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不同因素对家兔离体肠肌运动的影响.docx

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    • 不同因素对家兔离体肠肌收缩的影响摘要 :目的 研究 0.01%乙酰胆碱 (Ach 、 0.01%肾上腺素 (NE 、 1 当量NaOH、1当量HC1、20°C台氏液及缺氧等条件对家兔离体肠肌运动的影响方 法向浸有离体家兔肠肌的37 C的台氏液依次滴加0.01%Ach、0.01%NE、1当量 NaOH、1当量HC1、停止供氧及迅速换成17C的台氏液,并用生物信号采集处理 系统记录肠肌的收缩情况 结果 滴加 0.01%Ach、 1 当量 NaOH 后,肠肌运动张力 和频率都增大;滴加 0.01%NE、 1 当量 HCl 肠肌运动张力与频率迅速降低; 将 37C 的台氏液迅速换成20C的台氏液后,肠肌运动肠肌运动张力与频率先迅速降低后逐 渐增大 停止通氧后, 肠肌运动张力和 频率逐渐降低;恢复通氧后,肠肌运动张力和 频率逐渐升高 结论一 定浓度 Ach 、 NaOH 可促进肠肌的运动;一定浓度的 NE 、 HCl 可以抑制肠肌的运动;低温能使肠 肌运动暂时减弱;短时缺氧使肠肌运动在一开 始有增强的现象,而后减弱关键词 不同因素;离体肠肌;运动1. 材料和方法 [1]1.1 实验材料:家兔1.2 实验仪器:麦氏浴槽、 超级恒温箱、 空气泵、 恒温离体小肠灌流装置、 微 调固定器、 张 力换能器、 生物信号采集处理系统、 木锤、 止血钳、 手术刀、 20ml 注射器、 手术剪、持针器、手术圆针、缝线、烧杯、手术盘、钢碗。

      1.3 实验药品和试剂:台氏液、 0.01%乙酰胆碱 (Ach 、 0.01%肾上腺素 (NE 、 NaOH 、 HCl 1.4 离体家兔肠肌制备:取家兔一只,将其倒提,用木锤猛击后脑勺,使 之昏迷,将其仰 卧位固定,用手术剪从剑突下沿腹部白线向耻骨联合方向剪开皮 肤约 5cm 长,打开腹壁,暴露腹腔,顺着胃找到与胃相连的十二 指肠, 沿十二指肠向空肠的 方向取出小肠段约 30cm , 放入一小手 术盘中,用注射器抽取预冷台氏液冲洗肠内容 物,直至冲洗干净 为止将干净的小肠段放入另一盛有预冷台氏液的小手术盘中, 用手术刀刮去肠管外的血管和系膜,将小肠段切割成小段,每小 段肠约 2cm 长, 并在小 段肠的两端、 距断端约 1mm 处各穿约 30cm 长的线1.5 标本固定1.5.1取出固定架, 将肠段的下端的线头尽量靠近并牢固地绑紧在固定架的小钩, 将固 定架放回内槽,使小钩尽量靠近槽底(尽量减少台式液的使用 ,重新用张力微 调 器固定固定架,将空气泵重新连接至固定架,并通过固定架将空气输入内槽 的台氏液 中1.5.2将肠段的上端的线头与张力换能器的应变梁连接 , 用张力微调器缓慢升降 拉线, 保持线有一定紧张度,肠段、线应与地平面垂直,同时,肠段及上端的线头不 得 碰及槽壁和固定架。

      1.5.3换液:打开灌流槽的内槽排水阀门,排去原来的台氏液,用 20ml 注射器从恒 温 水泵的小烧杯中抽取被加温的台氏液放入灌流槽的内槽中 , 其每次用量以淹过肠 段的量为准调节位于固定架尾部的空气流量调节旋钮,使气泡即细小、均匀, 又不 影响肠段的运动1.6 实验观察161待肠活动恢复后,向台氏液中加入0.01%乙酰胆碱(Ach 1滴,观察小肠收缩 活动的改变,待反应稳定后冲洗1遍,再加入等量的37°C的台氏液1.6.2待肠活动恢复后,向台氏液中加入 0.01%肾上腺素 (NE 1 滴,观察小肠活动 的改 变,待反应稳定后冲洗 1 遍,再加入等量的 37C 的台氏液1.6.3 待肠活动恢复后, 向台氏液中加入 1N NaOH1 滴, 观察小肠收缩活动的改 变, 待 . 反应稳定后冲洗 1 遍1.6.4待肠活动恢复后, 向台氏液中加入 1N HCl1 滴, 观察小肠收缩活动的改变 反应稳 定后冲洗 1 遍1.6.5记录一段37°C的台氏液环境中小肠平滑肌收缩活动曲线,观察其收缩活动 的特点关闭恒温水泵,将原37C台氏液换成等量的20C台氏液,观察肠活动的改 变 , 待其活动改变明显时,冲洗 1 遍,再加入等量的 37C 的台氏液。

