实验五白细胞分类计数-课件.ppt
22页实验五白细胞分类计数,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,,*,,,实验五白细胞分类计数,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,,*,01.10.2024,1,实验五白细胞分类计数,实验二,谢 海 啸,,02.10.20221实验五白细胞分类计数实验二谢 海 啸,01.10.2024,2,实验五白细胞分类计数,白细胞分类计数是将血液制备成涂片,瑞氏染色后显微镜下根据白细胞的形态特征进行分类计数通常分类,100,个白细胞,计算得出各种白细胞所占百分比02.10.20222实验五白细胞分类计数白细胞分类计数是将,01.10.2024,3,瑞氏染料溶于甲醇,离解为带正电的碱性,美兰(,M,+,),和带负电的酸性,伊红(,E,-,),离子细胞的染色既有,物理的吸附作用,,又有,化学的亲和作用,各种细胞成分的化学性质不同,对染料的亲和力也不一样,故可呈不同的着色特点瑞氏染色原理:,02.10.20223瑞氏染料溶于甲醇,离解为带正电的碱性美,01.10.2024,4,血红蛋白、嗜酸性颗粒均为碱性物质,故与酸性染料伊红结合而染成红色,呈,嗜酸性,细胞核的核蛋白为酸性物质,故与碱性染料美兰结合,染成深蓝色或深紫红色,呈,嗜碱性,。
中性颗粒与美兰和伊红同时结合而染为淡紫红色,呈,嗜中性,染色原理:,02.10.20224血红蛋白、嗜酸性颗粒均为碱性物质,故与,01.10.2024,5,[,器材,],光学显微镜,推片,载玻片,[,试剂,],Wright,染液,,Wright 1.0g,,甲醇,600ml,磷酸盐缓冲液(,PH6.4,~,6.8,),香柏油,[,标本来源,],EDTA-K,2,抗凝全血,02.10.20225[器材],01.10.2024,6,实验五白细胞分类计数,1),推片:血膜,厚薄适中,边缘整齐,外观呈舌形,头、体、尾分明,2,)干燥,3,)标记,,,1.,制备血涂片,,02.10.20226实验五白细胞分类计数1)推片:血膜厚薄,01.10.2024,7,2,.染色,,1,)准备:血膜干透后,用蜡笔在两端划线,以防止染色时染液外溢将血涂片放染色架上2,)加染液:在涂片上滴加瑞氏染液,数滴,,以染液覆盖整个血膜为度,稍静置,1min,3,)加缓冲液:滴加缓冲液等量或多些,与上述染液充分混匀4,)染色:染色,10min.,5,)冲洗:不要先倒掉染液,平持血涂片用流水缓缓冲洗干净。
6,)干燥:直立血涂片,使其自然干燥02.10.202272.染色,01.10.2024,8,血涂片制作,02.10.20228血涂片制作,01.10.2024,9,良好血涂片外观,-羽(子弹头)状尾部,-,周边有空白,-无划痕,,羽,状,尾,部,02.10.20229良好血涂片外观羽,01.10.2024,10,,,不良血涂片,,02.10.202210,01.10.2024,11,2,.瑞氏染色操作,02.10.2022112.瑞氏染色操作,01.10.2024,12,3,.白细胞分类:,,先用低倍镜选择厚薄适宜,染色良好,细胞分布均匀的体尾交界处,滴加香柏油一滴,,油镜,下分类计数分类时要有,秩序,的连续进行,避免主观选择视野通常分类计数,100,个白细胞,计算并报告各种白细胞所占比例低倍镜下所见,结果记录方式:,Ne,正 一,Ly,正,Mo,正,Eo,正,Ba,正,,,02.10.2022123.白细胞分类:低倍镜下所见结果记录,01.10.2024,13,体尾交界处,理想区,域,,细胞重叠 细胞太稀,理想区域,02.10.202213体尾交界处理想区域 细胞,01.10.2024,14,实验五白细胞分类计数,中性粒细胞(,Ne,),:,在瑞氏染色血涂片上呈圆形,直径,10,~,13µm,,胞浆染粉红色,核形一叶(杆状核)至五叶不等,以三叶者多见,染成深紫红色,胞浆中有许多细小均匀紫红色颗粒。
02.10.202214实验五白细胞分类计数中性粒细胞(Ne,01.10.2024,15,嗜酸性粒细胞(,Eo,),:,较中性粒细胞稍大,胞核多为两叶,,呈眼镜、八字形,核染色质粗糙染深紫红色,,胞浆内充满粗大均匀的嗜酸性颗粒,瑞氏染色时呈桔红色,有折光性02.10.202215嗜酸性粒细胞(Eo):较中性粒细胞稍,01.10.2024,16,嗜碱性粒细胞(,Ba,),:,胞浆中含有大小不等的嗜碱性颗粒,瑞氏染色时呈兰黑色于光学显微镜下常见胞浆中有小空泡,乃因嗜碱性颗粒易溶于水或因功能活动而脱颗粒所致;核呈淡紫红色常看不清,呈杆状或分叶状02.10.202216嗜碱性粒细胞(Ba):胞浆中含有大小,01.10.2024,17,淋巴细胞(,Ly,),:,胞体呈圆形,直径介于,6,~,15µm,之间,在成人血涂片中以小淋巴细胞为多见,直径,6,~,9µm,,核大呈深紫色致密而浓染,胞浆量极少;大淋巴细胞胞浆量较多,呈清澈的淡蓝色,可见少量嗜苯胺蓝颗粒,胞核圆或椭圆,常偏向细胞一侧,染色较深02.10.202217淋巴细胞(Ly):胞体呈圆形,直径介,01.10.2024,18,单核细胞(,Mo,),:,在瑞氏染色涂片上为,12,~,20µm,,胞体圆形、椭圆形或不规则形;核形多种多样,最重要的特点是染色质较细致疏松,呈丝网状或条缕状,着色较淡胞浆较多,淡兰色,含大量细小尘土样颗粒,。
02.10.202218单核细胞(Mo):在瑞氏染色涂片上为,01.10.2024,19,正常成人外周血白细胞分类参考值:,Ne 50%,~,70%,Ly 20%,~,40%,Mo 3%,~,8%,Eo 0.5%,~,5%,Ba 0%,~,1%,,[,参考值,],02.10.202219正常成人外周血白细胞分类参考值:[参,01.10.2024,20,1.,血涂片制备要厚薄适宜、均匀、头体尾分明,无溶血、无空洞2.,很多因素影响涂片时血膜的厚度血滴大、血粘度高、推片角度大、速度快则血膜厚,,反之则血膜薄3.,按一定顺序,有秩序地连续进行,避免选择视野4.,分类计数时应同时报告,RBC,和,WBC,的形态是否有异常退化细胞不计数[,注意事项,],02.10.202220 1.血涂片制备要厚薄适宜、均匀、,01.10.2024,21,实验五白细胞分类计数,RBC,异常,02.10.202221实验五白细胞分类计数RBC异常,01.10.2024,22,中性粒细胞,嗜酸性粒细胞,淋巴细胞,嗜碱性粒细胞(右),单核细胞,,,血小板,02.10.202222中性粒细胞嗜酸性粒细胞淋巴细胞嗜碱性,。





