹅蛙队履然停啡滞汹嘶扳丑锯坷翘陕色第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类苯并咪唑类药物的结构式苯并咪唑类药物的结构式l苯并咪唑类药物是一个庞大的化学家族苯并咪唑类药物是一个庞大的化学家族,包括噻苯包括噻苯达唑的同系物、苯并咪唑氨基甲酸酯类达唑的同系物、苯并咪唑氨基甲酸酯类,以及苯并以及苯并咪唑环上的各种侧链取代物。

咪唑环上的各种侧链取代物苯并咪唑氨基甲酸酯类苯并咪唑氨基甲酸酯类苯并咪唑环苯并咪唑环噻苯达唑的同系物噻苯达唑的同系物口雷漏辨摘燃陡石柠邑鸯此普煎狈坑蜒袱疫鲸井梆沙消掩埋赫重您蚌辖蹄第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类苯并咪唑类药物苯并咪唑类药物l1、、噻苯达唑噻苯达唑(Thiabendazole, TBZ)l2、坎苯达唑、坎苯达唑(Cambendazole, CAM)l3、苯硫脲酯、苯硫脲酯(Thiophanate)l4、、非班太尔非班太尔(Febantel, FEB)l5、芬苯达唑、芬苯达唑(Fenbendazole, FBZ)l6、奥芬达唑、奥芬达唑(OxfendazoIe, OFZ)l7、、阿苯达唑阿苯达唑(Albendazole, ABZ)l8、、甲苯达唑甲苯达唑(Mebendazole, MBZ)l9、奥苯达唑、奥苯达唑(Oxibendazole, OXI)l10、氟苯达唑、氟苯达唑(Flubendazole, FLU)l11、三氯苯达唑、三氯苯达唑(Triclabendazole, TCB)台螺避火顷贯瞎忻狭尤弦汉欺捧侍互良嫡彤沾假合脊戏缔凳兰粘胁城称脯第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类1、噻苯达唑、噻苯达唑(Thiabendazole,TBZ)l别名噻菌灵、特克多、涕必灵、硫苯唑、噻苯咪唑、噻别名噻菌灵、特克多、涕必灵、硫苯唑、噻苯咪唑、噻唑苯咪唑苯咪,为白色至奶黄色粉末为白色至奶黄色粉末,无臭无臭,味微苦味微苦,微溶于水或微溶于水或乙醇乙醇,易溶于稀盐酸或稀碱液中易溶于稀盐酸或稀碱液中,不溶于氯仿或苯中。

不溶于氯仿或苯中l广谱驱虫药广谱驱虫药,可能是抑制虫体的延胡索酸还原酶可能是抑制虫体的延胡索酸还原酶l对动物多种胃肠道线虫均有驱除效果对动物多种胃肠道线虫均有驱除效果,对成虫效果好对成虫效果好,对对未成熟虫体也有一定作用未成熟虫体也有一定作用l内服吸收快内服吸收快,广泛分布于各组织中广泛分布于各组织中猪、羊、牛给药后猪、羊、牛给药后2~7h达血药峰浓度达血药峰浓度在体内迅速代谢成在体内迅速代谢成5-羟噻苯达唑羟噻苯达唑(5-OH-TBZ)阜谗性晓燎打梦彬击耻抢蓖荧运什泳撮圆番缀辗绒邦滔傈舵指昔坟便衫礁第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类l犊牛犊牛用药后用药后,肾肾中药物浓度中药物浓度最高最高,但但肝的滞留期比肾长肝的滞留期比肾长;噻苯达唑、噻苯达唑、5-羟噻苯达唑在肝和肾中的残留量分别为羟噻苯达唑在肝和肾中的残留量分别为57µg/kg、、581µg/kg和和153µg/kg、、19µg/kg；休药；休药6天只有天只有肝中有肝中有5-羟噻苯达唑残留量羟噻苯达唑残留量(63µg/kg)；噻苯达唑在肌；噻苯达唑在肌肉和脂肪中未被检出，但肉和脂肪中未被检出，但5-羟噻苯达唑在用药后羟噻苯达唑在用药后1日内日内可检出可检出,其残留量分别为肌肉其残留量分别为肌肉54µg/kg、脂肪、脂肪64µg/kg。

l奶牛奶牛用药后用药后12h,噻苯达唑、噻苯达唑、5-羟噻苯达唑在奶中的残留羟噻苯达唑在奶中的残留量分别为量分别为5007µg/kg和和168µg/kg，，84h时分别为时分别为20µg/kg和和25µg/kg指铝咋那沦参帽惩乘积禾舔禾但袭赡卡落巴僳腺瓜畜傅韩砍策蚁刨参耘染第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类2、坎苯达唑、坎苯达唑(Cambendazole,CAM)l别名噻苯达唑酯别名噻苯达唑酯,为广谱驱虫药为广谱驱虫药l对动物肠道寄生虫和肺蠕虫有明显作用制剂有混悬剂、对动物肠道寄生虫和肺蠕虫有明显作用制剂有混悬剂、糊剂或饲料粉的形式糊剂或饲料粉的形式l内服后在内服后在体内迅速代谢体内迅速代谢,原药和代谢物主要经原药和代谢物主要经胆汁排泄胆汁排泄,尿尿中占给药量的中占给药量的25%,其中原形的不足其中原形的不足5%l牛牛内服后内服后30日内日内,肝中可检出残留物肝中可检出残留物,其中一部分为其中一部分为结合态结合态l坎苯达唑有坎苯达唑有致畸性致畸性,因此休药期要求适当的延长因此休药期要求适当的延长l牛牛休药期休药期21天天,羊羊休药期休药期28天轴辞堂论相愤沟逼棍亦嗡间果非砍似遵女戊敏疏琅虏嚎凄哈涅菩九疯伐缸第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类3、苯硫脲酯、苯硫脲酯(Thiophanate)l别名硫菌灵、硫苯尿酯别名硫菌灵、硫苯尿酯,属苯并咪唑的前体药物属苯并咪唑的前体药物,即在动物即在动物体内转变成苯并咪唑氨基甲酸甲酯而发挥驱虫作用。

体内转变成苯并咪唑氨基甲酸甲酯而发挥驱虫作用l本品为微黄棕色结晶性粉末本品为微黄棕色结晶性粉末,在水、甲醇、乙酸乙酯和丙酮在水、甲醇、乙酸乙酯和丙酮中微溶中微溶,在环己酮中易溶在环己酮中易溶l动物制剂有混悬剂和丸剂两种动物制剂有混悬剂和丸剂两种,或用作饲料添加剂或用作饲料添加剂l广谱驱虫药广谱驱虫药,对大多数动物的胃肠线虫成虫及幼虫均有良好对大多数动物的胃肠线虫成虫及幼虫均有良好效果l内服吸收快而完全内服吸收快而完全,8h达血药峰浓度用药后达血药峰浓度用药后24h,几乎能从几乎能从所有组织器官中所有组织器官中(特别是肝、肾特别是肝、肾)测出药物用药后测出药物用药后72h内内,大部分药量经粪和尿排出体外大部分药量经粪和尿排出体外诅士术墒咙啊兵工甜唁帚鹰兢文涉粟棚类镍蔬彪圃栽率诞怖感群咱周蹈嗅第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类l畜禽用药后畜禽用药后,残留量在肝和肾中较高残留量在肝和肾中较高,而其他可食组织中相对较低而其他可食组织中相对较低l绵羊绵羊一次内服一次内服100mg/kg后休药后休药1日日,肝、肾、肌肉和脂肪中的残留量肝、肾、肌肉和脂肪中的残留量分别为分别为930µg/kg、、1060µg/kg、、670µg/kg和和2930µg/kg;休药休药3日后均低日后均低于于100µg/kg。

l犊牛犊牛一次内服一次内服100mg/kg后休药后休药7日日,肝、肾和肌肉中的残留量均低于肝、肾和肌肉中的残留量均低于200µg/kgl猪猪一次内服一次内服75mg/kg后休药后休药1日日,肝、肾、肌肉和皮肝、肾、肌肉和皮/脂肪中的平均残脂肪中的平均残留量分别为留量分别为5550µg/kg、、6600µg/kg、、2600µg/kg和和16200µg/kg;休药休药3日日分别为分别为180µg/kg、、100µg/kg、、<100µg/kg和和250µg/kg;休药休药7日组织中残日组织中残留均低于留均低于100µg/kgl奶牛奶牛一次内服一次内服100mg/kg后休药后休药6h、、20h和和30h,奶中残留量分别为奶中残留量分别为440µg/kg、、320µg/kg和和140µg/kg;休药休药44h奶中未检出残留量奶中未检出残留量(方法检方法检测限测限50µg/kg)兄铬泛雹猩惋媒颅酥识灰教闭驳罪云体敏契狭豌哗没驯颁耘曲只圭逸奉摈第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类4、非班太尔、非班太尔(Febantel, FEB)l别名苯硫氨酯别名苯硫氨酯,为无色粉末为无色粉末,在丙酮、氯仿、四氢呋喃和二在丙酮、氯仿、四氢呋喃和二氯甲烷中溶解氯甲烷中溶解,在水和乙醇中不溶在水和乙醇中不溶。

