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ANA荧光片模型判读与讲解(2015).pdf

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    • 抗核抗体(ANA)荧光片 判读与讲解抗核抗体(ANA)荧光片 判读与讲解北区FAE 李建彬 2012年11月14日北区FAE 李建彬 2012年11月14日ANA筛查:基质组合筛查:基质组合检测检测ANA:“:“金标准金标准” 标准基质:” 标准基质:HEp-2细胞细胞+灵长类肝灵长类肝ANA读片要点读片要点HEp-2细胞细胞:选取多个视野判断选取多个视野判断HEp-2细胞细胞:分裂间期与分裂期细胞综合看分裂间期与分裂期细胞综合看HEp-2与肝片综合看与肝片综合看ANA筛查:基质组合筛查:基质组合灵长类肝灵长类肝 -猴肝猴肝Hep-2细胞细胞 -人喉癌上皮细胞人喉癌上皮细胞ANA筛查:基质组合筛查:基质组合细胞分裂周期细胞分裂周期根据产生的荧光模型、靶抗原的分布部位分类如下:根据产生的荧光模型、靶抗原的分布部位分类如下:ANA核均质型:DNA、组蛋白和核小体等 核膜型:板层素、gp210等核颗粒型核仁型:Scl-70、RNA多聚酶、PM-Scl和原纤维蛋白等核浆点型:着丝点、核点等胞浆颗粒型:线粒体、Jo-1、核糖体等胞浆纤维型:波形蛋白、原肌球蛋白和肌动蛋白等分裂期细胞阳性:纺垂体、中间体、中心粒等核糖核蛋白:Sm、nRNP、SS-A、SS-B细胞核细胞浆Ku细胞周期蛋白:I型(PCNA)和II型抗核抗体谱的分类抗核抗体谱的分类模板片示例 抗核抗体(ANA)模板片示例 抗核抗体(ANA)核均质型核均质型 HEp-2:间期细胞核 呈均匀荧光,分裂期 细胞浓缩染色体荧光 增强:间期细胞核 呈均匀荧光,分裂期 细胞浓缩染色体荧光 增强 肝片:肝细胞核阳性, 呈均匀荧光。

      荧光强 度与肝片:肝细胞核阳性, 呈均匀荧光荧光强 度与HEp-2基本一致基本一致 靶抗原:靶抗原:dsDNA、 核小体、组蛋白、 核小体、组蛋白核粗颗粒型核粗颗粒型 肝片:肝细胞核呈颗 粒样荧光核仁阴性; 荧光强度与肝片:肝细胞核呈颗 粒样荧光核仁阴性; 荧光强度与HEp-2基 本一致基 本一致 HEp-2:间期细胞 核呈颗粒样荧光, 核仁阴性;分裂期 细胞浓缩染色体阴 性,染色体周围呈 颗粒样荧光:间期细胞 核呈颗粒样荧光, 核仁阴性;分裂期 细胞浓缩染色体阴 性,染色体周围呈 颗粒样荧光 靶抗原:靶抗原:nRNP、、 Sm核细颗粒型核细颗粒型 肝片:肝细胞核呈颗 粒样荧光部分核仁 阴性;荧光强度明显 弱于肝片:肝细胞核呈颗 粒样荧光部分核仁 阴性;荧光强度明显 弱于HEp-2 HEp-2:间期细胞 核呈细颗粒样荧光, 部分核仁阴性;分 裂期细胞浓缩染色 体阴性,染色体周 围呈颗粒样荧光:间期细胞 核呈细颗粒样荧光, 部分核仁阴性;分 裂期细胞浓缩染色 体阴性,染色体周 围呈颗粒样荧光 靶抗原:靶抗原:SS-A、、 SS-B抗抗Ku抗体抗体 肝片: (灵长类) 肝细胞核呈现网状 荧光肝片: (灵长类) 肝细胞核呈现网状 荧光 HEp-2:间期细胞 核呈现细颗粒样荧 光;分裂期细胞浓 缩染色体阴性:间期细胞 核呈现细颗粒样荧 光;分裂期细胞浓 缩染色体阴性 靶抗原:靶抗原:Ku蛋白蛋白细胞周期蛋白细胞周期蛋白I型(型(PCNA)) 肝片:荧光模型不 典型肝片:荧光模型不 典型 HEp-2:半数间期 细胞核呈现亮的、 细颗粒样荧光,核 仁阴性;另半数间 期细胞荧光模型相 同,但强度弱:半数间期 细胞核呈现亮的、 细颗粒样荧光,核 仁阴性;另半数间 期细胞荧光模型相 同,但强度弱10倍 以上;分裂期细胞 浓缩染色体阴性, 周围有较弱的颗粒 荧光倍 以上;分裂期细胞 浓缩染色体阴性, 周围有较弱的颗粒 荧光 靶抗原:靶抗原:DNA聚合 酶聚合 酶δ的辅助蛋白的辅助蛋白细胞周期蛋白细胞周期蛋白II型型 肝片:荧光模型不 典型肝片:荧光模型不 典型 HEp-2:部分间期 细胞核阳性,部分 间期细胞核阴性; 分裂期细胞核均阳 性,呈颗粒样荧光, 浓缩染色体为阴性:部分间期 细胞核阳性,部分 间期细胞核阴性; 分裂期细胞核均阳 性,呈颗粒样荧光, 浓缩染色体为阴性 靶抗原:靶抗原:cyclin蛋白蛋白着丝点型着丝点型 肝片:肝细胞核内 可观察到肝片:肝细胞核内 可观察到10-20个荧 光点;荧光强度明 显弱于与个荧 光点;荧光强度明 显弱于与HEp-2细胞细胞 HEp-2:间期细胞 核内出现大小数目 相同、均匀分布的 点状荧光;分裂期 细胞浓缩染色体处 出现浓缩点状荧光:间期细胞 核内出现大小数目 相同、均匀分布的 点状荧光;分裂期 细胞浓缩染色体处 出现浓缩点状荧光 靶抗原:着丝点蛋 白靶抗原:着丝点蛋 白核点型核点型 肝片:肝细胞核内 出现大小、数目不 均一的点状荧光; 荧光强度与肝片:肝细胞核内 出现大小、数目不 均一的点状荧光; 荧光强度与HEp-2基 本一致基 本一致 HEp-2:间期细胞 核内出现大小、数 目、强度不均的点 状荧光;分裂期细 胞浓缩染色体阴性。

