白藜芦醇抗肿瘤作用机制.docx

白藜芦醇抗肿瘤作用机制白藜芦醇(resverat rol)广泛存在于自然界中，是植物在受到外来侵害时所产生的一种抗体性物质，具有保护心血管、调 节血脂、抗病原微生物、护肝等多种生物学作用］,2J ang等3于1997年系统地报道了白藜芦醇的抗肿瘤作用，研究认为白 藜芦醇作为天然的肿瘤化学预防剂，对肿瘤的起始、促进、发展三个阶段均有抑制作用;能够抗突变、抗氧化，清除自由基， 并诱导II期药代谢酶(抗起始活性)和环氧化酶(cyclooxygenase, COX)及过氧化氢酶活性，有很强的抗炎作用(抗促进活性)； 并能诱导人早幼粒细胞性白血病细胞株HL60 (抗发展作用)的分化4 =,本文就白藜芦醇的抗肿瘤作用机制进行简述如下1 抗氧化作用自由基损伤被公认是引起细胞DNA损伤进而导致细胞恶变的重要机制之一，白藜芦醇即3 ,5 ,8-三羟基二苯乙烯(3,5,8-t ri hydroxyl2s til bene)是一种强抗氧化剂,对由氧化应激引起的细胞组织损伤有明显的保护作用，白藜芦醇还能减少 产生，明显抑制大鼠红细胞的自氧化溶血和由呼2引起的氧化溶血，对小鼠心、肝、脑、肾等脏器的体外过氧化脂质的产生有 明显的抑制作用7,8,能有效的清除AAPH(盐酸2,2 '-偶氮(异丙基脒)和Fe/抗坏血酸产生的自由基和抑制硫代巴比妥酸反应 物生成9。

De Salvia等10研究了白藜芦醇清除活性氧的能力，结果表明，白藜芦醇能干预氧化代谢过程，减轻也02产生的活性氧 自由基对DNA分子的损伤Yen等n则通过研究表明，白藜芦醇在10〜100》mol/ L范围内能有利于谷胱廿肽的生成，调节抗氧 化酶 谷胱廿肽过氧化物酶和谷胱廿肽还原酶的活力，抑制过氧化氢酶的活力,减轻自由基对淋巴细胞DNA的损伤白藜芦醇能抑制Fen ton反应产生的羟自由基(hydroxy radical ,0H.)对小牛胸腺DNA的氧化损伤Lopez等吃利用咼效液相色谱分 析了白藜芦醇对自由基诱导的DNA损伤所产生的生物标志物 82羟基脱氧鸟苷(82hydroxy2 22deoxyguanos ine ， 82OH2dG)的影响，结果表明，白藜芦醇能明显抑制0H.引起的DNA损伤,其半数抑制浓度(IC50)为10. 9 ±0. 3p mol/ L，且白藜芦醇与 维生素C、褪黑素有协同效应,并能以剂量依赖的形式抑制由佛波酯诱导的HL6细胞株产生自由基，因而减轻DNA氧化损伤白 藜芦醇还通过对Cu2 +的螯合作用而抑制低密度脂蛋白(low densi ty lipoprc2tein ，LDL) 的氧化。

白藜芦醇能抑制膜脂的过氧化，对大鼠肝细胞微粒体中脂质过氧化的半数抑制浓度比槲皮素低3 倍 白藜芦醇对0 2淀粉样蛋白引起的PC12细胞凋亡有预防作用，能降低0 2淀粉样蛋白的细胞毒性及因此而产生的细胞凋亡及 细胞间活性氧介导物的积累，抑制0 2淀粉样蛋白诱导激活的核因子kappaB (nuclear factor kappaB , NFk B)活性和因0 2淀 粉样蛋白影响所致的线粒体膜电位的降低13 白藜芦醇的抗氧化、抗自由基作用对于预防和治疗因氧化损伤引起的各种紊乱 和失调具有非常深远的意义2 抑制NF 2 k B活性白藜芦醇的抗肿瘤作用与抑制K B激酶活化密切相关,Holmes2McNary等］4对白藜芦醇是否可以调整NF2k B活性进行研 究，发现白藜芦醇具有抑制NF2k B活化调控的关键因子 K B激酶活性的作用，白藜芦醇通过阻断K B激酶活性，抑制NF2k B活化而抑制癌症，为阻断肿瘤发生方面提供了合理的分子机理白藜芦醇是NF2k B活化和NF2k B依赖性基因表达的 强效抑制剂，其机理可能是抑制上游的信号元件，白藜芦醇可以阻断编码单细胞化学诱导物蛋白21基因(属于NF2k B调控的基因)表达，诱导纤维母细胞凋亡。