      1.6.6 待肠活动恢复后,停止空气泵的工作,观察肠活动的改变,待其收缩活动改变 明 显时反应稳定后冲洗 1 遍,再加入等量的 37C 的台氏液,空气泵描记一段肠段 收 缩活动恢复曲线后终止实验2. 实验结果见附图滴加 0.01%Ach、 1 当量 NaOH 后,肠肌运动张力和频率都增大;滴加 0.01%NE、 1 当量 HCl 肠肌运动张力与频率迅速降低;将37 C的台氏液迅速换成20C的台氏液后,肠肌运动肠肌运动张力与频率先迅 速降低 后逐渐增大;停止通氧后, 缺氧后肠肌开始一段有增强的现象, 而后肠肌运动张力和频率逐渐 恢复正 常;恢复通氧后,肠肌运动张力和频率先降低而后恢复正常3. 分析与讨论3.1Ach可明显兴奋胃肠道平滑肌,故:①收缩频率增高:Ach与肌膜上的M受体 结合, 使生电性钠泵活动减弱, 从而使静息电位升高, 平滑肌兴奋性提高 ②收缩幅 度增加:平滑肌钙离子专用通道开放,钙离子内流,一方面使收缩频率增加,另一方面 可以增 加肌浆钙离子浓度3.2 肾上腺素作用于肌膜,一方面使生电性钠泵活动增强,另一方面结合膜受体 其中Cl受体使钾离子外流增加,受体使钾、钙离子外流增加,同时增强钙泵活动。

      其中生 电性钠泵活动增强、钾、钙离子外流增加导致细胞膜超级化,平滑肌兴奋性 降低,收 缩频率降低钙离子外流、钙泵活动增强导致肌浆钙离子浓度下降,收缩幅 度下降3.3消化道平滑肌对化学刺激敏感,小肠的PH约为7.0〜8.0,过高或过低的 PH都会影响肠肌的收缩滴加1当量NaOH后,台氏液的PH值处于7.0〜8.0之间, 处于肠肌收缩的最适PH,肠肌运动加强由于[H+]降低:①使钙离子通道活性受抑 制减弱,钙离子内流,平滑肌兴奋性增高,故收缩频率增高,收缩幅度增强;②肌浆网钙 离子释放增加,平滑肌收缩幅度增强张力曲线而后下降,说明肠肌对PH值变化有 一定的适应力 [2]3.4消化道平滑肌对化学刺激敏感,滴加1当量HCl 后,台氏液的PH低于最适 范围(7.0〜8.0,胞外[H+]升高:①抑制钙通道的活性,钙离子内流减少,肌肉收缩减 弱②干扰肌肉的代谢和肌丝滑行的生化过程,氢离子与钙离子竞争钙调蛋白的结 合位点而使肌球蛋白ATP酶活性降低,使肌原纤维对钙离子的敏感性和钙离子从 肌质网的释放量减少收缩减弱3.5消化道平滑肌对温度刺激敏感37°C的台氏液迅速换成20°C的台氏液后, 肠肌内的酶活性降低,小肠代谢水平降低,故平滑肌兴奋性降低导致收缩频率降低,同 时收缩幅 度也减弱。

      由于肠肌对低温有适应能力,故随后肠肌运动逐渐恢复正常3.6停止通氧后,肠肌运动得不到能量供给,故肠肌运动在缺氧开始一段时间代 偿性增强;由于ATP有限,故随后运动张力和收缩幅度减弱恢复通氧后,肠肌得到 能量供给,肠肌代偿运动消失,故造成运动张力和频率短暂降低,由于A TP充足,故随后运 动张 力和频率逐渐升高4. 结论一 定浓度 Ach 、 NaOH 通过增强钙离子通道活性而促进肠肌的运动; 一定浓 度的NE、HCl通过减弱钙离子通道活性而抑制肠肌的运动;低温通过抑制酶活性 而使肠肌运动暂时减 弱;短时缺氧能使肠肌运动暂时代偿性增强,随后减弱5. 参考文献[1]陆源 林国华 杨午鸣主编机能学实验教程,第二版,北京科教出版社, 2010 [2]朱大年 主编生理学,第七版人民卫生出版社, 2009 164。

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