      周围可见点状荧光:间期细胞 核内出现大小、数 目、强度不均的点 状荧光;分裂期细 胞浓缩染色体阴性 周围可见点状荧光 靶抗原:靶抗原:Sp100核膜型核膜型 肝片:肝细胞核呈 现特征性环状荧光肝片:肝细胞核呈 现特征性环状荧光 HEp-2:间期细胞 核呈现均匀荧光, 核周增强;分裂期 细胞浓缩染色体阴 性:间期细胞 核呈现均匀荧光, 核周增强;分裂期 细胞浓缩染色体阴 性 靶抗原:板层素、靶抗原:板层素、 gp210核仁型核仁型 肝片:肝细胞核仁 阳性;荧光强度与肝片:肝细胞核仁 阳性;荧光强度与 HEp-2基本一致基本一致 HEp-2:间期细胞 核仁阳性;分裂期 细胞浓缩染色体阴 性间期细胞 核仁阳性;分裂期 细胞浓缩染色体阴 性 靶抗原:靶抗原:Scl-70、、 PM-Scl、、RNA多聚 酶、原纤维蛋白多聚 酶、原纤维蛋白核仁型的多种模型核仁型的多种模型原纤维蛋白原纤维蛋白PM-SclRNA多聚酶多聚酶Scl-70胞浆颗粒型:抗核糖体胞浆颗粒型:抗核糖体P蛋白抗体蛋白抗体 肝片: 灵长类肝组 织中可呈现特异的 由几个肝细胞浆融 合形成的岛状荧光肝片: 灵长类肝组 织中可呈现特异的 由几个肝细胞浆融 合形成的岛状荧光 HEp-2:间期细胞 浆中出现致密的细 颗粒样荧光,并有 空泡现象,部分核 仁阳性;分裂期细 胞浓缩染色体阴性:间期细胞 浆中出现致密的细 颗粒样荧光,并有 空泡现象,部分核 仁阳性;分裂期细 胞浓缩染色体阴性 靶抗原:核糖体靶抗原:核糖体P 蛋白蛋白胞浆颗粒型:抗线粒体抗体胞浆颗粒型:抗线粒体抗体 肝片: 肝细胞呈颗 粒样荧光,整个视 野呈细沙状荧光肝片: 肝细胞呈颗 粒样荧光,整个视 野呈细沙状荧光 HEp-2:细胞浆内 粗颗粒样荧光:细胞浆内 粗颗粒样荧光 靶抗原:线粒体靶抗原:线粒体胞浆颗粒型:抗胞浆颗粒型:抗Jo-1抗体抗体 肝片: 荧光模式不 典型肝片: 荧光模式不 典型 HEp-2:间期细胞浆 中出现颗粒到细块状 荧光,细胞核有时也 出现细颗粒荧光;分 裂期细胞浓缩染色体 阴性,染色体周围区 域呈致密的细颗粒荧 光:间期细胞浆 中出现颗粒到细块状 荧光,细胞核有时也 出现细颗粒荧光;分 裂期细胞浓缩染色体 阴性,染色体周围区 域呈致密的细颗粒荧 光 靶抗原:靶抗原:Jo-1胞浆颗粒型:抗溶酶体抗体胞浆颗粒型:抗溶酶体抗体 肝片: 荧光模式不 典型肝片: 荧光模式不 典型 HEp-2:细胞浆中 出现细小的、中等 大小的、以及粗的 滴状荧光颗粒:细胞浆中 出现细小的、中等 大小的、以及粗的 滴状荧光颗粒 靶抗原:溶酶体靶抗原:溶酶体胞浆颗粒型:抗高尔基体抗体胞浆颗粒型:抗高尔基体抗体 肝片: 荧光模式不 典型肝片: 荧光模式不 典型 HEp-2:间期细胞 核一侧的高尔基体 所在部位呈现网状 的颗粒样荧光;分 裂期细胞无荧光。