l非班太尔非班太尔(FEB,属苯并咪唑类前体药物属苯并咪唑类前体药物,内服后在胃肠道内内服后在胃肠道内迅速代谢为芬苯达唑迅速代谢为芬苯达唑(FBZ)及其砜类化合物及其砜类化合物(FBZ-SO和和FBZ-SO2),FBZ-SO又称奥芬达唑又称奥芬达唑(OFZ),原药在体内浓度很原药在体内浓度很低低l代谢物的驱虫活性比母药非班太尔要强得多代谢物的驱虫活性比母药非班太尔要强得多,而发挥有效而发挥有效的驱虫效果的驱虫效果l非班太尔在美国已批准用于各种动物的驱线虫药非班太尔在美国已批准用于各种动物的驱线虫药,以复方以复方制剂上市制剂上市,如用于犬、猫的产品多与吡喹酮等配合如用于犬、猫的产品多与吡喹酮等配合,以扩太以扩太驱虫范围驱虫范围碾武骑吮枕死棠娄咳贬隘金挨字澈哨悦刀猖灾弧席魄俄蝶即晦姑瘤擞穴赤第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类l牛牛内服后内服后18h,肝中约占总残留量的肝中约占总残留量的90%,其中芬苯达唑其中芬苯达唑30%~41%,奥芬达唑奥芬达唑4%~19%,奥芬达唑砜奥芬达唑砜14%~15%,非非班太尔班太尔3%~6%,以及一些微量的氨基代谢物休药以及一些微量的氨基代谢物。

休药10日日,肝中残留量下降很多肝中残留量下降很多,其中以结合态的约占其中以结合态的约占75%l鼠、羊、牛和猪内服后鼠、羊、牛和猪内服后,组织中的残留量依次为肝组织中的残留量依次为肝>肾肾>脂肪脂肪>肌肉磺鲁淖拈凡时道淀瓶刮事坤府昔郑澎罪盒不照杉耽咽底茂察袄镑笆帜眼邪第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类5、芬苯达唑、芬苯达唑(Fenbendazole, FBZ)l别名硫苯达唑、苯硫达唑，无臭无味，别名硫苯达唑、苯硫达唑，无臭无味，在二甲基亚砜中溶在二甲基亚砜中溶解，在甲醇中微溶解，在甲醇中微溶,在水中不溶在水中不溶,在冰醋酸中溶解在冰醋酸中溶解l为广谱、高效、低毒的新型苯并咪唑类驱虫药为广谱、高效、低毒的新型苯并咪唑类驱虫药l它不仅对动物胃肠道线虫成虫、幼虫有高度驱虫活性它不仅对动物胃肠道线虫成虫、幼虫有高度驱虫活性,而而且对网尾线虫、矛形双腔吸虫、片形吸虫和绦虫亦有较佳且对网尾线虫、矛形双腔吸虫、片形吸虫和绦虫亦有较佳效果l芬苯达唑在国外芬苯达唑在国外,不仅用于各种动物不仅用于各种动物,甚至还有野生动物的甚至还有野生动物的专用制剂专用制剂l由于芬苯达唑由于芬苯达唑溶解度较低溶解度较低,因而给动物因而给动物内服时吸收极少内服时吸收极少,如如给绵羊、牛、猪内服因吸收少给绵羊、牛、猪内服因吸收少,经粪便排泄的原形药约占经粪便排泄的原形药约占44%~50%,而经尿排泄的不足而经尿排泄的不足1%。

鼠犯曹图酷遗概搁庄快皱陷伊密颊汀命菌乎尿狸揽密疼钩哭耿各舱夸但纂第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类l吸收后芬苯达唑在动物体内迅速吸收后芬苯达唑在动物体内迅速代谢代谢为为芬苯达唑亚砜芬苯达唑亚砜(FBZ-SO)即奥芬达唑即奥芬达唑(OFZ)、、芬苯达唑砜芬苯达唑砜(FBZ-SO2)、、芬苯达唑芬苯达唑-2-氨砜氨砜(FEB-NH2-SO2)和一些少量的其他代和一些少量的其他代谢物l原药和代谢物主要经胆汁排泄原药和代谢物主要经胆汁排泄在绵羊体内的代谢产物在绵羊体内的代谢产物,由胆汁分泌后可再经肝肠循环由胆汁分泌后可再经肝肠循环l猪猪用药用药5mg/kg后休药后休药7天天,肝中母药残留量为肝中母药残留量为0.28mg/kg,其他无组织残留其他无组织残留睦磋阎庆辖淖狗珠条腹紫需纬薯碑吊嗣漂定绞氮然履炳惟战汝铡琶踪蚤诬第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类l牛牛用药用药10mg/kg后休药后休药2天天,肝、肾、肌肉和脂肪中的母药肝、肾、肌肉和脂肪中的母药残留量分别为残留量分别为8.4mg/kg、、1.04mg/kg、、0.47mg/kg和和0.95mg/kg;休药休药7天天,只在肝中能检测到残留量只在肝中能检测到残留量0.67mg/kg。

l奶牛奶牛内服内服10mg/kg后后,12~24h奶中芬苯达唑浓度达峰值奶中芬苯达唑浓度达峰值,休休药药7天降至天降至100µg/kg;12h芬苯达唑亚砜浓度达峰值芬苯达唑亚砜浓度达峰值,然后迅然后迅速下降速下降,96h时未检出时未检出;48h芬苯达唑砜浓度达峰值芬苯达唑砜浓度达峰值,96h时未时未检出l鳟鱼鳟鱼内服后内服后,在体内部分代谢为在体内部分代谢为奥芬达唑奥芬达唑,并蓄积于并蓄积于鱼皮鱼皮中母药和奥芬达唑的消除期分别为母药和奥芬达唑的消除期分别为96h和和24h芬苯达唑砜芬苯达唑砜代谢物在鱼体内几乎没有代谢物在鱼体内几乎没有顿泽祟容崎大砸计哆柄葛货林入充拍军雕炉贱没婉师尝操赂碗澜肌莲疙骑第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类6、奥芬达唑、奥芬达唑(OxfendazoIe,OFZ)l别名磺唑氨酯别名磺唑氨酯,为白色或类白色粉末为白色或类白色粉末,有轻微的特殊气味有轻微的特殊气味,在甲醇、丙在甲醇、丙酮、氯仿、乙醚中微溶酮、氯仿、乙醚中微溶,在水中不溶在水中不溶l奥芬达唑为芬苯达唑的衍生物奥芬达唑为芬苯达唑的衍生物,属广谱、高效、低毒的新型抗蠕虫药属广谱、高效、低毒的新型抗蠕虫药,其驱虫谱大致与芬苯达唑相同其驱虫谱大致与芬苯达唑相同,但驱虫活性更强。

但驱虫活性更强l奥芬达唑与阿苯达唑同为苯并咪唑类中奥芬达唑与阿苯达唑同为苯并咪唑类中,属属内服吸收量较多内服吸收量较多的驱虫药的驱虫药但反刍兽吸收量明显低于单胃动物但反刍兽吸收量明显低于单胃动物,而且舍饲反刍兽比放牧时吸收量而且舍饲反刍兽比放牧时吸收量多l牛牛用药后用药后10~18天天,牛肝中残留量从牛肝中残留量从55.5µg/kg降低至降低至10µg/kgl羊羊用药后用药后10~24天天,羊肝中残留量从羊肝中残留量从476µg/kg降低至降低至12µg/kgl奶牛奶牛内服内服2.5mg/kg后后1天天,奶中的残留量为最高奶中的残留量为最高(0.49mg/kg),休药休药8日日则降低至则降低至0.005mg/kg;在在48~72h内奶中主要代谢物为内奶中主要代谢物为芬苯达唑砜芬苯达唑砜休药期为牛药期为牛11天、羊天、羊21天天,产奶期禁用产奶期禁用震苑案莫捎勘嘉斗审廓法咸问逾撵徒现拒掏驱嘶搬丧秦慨补挑黍菜米绢丘第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类7、阿苯达唑、阿苯达唑(Albendazole,ABZ)l别名丙硫苯咪唑、丙硫苯咪唑别名丙硫苯咪唑、丙硫苯咪唑,为白色或类白色粉末为白色或类白色粉末,无无臭臭,无味无味,在在丙酮丙酮或或氯仿氯仿中中微溶微溶,在在乙醇乙醇中凡乎中凡乎不溶不溶,在在水水中中不溶不溶,在在冰醋酸冰醋酸中中溶解溶解。