Afaq等］5对白藜芦醇干预紫外线B(ultraviolet B ,UVB)辐射引起的SKH21裸鼠皮肤损伤进行了研究,0. 2 ml 25》mol/ L白藜芦醇丙酮溶液干预能明显抑制短期UVB暴露的SKH21小鼠的皮肤癌，同时抑制UVB诱导的COX活力和鸟氨酸脱羧酶活力及酶蛋白的表达，降低因UVB引起的脂质过氧化进一 步的研究结果表明，白藜芦醇干预UVB辐射引起的SKH21裸鼠皮肤损伤的保护作用是由于白藜芦醇能以剂量依赖和时间依赖 方式阻止UVB诱导的NF2kB的激活，抑制Ik 2a的磷酸化和降解所致16Pellegatta等17研究了白藜芦醇对NF2k B信号通道的 影响，由肿瘤坏死因子a ( TNF2a )诱导的p502NF2k B和p652NF2k B不受短时间白藜芦醇处理(30 min)的影响，但受长时间 (24h)白藜芦醇处理的影响白藜芦醇能调节Ik Ba、p652nf2k B、p502nf2k B的Tyr残基磷酸化，调节Ik Ba的转录活性 Ashikawa等］8发现白藜芦醇能以剂量和时间依赖方式阻断TNF2a诱导的NF2k B的活化，抑制TNF2a诱导的NF2k B的p65亚单 位磷酸化和核转位及NF2k B依赖的报告基因的转录，阻断由佛波酯、脂多糖、H2O2、神经酰胺等诱导的NF2k B的活化，抑制 TNF2a诱导的有丝分裂原激活的蛋白激酶激酶(mitogen activated protein kinase k2nase ,MAPKK)和c2j un NH2末端的活化， 研究认为其抑制NF2k B活化进而抑制NF2k B依赖的基因表达是通过抑制NF2k B活化的关键调节物 Ik B激酶的活性而产生的，白藜芦醇能诱导野生型P53蛋白表达并使之活化，通过P53途径诱导凋亡发生。

进一步研究指出，白藜芦醇诱导的 P53的活化和凋亡是由细胞外信号调节的蛋白激酶(extarcelularsignal regulated kinase , ERK)和P38激酶使P53蛋白第15 位上的Ser磷酸化所致白藜芦醇还能抑制白介素I0诱导的NF2k B的激活，抑制骨髓白血病细胞的增殖3 阻滞细胞周期细胞周期受多种基因调控网络的调控，这个调控网络的核心就是细胞周期蛋白依赖的激酶(cyclin dependentkinases ,cdks) ,Ahmad等20发现在人类鳞状细胞癌A431细胞中白藜芦醇通过调节cdks抑制剂2细胞周期蛋白2cdk之间相互作 用，引起细胞阻滞于G1期并随后诱导细胞凋亡白藜芦醇对A431细胞的有剂量依赖生长抑制作用；通过DNA细胞周期分析显示, 细胞周期G1期受到阻滞;免疫印迹分析显示白藜芦醇干预导致剂量和时间依赖的WAF1cip1的诱导、细胞周期蛋白D1、D2和E、 cdk2、cdk4和cdk6蛋白表达的降低,表明白藜芦醇治疗可导致与所有被检测的cdks相关的蛋白激酶活性的降低，抑制细胞周期蛋白D1/D22cdk6、细胞周期蛋白D1/D22cdk4 和细胞周期蛋白E2cdk2复合物的形成，因此抑制细胞周期由G1期向S期转化，最终导致肿瘤细胞的凋亡。

白藜芦醇能抑制 HT129结肠癌细胞的增殖，使他们的分化集中于细胞周期的G2期，白藜芦醇对G2期的干扰伴随着p34 (Cdc2)蛋白激酶的失活， 促进p34的Tyr残基的磷酸化，酶动力学分析显示p34活力的下降是通过对cdk蛋白激酶活力的抑制来调节的，而Cdc25A磷酸 酶活力不受影响此外，白藜芦醇处理的细胞显示有低水平的cdk7蛋白激酶2Thr (161)磷酸化p34CDC2生成，表明白藜芦醇是通 过抑制cdk7蛋白激酶的活力、细胞分化、细胞周期的｝2期，来抑制瘤细胞的增殖21白藜芦醇还能改变涉及细胞周期调节和 细胞凋亡蛋白如细胞周期素(cyclin)、cdks、p53和cdk抑制因子的基因表达，激活一系列p53调节的基因和细胞凋亡或生长 抑制相关的基• 258 • Chin J Dis Cont roEoPrevJ une ; 9⑶因通过芯片技术、RT2PCR、Wes tern印迹和荧光免疫分析白藜芦醇 处理48 h的雄激素敏感前列腺癌细胞LNCaP显示，对下游前列腺专一性抗原(pros tate specific an tigen , PSA)、AC共激活 因子ARA24和NF2kBP65、P53相关基因(如P53、PIG7、P21 (WAF1cip1) p300/ cbp和Apaf21 等)有调节作用，表明白藜芦醇对 p300/ bcp 的影响在其抗癌作用中也起作用。

