实验四、叶绿素的提取、分离及化学性质鉴定.doc

实验四、叶绿素的提取、分离及化学性质鉴定%1. 实验目的：掌握植物中叶绿体色素的成分分离和定性、定量分析的原理和方法1. 实验原理：1、 溶解性叶绿素和类胡萝卜素均不溶于水而溶于有机溶剂，常用95%的乙醇或80%的丙酮提取2、 吸附性滤纸对Chib、Chia、叶黄素、胡萝卜素的吸附能力不同（？）,当用石汕雄作 推动剂时，其在滤纸上的移动速度不同，可相互分离当用适当溶剂推动时，混合物中各成分在两相（固定相和流动相）间具有不同分配系数, 所以移动速度不同，一定时间后可将各种色素分离%1. 实验材料：新鲜植物叶片研钵一个，漏斗一个，刻度试管两支，剪刀一把，长滴管一个，培养皿（直径9cm）一个， 圆形滤纸（11cm和7cm）各一张，滤纸条一张 试剂：95%乙醇，石油醍四.实验步骤：1. 色素提取（乙醇粗提液）a. 取新鲜叶片洗净擦干，去中脉 称lg左右 剪碎于研钵b. 研钵中加3-5ml 95%乙醴研磨成匀浆过滤于刻度试管残话用少许乙脖冲洗一并 过滤定容至10ml注：研磨用石英砂或SiO2以利于充分研磨，加入CaCO3以保护叶绿素2. 荧光观察将乙醇提取液试管放于太阳光下观察反射光和透射光下的颜色现象：透射光下呈绿色，反射光下呈红色为叶绿素荧光3. 色素萃取（石油醒提取液）取乙醇提取液5ml与另一支试管 加2ml石油醍摇荡 静止片刻上层深绿色为石油醍 提取液注：用丙酮提取会更好些，各色素在石汕酰中溶解度不同4. 色素分离a. 将（11cm）圆滤纸中间剪一小圆孔 取滤纸条捻成紧实芯一端插入圆滤纸中心（孔缘 与纸芯紧贴且露出少许，最好相平） 用长滴管吸少许石油醒提取液滴于纸芯上端 待风干后再滴加几次。

b. 将盛有石汕幡的内盖（不要过满）放于培养川1.中央 将插上纸芯的滤纸放在培养皿上纸芯下端浸入石油酷 迅速盖好培养皿c. 推动剂前缘接近滤纸边缘时取出滤纸，风干可见分离色带，用铅笔标出各种色素位置和 名 称胡萝卜素叶绿素b叶黄素叶绿素a匚二一注：带宽和移动速度说明?答： 带 宽：色素越多，色素带越宽，所以色素共分为好几个带移动速度:溶解度高的移动速度快，就越接近滤纸上边缘。