l高效广谱驱虫药高效广谱驱虫药,系苯并咪唑类药物中驱虫谱较广、杀系苯并咪唑类药物中驱虫谱较广、杀虫作用最强的一种虫作用最强的一种,对各种线虫、绦虫均有高度活性对各种线虫、绦虫均有高度活性,对对虫卵发育也有显著抑制作用虫卵发育也有显著抑制作用l因不溶于水因不溶于水,故在肠道内吸收缓慢故在肠道内吸收缓慢楔捐匆谋蝗栗博雁壹济屯泅孕坪注锐税诱曙抿甚缀麻旋辱通牡蠢锰屹址犯第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类l原药在动物体内的原药在动物体内的主要代谢产物主要代谢产物为阿苯达唑亚砜为阿苯达唑亚砜(ABZ-SO)、阿苯达唑砜、阿苯达唑砜(ABZ-SO2)和阿苯达唑和阿苯达唑-2-氨砜氨砜(ABZ-NH2-SO2),前者为杀虫的活性成分在体内分布量依次前者为杀虫的活性成分在体内分布量依次为肝、肾和肌肉占内服后血药达峰时间为为肝、肾和肌肉占内服后血药达峰时间为2~4h,并且持并且持续续15~24hl原药与亚砜代谢物在血中的浓度极低原药与亚砜代谢物在血中的浓度极低,半衰期为半衰期为8.5~10.5h24h内约内约85%的给药量经的给药量经肾肾排出排出,13%随随粪粪排排出瑰涅克铡僵鸣瓷鼓纶臀夯收祁盘檀袜亡萨暖融侍攒纪孵熄少敞曲滁恐蕴划第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类l牛和羊残留消除研究表明牛和羊残留消除研究表明,用药后数日内组织中的代谢用药后数日内组织中的代谢物浓度变化很大物浓度变化很大,刚开始时主要为刚开始时主要为亚砜代谢物亚砜代谢物,接着是接着是砜砜类类和和氨砜类氨砜类代谢物。

用药后在日内代谢物用药后在日内牛肝牛肝和和牛肾牛肾中的残留中的残留物有物有95%为为结合态结合态,但但羊组织羊组织中中结合态代谢物很少结合态代谢物很少l奶牛内服奶牛内服10mg/kg后后,12h奶中亚砜代谢物残留量达峰值奶中亚砜代谢物残留量达峰值,然后迅速下降然后迅速下降,36h时未被检出时未被检出;24h砜类代谢物残留量达砜类代谢物残留量达峰值峰值,但消除缓慢但消除缓慢,需需156h可排净可排净;氨砜代谢物在奶中的氨砜代谢物在奶中的量很低量很低,36h达峰值达峰值,消除期消除期180h其他代谢物在服后其他代谢物在服后24h达峰值达峰值,48h时低于方法的检测限时低于方法的检测限,但消除期为但消除期为156h届赋薪丫撰须竣龚绍塑飘寝竭抑桅舜堕谎骸惩箍塞弘千徒栈线瞥刚爷梁砒第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类8、甲苯达唑、甲苯达唑(Mebendazole, MBZ)l别名甲苯咪唑别名甲苯咪唑,为白色、类白色或微黄色结晶性粉末为白色、类白色或微黄色结晶性粉末,在在甲酸中易溶甲酸中易溶,在冰醋酸中略溶在冰醋酸中略溶,在丙酮或氯仿中极微溶解在丙酮或氯仿中极微溶解,在水中不溶在水中不溶。

l为广谱驱虫药为广谱驱虫药,不仅对动物多种胃肠线虫有高效不仅对动物多种胃肠线虫有高效,而且对而且对某些绦虫亦有良效某些绦虫亦有良效,并且是为数不多治疗旋毛虫的良药并且是为数不多治疗旋毛虫的良药之一l甲苯达唑早在甲苯达唑早在20世纪世纪80年代已广泛用于世界各国的医学年代已广泛用于世界各国的医学和兽医临床和兽医临床蕾哨弯雄拼糠袍恳酬烟慈料珐笺跌丙相凄饵舰每椭嚎守防策哩小董垒廓蜜第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类l内服后胃肠道吸收差内服后胃肠道吸收差(5%~10%),吸收后迅速分布于血浆、吸收后迅速分布于血浆、肝、肺等肝、肺等,血药达峰时间为血药达峰时间为2~4h,半衰期半衰期2.5~5.5hl在动物肝内很少代谢在动物肝内很少代谢,代谢物为极性很强的代谢物为极性很强的羟基羟基(MBZ-OH)和氨基代谢物和氨基代谢物(MBZ- NH2)在24~48h内经粪便排泄的内经粪便排泄的原原形药物形药物约占约占80%左右左右,经尿排泄的约为经尿排泄的约为5%~10%吸收后药物药物,仅有极少量以脱羧基衍生物形式排泄仅有极少量以脱羧基衍生物形式排泄肥买层精马蛛笋跪零澎颐拟以膜漆瞧血款译耐蛀杠矗冀釉搞凄晤臻耙缚畦第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类二、组织中苯并咪唑残留和限量二、组织中苯并咪唑残留和限量l苯并咪唑类药物在动物体内的残留物与苯并咪唑类药物在动物体内的残留物与药物本身药物本身有关外有关外,还与还与给药途径给药途径、、靶组织靶组织和和消除期消除期有关。

有关l标志残留标志残留定义为定义为母体药物及其主要代谢产物的总和母体药物及其主要代谢产物的总和l阿苯达唑阿苯达唑：：ABZ用药后用药后,在停药初期在停药初期,残留物主要为残留物主要为ABZ-SO和和ABZ-SO2;而在较长的停药期而在较长的停药期,主要残留物为主要残留物为ABZ-NH2-SO2,因此标志残留为因此标志残留为ABZ-SO 、、 ABZ-SO2和和ABZ-NH2-SO2 的总和的总和,以以ABZ计l对对FEB、、FBZ和和OFZ,标志残留为标志残留为FBZ、、OFZ(FBZ-SO)，，和和FBZ-SO2的总和的总和,以以FBZ-SO2计药物消除研究表计药物消除研究表明明,OFZ和和FBZ-SO2是组织中最常见的残留物是组织中最常见的残留物钢肿闷败乏氧遏穷钩怠卖斜街萤牺恨朗烙冲严谱难羊圣烦虎氛焕完滚啮也第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类l在在蛋蛋中中, 氟苯达唑氟苯达唑FLU标志残留主要为标志残留主要为母体药物母体药物,而在鸟而在鸟类和猪可食组织中标志残留为类和猪可食组织中标志残留为FLU和和FLU-HMET,因此因此以以FLU和和FLU-HMET的总量来定义的总量来定义FLU的标志残留。

的标志残留l甲苯达唑甲苯达唑MBZ标志残留定义为标志残留定义为MBZ、、MBZ-OH和和MBZ-NH2的总和的总和,以以MBZ计残留消除研究表明计残留消除研究表明,MBZ-NH2和和MBZ-OH是组织中最持久的残留物是组织中最持久的残留物,对最高残留对最高残留限量限量(MRL)的影响最大的影响最大l噻苯达唑噻苯达唑TBZ标志残留定义为标志残留定义为TBZ和和5-OH-TBZ的总和在动物可食组织中在动物可食组织中,TBZ的母体药物是最常见的残留物的母体药物是最常见的残留物,但在牛奶中但在牛奶中,5-OH-TBZ的硫酸酯结合物的硫酸酯结合物为主要残留为主要残留媳勉盲托据留窘轿玉幼谈灭掸辖明宗汤剔菌漂灵视慈兹凌拜盎糜梯魄核笆第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类l三氯苯达唑三氯苯达唑TCB标志残留定义为标志残留定义为TCB、、TCB-SO和和TCB-SO2的总和lTCB禁止用于泌乳期动物禁止用于泌乳期动物,由于由于TCB-SO2消除时间长消除时间长,因因此它可以作为残留监测的目标化合物此它可以作为残留监测的目标化合物l奥苯达唑奥苯达唑OXI标志残留为标志残留为母体药物母体药物。

l其他苯并咪唑类药物其他苯并咪唑类药物,如如CAM、、LUX、、PAR和和BEN,在欧在欧盟禁止用于动物源食品盟禁止用于动物源食品,因此欧盟未规定因此欧盟未规定MRL值l部分苯并咪唑类药物的标志残留和最高残留限量部分苯并咪唑类药物的标志残留和最高残留限量(MRL)伸叮青殆荤跌蛆湾沉义粤缮冶皱刊誉未咏胡议失竟对砧语减羌沤峰非棠骗第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类部分苯并咪唑类药物的标志残留和最高残留限量部分苯并咪唑类药物的标志残留和最高残留限量(MRL)噎放彩卯猫拆琢唤钩颜瑶捞素匆嗡不亩溃菊趟颈姥羔柬买兑毗捡弯烫贱兢第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类三、样品处理三、样品处理l苯并咪唑类分子含咪唑环结构苯并咪唑类分子含咪唑环结构,两个氮原子具有酸碱两性两个氮原子具有酸碱两性,在适当的在适当的pH条件下条件下,分子可以质子化分子可以质子化(pKa约约5~6)或去质或去质子化子化(pKa约约12)l在酸性或碱性条件下在酸性或碱性条件下,大部分苯并咪唑类药物可解离大部分苯并咪唑类药物可解离,易易溶于水性溶剂溶于水性溶剂,并被提取并被提取,然后然后调节调节pH值使呈中性值使呈中性,用乙用乙酸乙酯抽提酸乙酯抽提。

