干细胞肝移植治疗重症肝病32例临床分析 .doc

精品文档2016 全新精品资料-全新公文范文 -全程指导写作 –独家原创 1 / 7干细胞肝移植治疗重症肝病 32 例临床分析 各种原因所致的肝硬化失代偿期、肝功能衰竭等重症肝病在我国发病率及死亡率均较高，危害严重，目前尚缺乏切实有效的治疗方法虽然肝移植已成为治疗的重要手段，但其缺点有：1.来源困难；2.手术创伤较大；3.免疫排斥反应严重；4.费用高昂；5.并发症较多等而血液净化技术(如各种类型的人工肝支持系统)只能代替肝脏的部分解毒功能，疗效也有限近年来，干细胞移植已成为治疗多种细胞损伤性疾病的新策略，在临床上已经初步应用于肝脏疾病的治疗，并且取得了较好的疗效我们从 2010 年 5月 12 月对 32 例重症肝病患者进行干细胞肝移植治疗，现报道如下 1 材料与方法 1.1 一般资料 2010 年 5 月 12 月在宜宾市第二人民医院感染科住院的患者，共 32 例其中男 23 例，女 9 例；年龄31 岁 69 岁，中位年龄 42 岁肝硬化失代偿期 30 例，Childpugh 分级：A 级 6 例，B 级 16 例，C 级 8 例；肝功能衰竭 4 例，其中肝硬化合并肝衰竭 2 例。

病因：单纯乙肝病毒感染 25 例，单纯酒精性 3 例，乙肝病毒感染合并酒精性 4 例并发症：上消化道出血 2 例，食道胃底静脉曲张10 例，脾大伴脾功能亢进 18 例，脾切除 1 例，肝硬化腹水25 例（其中腹水感染 6 例） ，睾丸鞘膜积液 2 例，胸腔积液精品文档2016 全新精品资料-全新公文范文 -全程指导写作 –独家原创 2 / 73 例，败血症 1 例所有患者均同时行内科综合治疗治疗前患者均签署知情同意书和手术同意书 1.2 抽取骨髓或采集脐血 在专门的穿刺室内，从双侧髂后上嵴以不同角度、不同深度量抽取骨髓约 160ml200ml；采集脐血在手术室进行，量约 80ml100ml 1.3 干细胞分离 在层流室的超净工作台上操作，采用SFDA 批准的骨髓、脐带血细胞处理试剂盒分离干细胞干细胞数量 3.0×106/ml4.7×108/ml 1.4 干细胞移植 所有 32 例均在介入室局麻下行股动脉穿刺经肝固有动脉介入后把干细胞输入病肝内自体骨髓干细胞移植治疗 21 例，异体脐血干细胞移植治疗 11 例。

1.5 观察指标 随访观察指标包括：症状、体征、肝功能、凝血图、腹部 B 超等 2 结果 2.1 手术成功率及不良反应 32 例患者骨髓或脐血采集、干细胞分离及介入治疗成功率为 100％所有患者术中未出现严重不良反应或并发症；术后出现股动脉穿刺点出血 1例，穿刺点皮下淤斑 4 例，穿刺侧肢体感觉不适 3 例，右下肢水肿 2 例，呃逆 3 例，肝性脑病 2 例（因术后食欲增加后大量进食蛋白饮食而诱发） ，术中发现小肝癌 2 例，并行 TAE（经导管肝动脉栓塞）治疗，术后有轻微的肝区不适，所有患者均经对症支持治疗后消失 精品文档2016 全新精品资料-全新公文范文 -全程指导写作 –独家原创 3 / 72.2 干细胞移植后患者症状的改善 移植治疗术后 12 周，患者一般情况改善，临床症状开始好转2 个月后，患者腹胀缓解或消失 29 例（91%） ，乏力缓解或消失 30 例（94%） ，纳差缓解或消失 29 例（91%） ，精神、体力好转 30 例（94%） ，肝病面容好转 19 例（59%） 。

2.3 干细胞移植治疗后患者肝功能的改变 移植治疗术后 12 周，患者肝功能多项指标开始好转,至治疗术后 2 个月,血清白蛋白升高 26 例（81%） ，血清转氨酶降低 15 例（47%） ，血清总胆红素降低 16 例（50%） ，凝血酶原时间缩短 13 例（41%） 2.4 治疗术后生存率 存活 31 例（97%） ，死亡 1 例（3%） ，于治疗术后 12 周合并严重感染（败血症及胸腹腔感染）而死亡 3 讨论 近年来许多国内外学者已将干细胞移植治疗广泛应用于基础研究和临床治疗，并有不少应用于慢性终末期肝病的治疗，而且取得令人鼓舞的疗效Petersen[1]等最早发现接受骨髓移植的鼠肝内存在骨髓来源的肝细胞，为终末期肝病的治疗提出了一个新的研究方向Theise[2]等在小鼠试验中发现移植的骨髓细胞在体内不但能分化为肝细胞，而且能分化为胆管细胞Lee KD[3]等通过研究发现骨髓干细胞能够分化为肝细胞，参与细胞再生，从而可以治疗肝损精品文档2016 全新精品资料-全新公文范文 -全程指导写作 –独家原创 4 / 7伤性疾病。