      间期细胞 核一侧的高尔基体 所在部位呈现网状 的颗粒样荧光;分 裂期细胞无荧光 靶抗原:高尔基体靶抗原:高尔基体胞浆纤维型:抗肌动蛋白抗体胞浆纤维型:抗肌动蛋白抗体 肝片: 出现 “肝片: 出现 “T” 字或 “丁” 字样荧 光字或 “丁” 字样荧 光 HEp-2:细胞浆中 出现无数束状纤维 样结构,有时可伸 展到细胞核:细胞浆中 出现无数束状纤维 样结构,有时可伸 展到细胞核 靶抗原:肌动蛋白靶抗原:肌动蛋白胞浆纤维型:抗波形蛋白抗体胞浆纤维型:抗波形蛋白抗体 肝片:荧光模式不 典型肝片:荧光模式不 典型 HEp-2:细胞浆中 出现细的纤维网状 荧光;分裂期细胞 浓缩染色体阴性, 染色体周围可出现 无数圆形的荧光点:细胞浆中 出现细的纤维网状 荧光;分裂期细胞 浓缩染色体阴性, 染色体周围可出现 无数圆形的荧光点 靶抗原:波形蛋白靶抗原:波形蛋白抗中心粒抗体抗中心粒抗体 肝片:荧光模式不 典型肝片:荧光模式不 典型 HEp-2:在细胞核 内可见一或两个荧 光点,分裂期细胞 中荧光点位于细胞 纵向对称的两极:在细胞核 内可见一或两个荧 光点,分裂期细胞 中荧光点位于细胞 纵向对称的两极抗纺锤体纤维抗体抗纺锤体纤维抗体 肝片:荧光模式不 典型肝片:荧光模式不 典型 HEp-2:仅见于分 裂期细胞,纺锤体 部位出现特征性荧 光。

      仅见于分 裂期细胞,纺锤体 部位出现特征性荧 光抗中间体抗体抗中间体抗体 肝片:荧光模式不 典型肝片:荧光模式不 典型 HEp-2:分裂中期 细胞中间水平方向 产生带状细颗粒荧 光,半数间期细胞 含有大量粗荧光点, 其余细胞为阴性分裂中期 细胞中间水平方向 产生带状细颗粒荧 光,半数间期细胞 含有大量粗荧光点, 其余细胞为阴性模板片示例 抗dsDNA抗体(绿蝇短膜虫)模板片示例 抗dsDNA抗体(绿蝇短膜虫)抗抗dsDNA抗体(绿蝇短膜虫)抗体(绿蝇短膜虫)阴性结果阴性结果 仅有细胞核出现 荧光反应仅有细胞核出现 荧光反应抗抗dsDNA抗体(绿蝇短膜虫)抗体(绿蝇短膜虫)阴性结果阴性结果 仅有鞭毛基体出 现荧光反应仅有鞭毛基体出 现荧光反应抗抗dsDNA抗体(绿蝇短膜虫)抗体(绿蝇短膜虫) 抗dsDNA抗体在 动基体表现为均 匀的、有时边缘 增强的荧光抗dsDNA抗体在 动基体表现为均 匀的、有时边缘 增强的荧光  细胞核与鞭毛基 体的反应没有任 何意义,可不做 结果判断细胞核与鞭毛基 体的反应没有任 何意义,可不做 结果判断阳性结果阳性结果绿蝇短膜虫读片要点:绿蝇短膜虫读片要点:视野中大多数虫体的动基体呈现荧光动基体表现为均匀的、有时边缘增强的荧光视野中大多数虫体的动基体呈现荧光动基体表现为均匀的、有时边缘增强的荧光Thanks & any questions。

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