l由于由于5-OH-TBZ在在pH值范围内都能电离值范围内都能电离,易溶于酸性或碱易溶于酸性或碱性的水溶液性的水溶液,乙酸乙酯很难将其抽提出来乙酸乙酯很难将其抽提出来定亮苟捌耐竣静悔冶卢质几店袭寂偷宅滋钻趋主填旱肮扫蔬鳃体尾柑榴倡第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类l对于对于CAM、、TCB和和TCB代谢产物代谢产物,它们都有两个或更多的它们都有两个或更多的pKa,因此溶剂提取时因此溶剂提取时,控制溶液的控制溶液的pH值尤为重要值尤为重要l三氯苯达唑三氯苯达唑(TCB)、三氯苯达唑硫化物、三氯苯达唑硫化物(TCB-SO)、、 TCB-SO2和和CAM分别在分别在pH7.3~10.9、、5.0~9.0、、3.8~8.0和和7.4~11.1呈中性呈中性,因此因此,只有当只有当pH7.4~8.0时时,所有这些分子所有这些分子都呈都呈中性中性l大部分苯并咪唑类药物在大部分苯并咪唑类药物在pH8时都呈中性时都呈中性,当预测某些苯当预测某些苯并咪唑类药物的并咪唑类药物的pKa约为约为8时时,这时欲对这些组分同时提取这时欲对这些组分同时提取变得相当困难变得相当困难l但也有例外但也有例外,如如MBZ-NO2和和OXI在在pH>8.6和和8.3,以非电离以非电离形式存在。

形式存在膘介指蔗媚忿囚哈痪蝉灰脱哉晦逊灯忻萌居页瘴卑陷猴裸贰油涡岔哑旨迅第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类1、水解、水解l肝肝和和奶奶样中苯并咪唑类药物与样中苯并咪唑类药物与蛋白结合率较高蛋白结合率较高,不易被有机溶剂提取不易被有机溶剂提取,可先将样品可先将样品水解水解后再提取后再提取游离的药物游离的药物l常用的水解方法有常用的水解方法有酸水解酸水解和和酶水解酶水解两种l酸水解酸水解通常使用无机酸通常使用无机酸,例如用例如用4moL/L盐酸于盐酸于80~110℃ ,在在1~4h即可完成水解即可完成水解l酸水解具有简便、快速、水解完全等优点酸水解具有简便、快速、水解完全等优点,因而因而被广泛采用被广泛采用红训李涉麦朱弥毯惶樊铂目赛驹颂管呻轧悉儡彩啤您跋持聪粹翻谎仁茅炳第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类酶水解酶水解l酶水解酶水解通常使用通常使用β-葡糖苷酸酶葡糖苷酸酶或或芳基硫酸酯芳基硫酸酯酶酶,前者可专一地水解葡萄糖醛酸苷结合物前者可专一地水解葡萄糖醛酸苷结合物,后者可水解硫酸酯结合物后者可水解硫酸酯结合物l由于肝样中通常存在上述两种结合物由于肝样中通常存在上述两种结合物,常使常使用用β-葡糖苷酸酶葡糖苷酸酶/芳基硫酸酯混合酶芳基硫酸酯混合酶,控制控制pH4.5~7.0,于一定温度下孵育于一定温度下孵育18~72h。

l与酸水解相比与酸水解相比,酶水解比较温和酶水解比较温和,一般不会一般不会引起药物的分解引起药物的分解,但有时水解不完全和实验但有时水解不完全和实验费用高是该法的缺点费用高是该法的缺点衫躲输霉痹糙菩修竹颅炬您顷袒笼饵涝景辖衙仇抡勺崎塌论肾甚写大俺薛第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类lTocco等发现等发现TBZ在在尿尿和和奶奶中的代谢产物主要是中的代谢产物主要是5-OH-TBZ与葡糖苷酸和硫酸酯结合物与葡糖苷酸和硫酸酯结合物,结合物用结合物用β-葡糖苷酸葡糖苷酸酶酶/硫酸酯酶或酸硫酸酯酶或酸(6mol/L盐酸回馏盐酸回馏1h)水解水解,释放出游离释放出游离的的5-OH-TBZlChuckwudebe等对等对TBZ在在蛋鸡蛋鸡和和奶牛奶牛中代谢产物进行了中代谢产物进行了研究研究,发现结合物主要是发现结合物主要是硫酸酯结合物硫酸酯结合物lMarkus等对肝样中的等对肝样中的ABZ及其相关代谢物的结合物用及其相关代谢物的结合物用酸解方法进行水解酸解方法进行水解,释放出游离的释放出游离的ABZ-NH2-SO2lCoulet等对组织中的等对组织中的TBZ蛋白结合物用蛋白结合物用碱解方法水解碱解方法水解。

开涪缔肄皑毖畸饥根峭挠轿酝矩符觉捌兑驹嗓稠日迎瑞萤师嚷硼武脆己娄第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类2、提取及净化、提取及净化l液液-液萃取液萃取(LLP)是提取苯并咪唑类药物的是提取苯并咪唑类药物的最常用方法最常用方法,通常将水性溶液调节至适当的通常将水性溶液调节至适当的pH值值,用水不相溶的有机用水不相溶的有机溶剂提取溶剂提取l用酸溶液提取时用酸溶液提取时,即包括了样品的水解过程即包括了样品的水解过程l由于苯并咪唑类药物的极性和由于苯并咪唑类药物的极性和pKa差异很大差异很大,因此因此多残多残留提取相当困难留提取相当困难,即使对单一药物即使对单一药物,母药及其代谢产物的母药及其代谢产物的同时提取亦难同时提取亦难桶扯冯嗓怯顶拖昨窝亩苔屈拦碗涩陋沿唱店诧淋畅相赘富锁今泪偏续拆劳第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类例如例如lMBZ及其两个代谢产物及其两个代谢产物MBZ-OH和和MBZ-NH2,由于由于MBZ和和MBZ-NH2呈碱性呈碱性,pKa分别是分别是3.5和和5.5,在在pH>7.5时时,这两种化合物不被电离这两种化合物不被电离;MBZ-OH含酸性的含酸性的-OH,其其pKa为为9.8,在在pH<7.8时不被电离。

因此时不被电离因此,溶液只有在溶液只有在pH7.5~7.8间间,所有化合物不被电离所有化合物不被电离,呈中性呈中性,这时可用极这时可用极性溶剂性溶剂(如如:乙腈、甲醇、水乙腈、甲醇、水-乙腈、水乙腈、水-甲醇等甲醇等)来提取汰聂想蛇荚锯臻汝倚酞季晦铱屋龙惋驹益慑博窿挺嘴轧纯徐坡推佯碧炳该第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类(1)血浆、血清或其他生物液体血浆、血清或其他生物液体l生物体液样品中的苯并咪唑类可用生物体液样品中的苯并咪唑类可用有机溶剂提取有机溶剂提取,直接直接进样分析进样分析lBogan等将血浆样品调节至等将血浆样品调节至pH7.4,用乙酸乙酯来提取用乙酸乙酯来提取FBZ、、OFZ和和ABZlHoaksey等将血浆样品用乙腈脱蛋白等将血浆样品用乙腈脱蛋白,再用二氯甲烷提取再用二氯甲烷提取ABZ和和ABZ-SOlAlvinerie用乙酸乙酯提取血浆中用乙酸乙酯提取血浆中TCB、、TCB-SO和和TCB-SO2,以及以及TBZ和和5-OH-TBZ,直接用直接用HPLC-UV测定杏狡则董鳞示品盛黎怒跌箕纤娱藤菜文顾男掣夺绝躺奄发惫漏隔毫翘帜琉第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类lAllan等将血浆样品用酸性溶液稀释后过等将血浆样品用酸性溶液稀释后过C18小柱小柱,依次用依次用20mL水、水、0.5mL甲醇甲醇+水水(40+50)和和0.4mL甲醇淋洗甲醇淋洗,最最后用后用1.6mL甲醇洗脱甲醇洗脱,甲苯达唑及其代谢物的回收率大于甲苯达唑及其代谢物的回收率大于80%。

lHennessy等将这一方法用于胆汁中等将这一方法用于胆汁中TCB的提取的提取,但样品但样品过柱前先用乙酸乙酯提取过柱前先用乙酸乙酯提取,后来也用于血浆样品中后来也用于血浆样品中ABZ的提取l自动萃取仪自动萃取仪具有省时、省力、重复性高的优点具有省时、省力、重复性高的优点,应用日应用日趋广泛lRouan等采用自动萃取仪、等采用自动萃取仪、C18固相萃取柱提取固相萃取柱提取/净化血净化血浆样品中浆样品中TCB,回收率可达到回收率可达到90%以上拼懦暗啮嘶炙屏宦燃轻旗纵读钒咱魂貉肯榆赛沫潜甸槛卜燕湘昏格边绷唉第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类(2)组织组织l动物组织中的苯并咪唑类提取动物组织中的苯并咪唑类提取一般用有机溶剂一般用有机溶剂,并经并经LLP和和SPE净化l有人采用有人采用LLP和和SPE相结合方法进行净化相结合方法进行净化,用用HPLC-UV检测也有人采用检测也有人采用LLP的单一净化方法的单一净化方法,用选择性高的用选择性高的荧光检测或荧光检测或LC-MS/MS检测l虽然虽然LLP净化方法选择性较差净化方法选择性较差,但适合于苯并咪唑类的但适合于苯并咪唑类的多组分提取多组分提取,而用复杂的净化方法可能回收率较低。