4 雌激素样效应白藜芦醇具有雌激素样作用，能被人体雌激素受体很好地识别，能以氢键方式与雌激素受体a的活性中心(His524、 Arg394和Glu353)结合，白藜芦醇在体外可与雌激素应答兀件(es t rogenresponsiveelemen ts ,ERE)结合，影响雌激素受体(est rogen re2ceptors , ERs)的转录活性体外ERs结合实验发现，白藜芦醇可与大鼠子宫组织的ERs结合,从而具有诱发一系列 生理学反应的潜在作用23白藜芦醇能抑制乳腺癌细胞增殖的基因表达，白藜芦醇与活性雌激素受体结合，调节雌激素敏感靶 标基因的转录Fustier等24用定量RT2PCR和蛋白质灌流技术研究了白藜芦醇对乳腺癌肿瘤细胞株BR2CA1和BRCA mRNA表达 的影响，结果表明，用30mmol/ L白藜芦醇干预的MCF27、HBL100和MDA2MB 231细胞,其BRCA1 和BRCA2 mRNA均明显增加，但蛋白 的表达未见增加 Levenson 等25 在转化生长因子( t ransforming growth factora ， TGF2a ) 水平和细胞水平(细胞生长) 研究 白藜芦醇对野生型雌激素(wt) ER(D351)和突变株ER(D351T)转染的乳腺癌细胞的影响，TGF2a mRNA的诱导作为雌激素对雌二 醇(est radiol 2 , E2)的专一标记，白藜芦醇能刺激低浓度依赖性TGF2a mRNA转录，抗雌激素物ICI182、ICI 780能阻止白藜 芦醇诱导的TGF2a激活，进一步研究表明，白藜芦醇与各种浓度(10-n〜10_ 8mol/ L)的雌激素混合时并不起拮抗作用,TGF2a 分析表明白藜芦醇和雌激素类似物D351GER同属I型雌激素,且白藜芦醇与E2均呈浓度依赖性抑制wt ER 和D351YER细胞表达, 尽管雌激素拮抗物ICI能消除雌二醇引起的作用，但对白藜芦醇引起的生长抑制没有影响，白藜芦醇调节wt ER上游80多个 基因的表达，白藜芦醇在低浓度时起ER拮抗作用，并激活ER独立通道，抑制乳腺癌细胞的增殖。

5 激活腺苷酸环化酶活性白藜芦醇能激活腺苷酸环化酶(ademylate cy2clase ,AC)活力，增加细胞cAMP水平,抑制乳腺癌细胞MCF27级联生长，且抑 制作用呈浓度、时间依赖关系，而对cGMP没有任何影响，白藜芦醇对AC的作用不受蛋白合成抑制因子 放线菌素D影响，也不受雌激素受体阻滞剂一他莫西分的影响白藜芦醇促进cAMP的合成，对广谱磷酸二酯酶抑制剂232异丁基212甲基黄嘌吟 和cAMP转移磷酸酯酶抑制剂(rolipram)都不敏感，平行实验结果显示：白藜芦醇能以浓度效应方式抑制肿瘤细胞的增殖，白 藜芦醇和rolipram有协同作用，能显著增强各自的肿瘤细胞毒性白藜芦醇的作用可被蛋白激酶A抑制剂Rp2cAMPs 或KT25720 所逆转，预先用抑制剂(花生四烯酸基三氟甲酮)处理能明显消除白藜芦醇的影响26,但对rolipram的作用无影响，上述结果表 明，白藜芦醇是cAMP/蛋白激酶A体系的拮抗剂6 抑制肝成肌纤维细胞增殖肝成肌纤维细胞是引起肝纤维化和癌症发展的主要因素， Godichaud 等27 研究了白藜芦醇对培养的人肝成肌纤维细胞 的作用，发现白藜芦醇能明显影响成肌纤维细胞的表型，可产。