朱顺康[4]等对 36 例肝硬化失代偿患者行自体骨髓干细胞移植，术后 8 周 ALT、TBIL、PT 较前明显改善，术后 12 周 ALB 出现明显升高，大部分患者乏力、纳差、腹水等情况明显好转，未见明显不良反应 而脐血干细胞由于具有：1.较骨髓源性干细胞更原始；2.来源较广；3.取材方便；4.增殖能力强，在体内外均有极强的向肝系细胞分化的能力，而且移植后在体内也具有长时间持续扩增的能力；5.治疗安全、有效；6.费用较低；7.无免疫排斥反应；8.供者无痛苦等特点而越来越受关注Kakinuma 等[5,6]将脐血单核细胞移植入肝损伤小鼠中，455 周时均在肝内检测出人白蛋白 mRNA，在移植后 20 周时肝细胞内出现了原位杂交和免疫组化的阳性标志；并将人脐血干细胞分别注入到暂时肝损伤和慢性肝损伤小鼠体内，结果注射 3 周后暂时肝损伤小鼠肝脏内检测到人肝样细胞，而慢性肝损伤小鼠有更多人肝样细胞表达Teramoto[7]等将来源于脐带血的有核细胞用含 HGF 等的条件培养基诱导培养 1 周后，可以检测到 ALBmRNA，3 周后免疫染色检测到ALB 和 CK19 阳性细胞，表明有肝祖细胞的存在，类似于卵圆细胞。

本临床研究采取经肝动脉途径肝内移植自体骨髓或脐血干细胞，并观察移植治疗术后患者肝功能及临床症状的改善情况32 例重症肝病患者移植 2 月后，大多数患者临床症精品文档2016 全新精品资料-全新公文范文 -全程指导写作 –独家原创 5 / 7状明显改善，白蛋白升高，一部分患者血清转氨酶、总胆红素降低，凝血酶原时间缩短，仅 1 例死于严重并发症，而且所有患者术中、术后均未出现严重不良反应或并发症，因此干细胞肝移植治疗重症肝病是安全有效的治疗措施 同时我们也发现并非所有患者经干细胞移植后疗效佳，其具体原因不明，可能是患者病情严重、肝脏结构破坏或肝内微环境较差等原因导致移植的干细胞定植、分化障碍等另外，由于干细胞移植治疗肝病的临床应用研究时间较短，尚缺乏大规模、长时间的随访观察，仍存在不少需要探索的问题：1.大量的基础实验均基于动物实验，对于人体尚不清楚；2.干细胞在肝脏中的具体分化过程及能否有效的调控；3.在疾病状态下所分化肝细胞的功能及存活时间；4.移植细胞的种类、特性、数量与疗效的关系；5.肝脏微循环中影响干细胞定殖、分化的因素；6.干细胞移植的长期安全性（主要是致瘤性）及有效性等。

本研究只是初步的临床观察，未设有对照组，而且观察时间有限，故还需要大量的基础和临床研究来证实总之，随着肝干细胞研究不断向深度和广度扩展，干细胞移植治疗重症肝病的临床应用前景是非常光明的 参 考 文 献 [1] Petersen BE, Bowen WC, Patrene KD， et al. Bone marrow as a potential source of hepatic oval 精品文档2016 全新精品资料-全新公文范文 -全程指导写作 –独家原创 6 / 7cells[J]. Science，1999，284 (5417) ：11681170. [2 ]Theise ND，Badve S，Saxena R，et a1．Derivation of hepatocytes from bone marrow cels in mice after radiationinduced myeloablation[J]．Hepatology，2000，31(1)：235240． [3] Lee KD，Kuo TK，WhangPeng J，et a1．In vitro hepatic differentiation of human mesenchymal stem cells．Hepatology，2004，40(6)：l275l284． [4] 朱康顺，单鸿，何可可，等.自体骨髓干细胞肝内移植治疗失代偿期肝硬化的初步临床观察[J].医学影像技术，2007，23(12)：18631865. [5] Kakinuma S,Tanaka Y,Chinzei R,et al. Human umbilical cord blood as a source of transplantable hepatic progenitor cells[J]. Stem Cells, 2003,21 (2):217227. [6] Kakinuma S,Asahina K,Okamura K,et a1. Human cord blood cels transplanted into chronically damaged liver exhibit simi lar characteristics to functional hepatocytes[J].Transplant Proc,2007,39(1):12401243. [7] Teramoto K，Asahina K，Kumashiro Y，et al．Hepatocyte differentiation from embryonic stem 精品文档2016 全新精品资料-全新公文范文 -全程指导写作 –独家原创 7 / 7cells and umbilical cord blood cells[J]. Hepatobiliary Pancreat Surg，2005,12(3):196202. 。