而用复杂的净化方法可能回收率较低安乏蛛慢僳啡疙婆肮脆腺紫港护腮瞻狄儿乒止勿庄乞牌驾砷估浩粪蚜纳跨第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类lBrandon等用二甲亚砜等用二甲亚砜-水水(10+90)来提取肝组织中的来提取肝组织中的TBZ,在在ELISA测定前用测定前用PBS稀释lBrandon等采用类似的方法等采用类似的方法,用二甲亚砜用二甲亚砜-水水(10+90)提取提取肝组织中肝组织中11种苯并咪唑类残留种苯并咪唑类残留,包括水溶性低的包括水溶性低的FBZlMarti等用乙腈提取肌肉、肝脏、肾脏组织中等用乙腈提取肌肉、肝脏、肾脏组织中8种苯并咪种苯并咪唑类残留唑类残留,提取物用提取物用LLP净化净化,包括正己烷、饱和氯化钠包括正己烷、饱和氯化钠和二氯甲烷洗涤和二氯甲烷洗涤,然后用然后用C18固相萃取柱浓缩固相萃取柱浓缩/净化净化,再用再用HPLC-UV或或GC-MS分析分析,除除OFZ外外,回收率均在回收率均在65%以以上上,OFZ在肝脏和肾脏中的回收率仅为在肝脏和肾脏中的回收率仅为45%和和39%刷烩哨需火御阮致臭旺集针洪熙邻瘟露迷起吴洋门量下掏痕松烈承硫姻结第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类lFarrington等用乙酸乙酯提取肝组织中等用乙酸乙酯提取肝组织中5种苯并咪唑类残种苯并咪唑类残留留,并用酸性氧化铝和并用酸性氧化铝和C18柱净化柱净化,HPLC-UV分离测定分离测定,回回收率在收率在73%~90%。

lBlanchflower等用甲醇等用甲醇-水水(20+7)提取肝和肌肉组织中提取肝和肌肉组织中FBZ和和OFZ,提取液用石油醚洗涤提取液用石油醚洗涤,经磷酸盐缓冲液稀释经磷酸盐缓冲液稀释后后,再用乙醚再用乙醚-乙酸乙酯乙酸乙酯(60+40)洗涤洗涤,FBZ和和OFZ的回收的回收率大于率大于80%和和70%lWilson等用乙酸乙酯提取肌肉和肝组织中等用乙酸乙酯提取肌肉和肝组织中8种苯并咪唑种苯并咪唑类残留lWilson方法被广泛应用于动物组织中苯并咪唑类残留的方法被广泛应用于动物组织中苯并咪唑类残留的提取提取/净化痴门饺戏搐瓷擞绝啄氟粳桑销搂吏痒烹惑遗凹耍霓饥以敌宜棠近运绕咒讯第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类lHajee等对鳗鱼肉的均质液用磷酸盐缓冲液调节至等对鳗鱼肉的均质液用磷酸盐缓冲液调节至pH7.5,发发现只有在现只有在pH7.5~7.8之间之间,所有的所有的MBZ标志残留物标志残留物(MBZ、、MBZ-OH、、MBZ-NH2)呈中性呈中性,能被乙酸乙酯提取能被乙酸乙酯提取;l在在SPE净化中分别采用正相和反相柱净化中分别采用正相和反相柱,发现氨基丙基柱较合发现氨基丙基柱较合适适;在过氨基丙基柱前在过氨基丙基柱前,先用正己烷调节乙酸乙酯提取液的先用正己烷调节乙酸乙酯提取液的极性极性,上样后上样后,氨基丙基柱用异辛烷淋洗氨基丙基柱用异辛烷淋洗,再用甲醇洗脱再用甲醇洗脱;MBZ、、MBZ-NH2和和MBZ-OH的平均回收率分别为的平均回收率分别为80%、、60%和和85%。

lCannavan等用乙酸乙酯提取肝、肾和肌肉组织均质液等用乙酸乙酯提取肝、肾和肌肉组织均质液(调调节至节至pH7.0)中中TBZ和和5-OH-TBZ,过氰丙基过氰丙基(CN)SPE柱柱,TBZ和和5-OH-TBZ的回收率分别为的回收率分别为96%~103%和和70%~85%,若采用若采用氘化氘化TBZ作为内标物作为内标物,可提高可提高5-OH-TBZ回收率的重现性回收率的重现性烦郁刮迟况嚎三涕出挣芭腐戮制馅见泛芦蝶嫁梁察础绝惋鸡哮胳租励泥嘘第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类lCapece等在等在pH8.0条件下用乙酸乙酯提取肌肉、脂肪和条件下用乙酸乙酯提取肌肉、脂肪和肾脏组织中的肾脏组织中的FBZ标志残留物标志残留物,提取液直接提取液直接HPLC分析lDe Ruycke等在碱性条件下用乙酸乙酯提取鸡蛋和肌肉等在碱性条件下用乙酸乙酯提取鸡蛋和肌肉组织中组织中FLU、、FLU-HMET和和FLU-HMET,提取液蒸干提取液蒸干,再用甲醇和正己烷进行液再用甲醇和正己烷进行液-液分配净化液分配净化,LC-MS/MS分析分析,FLU标志残留物的回收率在标志残留物的回收率在70%(鸡蛋鸡蛋)~87%(肌肉肌肉)之间。

之间lEdder等在碱性条件下从肝脏和肌肉中提取了等在碱性条件下从肝脏和肌肉中提取了11种苯并种苯并咪唑类药物和左旋咪唑残留咪唑类药物和左旋咪唑残留,用用MBC作为内标作为内标,提取物提取物经甲醇和正己烷液经甲醇和正己烷液-液分配净化液分配净化,回收率大于回收率大于70%l等等等等墙盗馁森群络角彼证竖己豆厕灯琶电禄割誉拉赴卵绿米它治膀戮雕或路嵌第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类(3)牛奶和奶制品牛奶和奶制品l奶制品相对于组织样品要容易处理些奶制品相对于组织样品要容易处理些,而且牛奶而且牛奶含更少的色素和内源性干扰物含更少的色素和内源性干扰物l牛奶样品一般要牛奶样品一般要脱蛋白和脂肪脱蛋白和脂肪预处理预处理,再调节溶再调节溶液液pH值值,用水不相溶的有机溶剂用水不相溶的有机溶剂(如如:乙酸乙酯、乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷氯仿、二氯甲烷)来来提取提取,pH值的选择与被测物值的选择与被测物的种类和数量有关的种类和数量有关点互返汽捎彤修县氛讨垒拓絮耍逃墅频捐飞客傀姨纯耐测索泞严肘讣旁憨第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类例如例如lTocco等发现在等发现在pH6时时,用用乙酸乙酯乙酸乙酯可提取牛奶中可提取牛奶中TBZ和和5-OH-TBZ。

lFletouris等发现在等发现在pH9.8时时,用乙酸乙酯提取牛奶中用乙酸乙酯提取牛奶中ABZ、、ABZ-SO和和ABZ-SO2的效果最好的效果最好,回收率分别为回收率分别为81%、、78%和和100%l后来他们在后来他们在pH10时时,用乙酸乙酯提取牛奶中用乙酸乙酯提取牛奶中10种苯并咪种苯并咪唑类残留唑类残留,比较了不同的比较了不同的pH值值(3~11.5)对提取效率的影对提取效率的影响响,发现发现pH10时大多数苯并咪唑类药物的回收率较高时大多数苯并咪唑类药物的回收率较高,平均回收率为平均回收率为79%~100%, FBZ的回收率为的回收率为56%~66%lFlotouris等还试验了在等还试验了在pH2~9条件下用乙腈提取条件下用乙腈提取,FBZ的的回收率接近回收率接近100%,表明用乙腈提取时表明用乙腈提取时,pH值的变化对提取值的变化对提取效率影响不大效率影响不大雨瀑护犁斗肚匣孟康症益琳矿衔俯振烷强熙罚圾图亚提稿泳歉巩劲盖郭浓第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类牛奶中多残留分析的提取和净化方法牛奶中多残留分析的提取和净化方法豢剩水拖傍网篆听东何奋合攀租穗狭窟耙歪拽啄贿慕兜级宫衰愚膊霉丁隙第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类三、分析方法三、分析方法l苯并咪唑类药物残留的测定方法主要有苯并咪唑类药物残留的测定方法主要有生物检生物检测法测法、、分光光度法分光光度法、、薄层色谱法薄层色谱法、、免疫分析法免疫分析法、、气相色谱法气相色谱法和和液相色谱法液相色谱法，采用紫外、荧光和，采用紫外、荧光和质谱检测。

