722型分光光度计的使用.doc

一、 测量原理分光光度法测量的理论依据是伯郎一比耳定律： 当容液中的物质在光的照射和激发下，产生了对光吸收的效应但物质对光的吸收是有选择性 的，各种不同的物质都有其各自的吸收光谱 所以根据定律当一束单色光 通过一定浓度范围的稀有色溶液时，溶液对光的吸收程度A与溶液的浓度 c（g/l ）或液层厚度b（cm）成正比其定律表达式A=abc（a是比例系数） 当c的单位为mol/l时，比例系数用e表示，则A=e bc称为摩尔吸光系 数其单位为L • mol-1 • cm-1它是有色物质在一定波长下的特征常数T（透光率）=1/1 0 A（吸光度）=-lgT 或A=K • C • L（比色皿的厚度）测定 时，入射光I,吸光系数和溶液的光径长度不变时，透过光是根据溶液的 浓度而变化的，即“ K”为常数比色皿厚度一定，“L”、“ I0 ”也一定 只要测出A即可算出“ C'二、 722型分光光度计的使用1、 将灵敏度旋钮调至“1”档（信号放大倍率最小）2、 开启电源，指示灯亮，选择开关置于“ T”，波长调至到测试用波长 仪器预热20分钟3、 打开试样室（光门自动关闭），调节透光率零点旋钮，使数字显示为 000.0。

调节100%T旋钮），盖上试样室盖，将比色皿架处于蒸馏水校正位置，使光电管受光，调节透光率100漩钮使数字显示100.0如显示 不到100.0，则可适当增加微电流放大的倍数增加灵敏度的档数同时 应重复（3）调节仪器透光率的“ 0”位）但尽量使倍率置于低档使用这 样仪器会有更高的稳定性4、预热后，按（3）连续几次调整透光率的“ 0”位和“ 100%的位置,待稳定后仪器可进行测定工作三、 吸光度“ A”的测量将选择开关置于A调节吸光度调零旋钮，使得数字显示为零，然后将 被测样品移入光路，显示值即为被测样品的吸光度值四、 浓度c的测量将选择开关由“ A”旋至“C将已标定浓度的样品放入光路，调节浓度旋 钮，使得数字显示为标定值，将被测样品放入光路即可读出被测样品的浓 度值注意事项：1、 测量完毕，速将暗盒盖打开，关闭电源开关，将灵敏度旋钮调至最低 档，取出比色皿，将装有硅胶的干燥剂袋放入暗盒内，关上盖子，将比色 皿中的溶液倒入烧杯中，用蒸馏水洗净后放回比色皿盒内2、 每台仪器所配套的比色皿不可与其它仪器上的表面皿单个调换使用方法（1） 预热仪器将选择开关置于“ T”，打开电源开关，使仪器预热20分钟。

为了防止光 电管疲劳，不要连续光照，预热仪器时和不测定时应将试样室盖打开， 使 光路切断2） 选定波长 根据实验要求，转动波长手轮，调至所需要的单色波长3） 固定灵敏度档在能使空白溶液很好地调到“100%的情况下，尽可能采用灵敏度较低的 挡，使用时，首先调到“ 1”挡，灵敏度不够时再逐渐升高但换挡改变 灵敏度后，须重新校正“ 0%和“ 100%选好的灵敏度，实验过程中不 要再变动4） 调节T=0%轻轻旋动“ 0%旋钮，使数字显示为“ 00.0 ”，（此时 试样室是打开的）5） 调节T=100%将盛蒸馏水（或空白溶液，或纯溶剂）的比色皿放入 比色皿座架中的第一格内，并对准光路，把试样室盖子轻轻盖上，调节透 过率“100%旋钮，使数字显示正好为“ 100.0 ”6） 吸光度的测定将选择开关置于“ A”，盖上试样室盖子，将空白液置于光路中，调节吸 光度调节旋钮，使数字显示为“ .000 ”将盛有待测溶液的比色皿放入比 色皿座架中的其它格内，盖上试样室盖，轻轻拉动试样架拉手，使待测溶 液进入光路，此时数字显示值即为该待测溶液的吸光度值读数后，打开 试样室盖，切断光路重复上述测定操作1-2次，读取相应的吸光度值，取平均值。

7） 浓度的测定选择开关由“ A”旋置“C,将已标定浓度的样品放入光路，调节浓度旋 钮，使得数字显示为标定值，将被测样品放入光路，此时数字显示值即为 该待测溶液的浓度值8） 关机 实验完毕，切断电源，将比色皿取出洗净，并将比色皿座架用 软纸擦净。