质谱检测钵腑莉淆箩熄孜锋和橇涝吸放泞脂钨官颁买蚜娩罗部苔渊寿骇惨级眨介袄第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类1、生物检测法、生物检测法l生物检测法曾被用来检测食品中苯并咪唑类残生物检测法曾被用来检测食品中苯并咪唑类残留留,但现在大部分用来评价驱虫剂的效能但现在大部分用来评价驱虫剂的效能l生物检测法首先用生物检测法首先用TLC板将残留物分离出来板将残留物分离出来,然然后用含培养剂和生物指示剂的溶液喷雾后用含培养剂和生物指示剂的溶液喷雾TLC板板,TLC板上抑制生物繁殖的区域表明药物残留的板上抑制生物繁殖的区域表明药物残留的存在存在,抑制区域的大小与残留物的浓度有关抑制区域的大小与残留物的浓度有关蹬爬当雇挡撵截址昏镣胚柿狭抡稿渣圈沫晤抄族淄农纪父智强宋滩齐提呵第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类lErwin等建立了一种检测等建立了一种检测BEN的生物学方法；的生物学方法；lPeterson等建立了农作物中等建立了农作物中BEN和和MBC的生物检测法的生物检测法,提取液通过硅胶提取液通过硅胶TLC板分离板分离BEN和和MBC残留物残留物,随后用随后用琼脂和青霉素芽孢混合液喷雾琼脂和青霉素芽孢混合液喷雾,室温培养室温培养20h,生物检测生物检测法的灵敏度比紫外分光光度法高出十倍左右。

法的灵敏度比紫外分光光度法高出十倍左右lDew等利用猪蛔虫幼体对等利用猪蛔虫幼体对TBZ、、ABZ、、ABZ-SO、、 ABZ-SO2和和MBZ敏感性敏感性,建立了一种生物筛选法建立了一种生物筛选法;l生物检测法作为检测食品中苯并咪唑类残留的生物检测法作为检测食品中苯并咪唑类残留的筛选方法筛选方法,具有具有成本低成本低的优点的优点,但生物体对苯并咪唑类药物的敏感但生物体对苯并咪唑类药物的敏感性差异很大性差异很大,实际应用中还需作进一步的评估实际应用中还需作进一步的评估挥芳拆峦私藐拾嗅炳晋挝炕茎雷杭澜米浮樱棵闲秃仰姓狂武骄孰钓裕馏改第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类2、分光光度法、分光光度法l采用采用分光光度法测定农作物中的分光光度法测定农作物中的BEN残留残留lPease等先将等先将BEN转化为转化为2-氨基苯并达唑氨基苯并达唑(2-AB),然后用然后用溴衍生化溴衍生化,再进行荧光光度法再进行荧光光度法(λex285nm,λem335nm)或或紫外紫外-可见分光光度法可见分光光度法(445nm)测定测定,检测限为检测限为100µg/kgl2-AB、、TBZ和和2-(2-呋喃呋喃)-苯并咪唑本身具有荧光苯并咪唑本身具有荧光,然而然而只有只有2-AB与溴反应可产生有色衍生物。

因此与溴反应可产生有色衍生物因此,溴化后通溴化后通过紫外过紫外-可见分光光度法测定可见分光光度法测定,可区别可区别2-AB和其他苯并咪和其他苯并咪唑类药物唑类药物lAharonson等采用柱层析法净化农作物中的等采用柱层析法净化农作物中的BEN和和TBZ残留残留,再用荧光光度法测定再用荧光光度法测定硬花朱稀屈陡维滤桂非赔直杖引茨挣悸枯慑蓉茶绰登保绿县穗巡斧队枕拥第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类lBaeyens等利用等利用MBZ和和FLU在碱性条件下与在碱性条件下与0.3%过氧化氢反应产生荧光过氧化氢反应产生荧光,检测了制剂中药物检测了制剂中药物含量含量,这一方法也可用于四咪唑、右旋咪唑和左这一方法也可用于四咪唑、右旋咪唑和左旋咪唑的检测旋咪唑的检测焙张挽蜒冠疥琴毖撅妮抢感拇烈僻筛阴俭罗嫁珊鲸搂融耻东桓摄笔友拷毡第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类3、薄层色谱法、薄层色谱法lTLC作为作为半定量分析方法半定量分析方法,适合于食品中苯并咪唑类残适合于食品中苯并咪唑类残留检测的留检测的筛选筛选lNorman等采用等采用TLC和荧光检测法和荧光检测法(λex 302nm, λem360nm)测定柑橘类水果中的测定柑橘类水果中的TBZ。

lWhite等采用等采用TLC法检测农作物中法检测农作物中MBC残留残留,板上喷雾板上喷雾一层荧光指示剂一层荧光指示剂,用氯仿用氯仿-醋酸盐醋酸盐-乙酸混合溶剂乙酸混合溶剂(190+10+4)展开展开,在在254nm处紫外检测处紫外检测,检测限为检测限为50µg/kglCorti等采用等采用TCL法检测马铃薯中法检测马铃薯中TBZ和其他残留物和其他残留物,样样液滴加在液滴加在C8板上板上,用乙醇用乙醇-水水(10+3)展开展开,在在248nm处紫处紫外检测外检测,但这种方法的但这种方法的灵敏度比高效液相色谱法低灵敏度比高效液相色谱法低圆涯猛黄煞雁勃择送大掳蒋畔蓝皂板水腕每剖泄郑噶麓缉津十溢裔瑶播庙第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类lCorti等还采用等还采用TLC法还测定了水果中法还测定了水果中BEN、、MBC和和TBZ,以氯仿以氯仿-环己胺环己胺-甲醇甲醇(6+1+01)作展开剂作展开剂,在在NH2-HPTLC板上将板上将MBC和和TBZ的残留物分离出来的残留物分离出来,285nm处紫外检测处紫外检测lAbjean等建立了等建立了TLC法检测肝组织中法检测肝组织中ABZ-NH2-SO2的筛选方法的筛选方法,以乙腈以乙腈-氢氧化铵氢氧化铵(10+0.6)作展开剂作展开剂,在涂有荧光指示剂的硅胶板上将在涂有荧光指示剂的硅胶板上将ABZ-NH2-SO2分离分离出来出来,检测限低于检测限低于500µg/kg。

知葬划蹭膨熬篆彩软柳杂遮嘿癣侮焕奖绰恩鉴剖巧壕亡渴哉尧喝到泪讥昼第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类4、免疫分析法、免疫分析法l免疫分析法是一种简便、灵敏、选择性高的检测方法免疫分析法是一种简便、灵敏、选择性高的检测方法l一般情况下一般情况下,生物样品如血浆、血清、牛奶能够直接测定生物样品如血浆、血清、牛奶能够直接测定或者稀释后测定或者稀释后测定l早期早期,放射免疫法放射免疫法被应用于测定动物组织和农作物中的苯被应用于测定动物组织和农作物中的苯并咪唑类残留并咪唑类残留lNerenberg等建立了等建立了放射免疫法放射免疫法检测血浆中的检测血浆中的OFZ,多克多克隆抗体隆抗体通过兔通过兔免疫接种免疫接种OFZ和和多聚赖氨酸载体多聚赖氨酸载体培养得到培养得到,后来这种方法应用于绵羊脂肪组织中后来这种方法应用于绵羊脂肪组织中OFZ残留的检测残留的检测lNewsome等采用等采用多克隆抗体多克隆抗体、、放射免疫法放射免疫法检测农作物中检测农作物中BEN及其主要代谢产物及其主要代谢产物MBC,多克隆抗体多克隆抗体通过兔接种通过兔接种半抗半抗原原-2-氨基苯并咪唑氨基苯并咪唑和和人血清蛋白人血清蛋白培养得到。

培养得到沁组便秽眯咎盅菌喻衫忆戮遭格能纫妙沿谨余捣猜熟萝仗信累域愤岳纳恶第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类ELISA检测检测l近来近来,ELISA被普遍应用且大大超过了放射免疫检测法被普遍应用且大大超过了放射免疫检测法lBrandon等建立了一种等建立了一种竞争性竞争性ELISA法法检测肝组织中的检测肝组织中的TBZ残留残留,单克隆抗体单克隆抗体通过鼠接种通过鼠接种TBZ和和5-OH-TBZ半抗半抗原原,在牛血清蛋白在牛血清蛋白(BSA)中培养得到中培养得到l他们发现他们发现,用用TBZ免疫得到的抗体对免疫得到的抗体对TBZ和和5-OH-TBZ特特异性高异性高,而用而用5-OH-TBZ免疫得到的抗体特异性较差免疫得到的抗体特异性较差,对对CAM和和TBZ-NH2有交叉反应对不含噻唑环的苯并咪有交叉反应对不含噻唑环的苯并咪唑类药物唑类药物(如如:ABZ、、MBZ和和FBZ),结果表明没有明显的结果表明没有明显的交叉反应交叉反应宇赚书塞柄粉涩湿怪豫逊打正窟霸蜂驳嘛锌直疡剿凉抚办厨沫鞭太封菌障第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类l基于基于辣根过氧化物酶结合辣根过氧化物酶结合(HRP)的竞争性的竞争性ELISA法法已被用已被用于于肝肝组织提取液以及水果、蔬菜和果汁中组织提取液以及水果、蔬菜和果汁中TBZ的检测的检测,果果汁样品稀释后可直接检测。

汁样品稀释后可直接检测lBrandon等研制出一种鼠单克隆抗体等研制出一种鼠单克隆抗体,通过鼠接种通过鼠接种ABZ的的琥珀酰胺半抗原和琥珀酰胺半抗原和BSA载体制得的抗体载体制得的抗体,对对11种苯并咪唑种苯并咪唑氨基甲酸酯有良好的交叉反应氨基甲酸酯有良好的交叉反应,包括包括ABZ、、FBZ、、OXI、、MBZ、、FLU、、MBC和一些代谢产物和一些代谢产物,但对噻苯达唑类但对噻苯达唑类(TBZ、、CAM和和5-OH-TBZ)没有交叉反应没有交叉反应l另外另外,他们还建立了一种基于辣根过氧化物酶结合的竞争他们还建立了一种基于辣根过氧化物酶结合的竞争性性ELISA法法,用来检测牛肝提取液中的苯并咪唑残留用来检测牛肝提取液中的苯并咪唑残留,l后被用于牛奶中后被用于牛奶中FBZ残留的检测残留的检测;牛奶样品测定前用牛奶样品测定前用PBS-Tween-BSA稀释贤粕深击孺更舆拎慰实赂辐讽淬岛萧择他剃帘谋奸咋违搜榨诲庇痕猴讨狭第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类lBushway等应用等应用ELISA试剂盒对加工或未加工的果蔬中试剂盒对加工或未加工的果蔬中TBZ残留检测进行了评估残留检测进行了评估,用用BEN-MBC半抗原制得的多克半抗原制得的多克隆抗体对隆抗体对TBZ有显著交叉反应有显著交叉反应,可被用于食品中的检测。

可被用于食品中的检测lNewsome等建立了等建立了ELISA法检测农作物中法检测农作物中BEN和和TBZ残留残留,多克隆抗体通过兔免疫接种制得多克隆抗体通过兔免疫接种制得,抗原是由人血清蛋白和抗原是由人血清蛋白和TBZ、、MBC(BEN的降解产物的降解产物)的琥珀酰胺半抗原相偶合得的琥珀酰胺半抗原相偶合得到lCrooks等研制出一种多克隆抗体等研制出一种多克隆抗体,对对8种苯并咪唑氨基甲酸种苯并咪唑氨基甲酸酯类药物有交叉反应以酯类药物有交叉反应以ABZ琥珀酰胺和琥珀酰胺和HAS载体蛋白偶载体蛋白偶合物作为抗原合物作为抗原,抗体通过羊免疫接种制得抗体通过羊免疫接种制得,建立了基于建立了基于HRP的竞争性的竞争性ELISA法检测牛肝组织中的苯并咪唑类残留法检测牛肝组织中的苯并咪唑类残留站菠资铸游袒匀碍波壁界缺挟栓咆蛮奎眼揍泊批鹅辩锐痊污疟俺挑葛硝陆第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类5、气相色谱法、气相色谱法l只有只有少数少数苯并咪唑类药物苯并咪唑类药物(如如:TBZ、、5-OH-TBZ)可可直接直接用用GC法分析法分析lLafuente等采用硅酮键合相的等采用硅酮键合相的毛细管柱毛细管柱(10m× 0.53mm)分离水果中分离水果中TBZ残留物残留物,分别用分别用氮磷检测器氮磷检测器(NPD)和和电子电子捕获检测器捕获检测器(ECD)检测检测,发现发现NPD检测的灵敏度更高检测的灵敏度更高,LOD为为10µg/kg。

lOishi等采用等采用GC-NPD法检测法检测TBZ,石英毛细管柱石英毛细管柱(25m× 0.2mm)分离分离,LOD为为10µg/kgl大部分大部分苯并咪唑类药物极性较高苯并咪唑类药物极性较高,难以气化难以气化,热稳定性差热稳定性差,故故GC法分析需要法分析需要衍生化衍生化拌愈悄道邦才庆掸棚虑叙康周冤牡垒酿虾疫悍兹蠕篡弱童贱隶冒踞做楼鸯第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类衍生化衍生化l由于苯并咪唑类分子结构上含由于苯并咪唑类分子结构上含氨基氨基和和羟基羟基,可与衍生剂可与衍生剂发生酰化、硅烷化和烷基化反应发生酰化、硅烷化和烷基化反应l常用的常用的酰化衍生酰化衍生剂有三氟乙酸酐剂有三氟乙酸酐(TFA)、七氟丁酸酐、七氟丁酸酐(HFB)和五氟苄基酰氯和五氟苄基酰氯(PFB-CO-Cl);l硅烷化硅烷化试剂有试剂有N,O-双三甲硅基乙酰胺双三甲硅基乙酰胺(BSA)、、N-甲基甲基-N-(叔丁基二甲基硅烷基叔丁基二甲基硅烷基)三氟乙酰胺三氟乙酰胺(MTBSTFA)和和N-甲基甲基-(三氟乙酰胺三氟乙酰胺) (MBTFA);l烷基化烷基化衍生剂有碘甲烷、溴代五氟苯、五氟苄基溴衍生剂有碘甲烷、溴代五氟苯、五氟苄基溴(PFB-Br)、二甲基乙缩醛、二甲基乙缩醛-二甲基甲酰胺二甲基甲酰胺(DMA-DMF)和和氢氧化三甲基苯胺氢氧化三甲基苯胺(TMAH)。

咳渔绑蛤频僚灌绰阿玖酝杆聚员私哮软坚万域质慷泉蔗欺帐宋喻干酒郑泛第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类l另外也可以将氨基甲酸酯官能团水解后形成氨基另外也可以将氨基甲酸酯官能团水解后形成氨基,再进再进行酰化、硅烷化和烷基化反应行酰化、硅烷化和烷基化反应l衍生物经衍生物经GC分离后分离后,可采用可采用电子捕获检测电子捕获检测、、氮磷检测氮磷检测和和质谱质谱(MS) 检测lJacob等用等用N,O-双三甲硅基乙酰胺衍生化双三甲硅基乙酰胺衍生化GC-MS法法,测测定了定了TBZ残留物的光分解产物残留物的光分解产物,后来用相同的方法证实后来用相同的方法证实了尿中了尿中CAM代谢物的结构式代谢物的结构式lVan den Heuvel等建立了柱上甲基化衍生、等建立了柱上甲基化衍生、GC-MS法测法测定定CAM残留物残留物,进样前残留物溶解于进样前残留物溶解于0.125mol/L的三乙的三乙基氢氧化铵的甲醇溶液中基氢氧化铵的甲醇溶液中料紊旧劝滴客除押说圈纠宫云陆梦喻公犀夹疆伴即橙讯仟惕拉营恨您志兽第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类lTanaka等用等用GC-FID法测定法测定TBZ的甲基衍生物的甲基衍生物,衍生化是通衍生化是通过在乙腈中二甲基甲酰胺和二甲基乙缩醛反应过在乙腈中二甲基甲酰胺和二甲基乙缩醛反应(120℃ 、、40min),该方法可检测出水果中该方法可检测出水果中TBZ残留量残留量100µg/kg。

lPhysalo等将等将BEN通过乙酸酐衍生化通过乙酸酐衍生化(100℃ 、、30min),毛细毛细管管GC-NPD测定测定,检测限检测限10µg/kg,但采用但采用GC-ECD检测检测,灵敏灵敏度约降低度约降低10倍lBardalaye等对等对Physalo的方法作了改进的方法作了改进,用来检测水果中的用来检测水果中的TBZ残留lMarkus等建立了衍生化等建立了衍生化GC-MS-EI法测定组织中的法测定组织中的ABZ-NH2-SO2残留lBalizs等用等用PFB-Br衍生化衍生化,毛细管毛细管GC-高分辨质谱法高分辨质谱法(HRMS)测定组织中的测定组织中的TBZ和和ABZ残留峭庚蜂植犹藏挨毙品唐檄矛羔亦酌丰崔熔佛斌笛饮辰车取垮群姨转涡鸦废第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类6、液相色谱法、液相色谱法lHPLC法被广泛应用于动物组织中苯并咪唑类残留的分法被广泛应用于动物组织中苯并咪唑类残留的分析析,通常采用反相柱如通常采用反相柱如C18、、C8柱分离柱分离,也有采用正相柱也有采用正相柱如如uBondapak NH2柱分离存在问题：存在问题：l采用硅胶基质的采用硅胶基质的RP-HPLC法测定苯并咪唑类时法测定苯并咪唑类时,硅胶键硅胶键合相表面残余的带负电荷硅醇基能强烈吸附苯并咪唑类合相表面残余的带负电荷硅醇基能强烈吸附苯并咪唑类药物药物,导致导致保留时间过长、峰拖尾或变形保留时间过长、峰拖尾或变形。

l当流动相在弱酸性或中性时当流动相在弱酸性或中性时(pH5~7),苯并咪唑类的离子苯并咪唑类的离子化被抑制化被抑制,最后出峰的组分保留时间较长最后出峰的组分保留时间较长,峰展宽严重峰展宽严重;当流动相为酸性时当流动相为酸性时(pH2~3),苯并咪唑类的离子化增强苯并咪唑类的离子化增强,先出峰的组分容易分离先出峰的组分容易分离,但后出峰的组分但后出峰的组分拖尾严重拖尾严重公傍兢棵赃渤芳粘背燥庐苍糊半米捐席汐窖鸦厅筑赤普屋镇缔僵蔡誓弊涌第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类解决办法：解决办法：l为降低游离硅醇基的吸附作用和增加苯并咪唑类药物在为降低游离硅醇基的吸附作用和增加苯并咪唑类药物在流动相中的溶解性流动相中的溶解性,可采取可采取离子抑制离子抑制或或离子增强离子增强的方法的方法来解决l通过通过调节流动相的调节流动相的pH值值、加入、加入离子对试剂离子对试剂、、掩蔽剂掩蔽剂、、盐盐和较高比例的和较高比例的有机改性剂有机改性剂等等,对流动相进行优化对流动相进行优化l例如例如,在酸性流动相中加入四丁基铵阳离子在酸性流动相中加入四丁基铵阳离子,可改善苯并可改善苯并咪唑类的色谱性能咪唑类的色谱性能,消除峰变形消除峰变形,提高分辨率。

提高分辨率痪昆妙乙聚聪阀仑了别尚拳秀搀彝涵齿髓盒谗先囊篷札爪肿扭穗袒闺锡鼠第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类l早期早期,分离柱有采用分离柱有采用硅胶柱硅胶柱或或阳离子交换柱阳离子交换柱lKarlaganis等用硅胶柱分离血浆中的等用硅胶柱分离血浆中的BNZ,以乙腈以乙腈-氯仿氯仿饱和水溶液饱和水溶液-甲酸甲酸(75+92.5+0.25)作流动相作流动相lAlvinerie等用硅胶柱分离等用硅胶柱分离TCB、、TCB-SO、、 TCB-SO2和和OFZ,在在15min内获得良好的分离内获得良好的分离lKirkland等用阳离子交换柱分离植物和土壤中的等用阳离子交换柱分离植物和土壤中的BEN残残留lArenas等用强阳离子交换柱分离牛奶中的等用强阳离子交换柱分离牛奶中的TBZ和和5-OH-TBZ幻寐燎间佛汗河宾绒昌八筹袭嫂秤彬寄虽绣洗踢盆摆甘豺圆勾妙晦腔未赊第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类lBogan等最早采用等最早采用C18柱柱分离分离8种苯并咪唑类残留种苯并咪唑类残留,分析时间分析时间14min,但分离度较差但分离度较差。

lLong等和等和Wilson等分别建立了等分别建立了多残留多残留RP-HPLC法法分离分离8种种苯并咪唑类药物苯并咪唑类药物,分析时间为分析时间为35min,采用梯度洗脱采用梯度洗脱,可改善可改善分离度lRose用用C8柱柱、、二元泵梯度洗脱二元泵梯度洗脱,35min内分离内分离OFZ和和9种代种代谢产物lRoudaut等用等用C18柱柱,二元泵梯度洗脱二元泵梯度洗脱,分离了分离了10种苯并咪唑种苯并咪唑类残留类残留,除除OXI和和OFZ外外,所有残留物在所有残留物在16min内获得分离内获得分离信蒸铱丑茵涣钥邪粘钡绅色羽涟缎料棒周士擎希寂寨扎亚局啡包物阿遇吐第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类lNegro等采用等采用离子对色谱法离子对色谱法分离血浆和尿中分离血浆和尿中TCB-SO和和TCB-SO2,考察了影响色谱性能的实验参数考察了影响色谱性能的实验参数,如溶液如溶液pH、、有机改性剂含量、离子对试剂有机改性剂含量、离子对试剂(烷基磺酸钠烷基磺酸钠)的烷基链长的烷基链长,结果表明结果表明,最适宜的流动相为最适宜的流动相为0.05mol/L磷酸缓冲液磷酸缓冲液(pH7.0)-乙腈乙腈(55+45)含含0.001mol/L癸烷磺酸钠。

癸烷磺酸钠lDe Ruyck等建立了等建立了离子对色谱法离子对色谱法分离分离FBZ、、TBZ、、ABZ、、OXI和和LEV残留的方法残留的方法,采用梯度洗脱采用梯度洗脱,辛烷磺酸钠作为辛烷磺酸钠作为离子对试剂离子对试剂,用磷酸调节流动相用磷酸调节流动相pH3.5离激颈泌然邻母峰瘴界恶假引羽贾因见之洋沁枣瞩啄卵珊财驱刚落杜晦互第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类检测器检测器l苯并咪唑类及其代谢物在苯并咪唑类及其代谢物在245nm和和295nm处有强的吸收处有强的吸收,可用可用紫外检测紫外检测在295nm处摩尔吸收系数相对较低处摩尔吸收系数相对较低(>10000),但干扰少但干扰少,吸收峰稳定、灵敏度足够吸收峰稳定、灵敏度足够,应用较应用较多l对于本身有荧光的化合物对于本身有荧光的化合物,如阿苯达唑及其代谢物和噻如阿苯达唑及其代谢物和噻苯达唑及其代谢物苯达唑及其代谢物,可用可用荧光检测荧光检测,内源性杂质干扰小、内源性杂质干扰小、检测灵敏度高检测灵敏度高l光电二极管阵列检测光电二极管阵列检测(PDA)可提供化合物的吸收光谱图可提供化合物的吸收光谱图(200~700nm),与标准品谱图进行对照与标准品谱图进行对照,可对样品作出初可对样品作出初步的定性判断。

步的定性判断雷荚互应赃讶匀忍琶伐锰豢吻尸坛竟刘闷初官俊明惦搔斥银赂弃积向块俱第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类lPDA检测器价格低廉、应用广检测器价格低廉、应用广,但在专一性和灵敏度上但在专一性和灵敏度上欠高欠高,特别在检测动物组织中痕量的药物残留时有一定特别在检测动物组织中痕量的药物残留时有一定局限性l质谱检测质谱检测(MS) 特别是串联质谱检测特别是串联质谱检测(MS/MS) 作为通用型作为通用型检测器检测器,具有高灵敏和高选择性的优点具有高灵敏和高选择性的优点,能提供化合物的能提供化合物的结构信息结构信息,予以定性确证予以定性确证,在残留分析中的应用日趋广泛在残留分析中的应用日趋广泛lLC-MS通常采用短柱通常采用短柱((150mm)分离分离,色谱柱平衡时间短色谱柱平衡时间短,适合样品的高通量分析适合样品的高通量分析蛔住盏拒地饰致伏钨阿缴谐揭传疵纲孰芍休大蕉旭千佐蓄撮卫掘侮嗜垂盆第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类lBlanchflower等采用等采用LC-MS法测定法测定FBZ和和OFZ残留残留,发现发现等度洗脱比梯度洗脱重复性好。

等度洗脱比梯度洗脱重复性好lCannavan等采用梯度洗脱来分离等采用梯度洗脱来分离TBZ和和5-OH-TBZ,流动流动相由乙腈和相由乙腈和0.1mol/L醋酸铵组成醋酸铵组成lBalizs建立了建立了15种苯并咪唑残留测定的种苯并咪唑残留测定的LC-MS/MS方法方法,采采用细直径柱用细直径柱(2.1mm)分离分离,流动相流速为流动相流速为0.04~0.2mL/min,苯苯并咪唑类药物在并咪唑类药物在6min内出峰内出峰,但没有达到完全分离但没有达到完全分离lDe Ruycke等建立了等建立了LC-MS/MS法测定蛋和肌肉组织中苯法测定蛋和肌肉组织中苯并咪唑残留并咪唑残留,包括包括FLU、、FLU-HMET和和FLU-RMET后来,他们还检测了牛奶中左旋咪唑和他们还检测了牛奶中左旋咪唑和7种苯并咪唑类药物的残种苯并咪唑类药物的残留睛巡挖冬卯双腮群虐蓟菏铱黎希走围胎醚轨赋数毁使癸杜愈指螟感吸协店第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类第六章兽药残留检测技术苯并咪唑类。