《论文_浅谈体液中离子的分析(定稿)》.docx

体液中离子的分析摘要：本文建立了离子色谱分析体液中各种离子的方法川这种方法，常规的无机离子如氯、 业硝酸、硝酸、磷酸、硫酸、钠、钾、镁和钙等都很容易分离这种离子色谱方法只需要很 少的样品预处理，而被分析物可以没有任何明显干扰地分离关键词：体液;阴离子；阳离子；有机酸离子色谱(IC)在过去的20年中被广泛接受柱技术及检测方法的进步导致离子色谱 在很多不同行业、不同基休中应用离子色谱在临床化学中的故主耍应用就是分析体液例如 尿、血浆及血清中的有机和无机阳离子和阴离子［1］体液的概况有助于一些病例如乳酸毒 症、草酸过多症和的尿路结石等的研究体液的分析需要一种高灵敏度和选择性的的分析技 术，因为基体很复杂而且要分析的离子浓度一般很低当高效液相色谱成为检测疾病诊断的 牛物标记物的重要技术时，离子色谱也被广泛的地应用于分析离子(见图1)离子色谱的分离机制是基于样品离子和流动相离子在固定相离子交换功能基团上发生 的离子交换取代过程典型的固定相由苯乙烯与二乙烯基苯交联而成并川离子交换基团使它 功能化本文所阐述的有机酸和阴离子的分离是用由丁基做功能化的固定相來实现的；而竣 酸基团就用作阳离子分离的交换位点。

分析柱的流出物经过能降低淋洗液总电导并提高分析 离子电导的的抑制器使用抑制型电导，灵敏度会得到明显的提高1实验部分1.1仪器及试剂戴安DX 500系统山以下部件组成:GP40梯度泵、CD20电导检测器、LC10或LC20色 谱模块、PeakNet色谱工作站；50%的氮氧化钠(NaOH) (Fisher Scientific公司)、硫酸 (H2SO4),试剂纯；去离子水,17.8MQ-Cm或更高的电阻率、乙Bg (CH3CN), HPLC纯1.2样品的处理尿：根据需要用去离子水稀释(例如1:25)后上样血浆和血清：利用乙尉除蛋白0.2 mL血清和等体积的乙尉混和，5000xg离心7分钟 取0.1 mL上清液用1.0 mL去离子水稀释1.3色谱条件1.3.1阴离子和有机酸分析柱：IonPac・ AS11分析柱,IonPacAGll保护柱和IonPac ATC-1阴离子捕获柱；NaOH 梯度；流速：2.0 mL/min；定量环体积：10 P L；检测：抑制型电导,ASRS阴离了抑制器， AutoSuppression.自循环模式；预期的背景电导：0.5 mM NaOH: <1 P S, 35 mM NaOH: <3.5IX S；预期压力：11 MPa(1600psi)1.3.2阳离子分析柱:IonPacCS12A分析柱,lonPac CG12A保护柱；淋洗液：18 mN硫酸；流速：1.0 mL/min；进样体积：25 U L；检测：抑制型电导检测，阳离子抑制器CSRS,自循环模式； 预期背景电导：＜3 nS；预期压力:8.3 MPa （1200 psi）2 •结果与讨论2.1尿，血浆和血清中阴离子和有机酸的分析一系列的无机和有机酸阴离子在临床化学研究中有不同的意义。

图1显示多种阴离子 和有机酸都可以川离子色谱分离检测离子色谱可川于复杂慕体，如血清图2显示了血清 样品中无机阴离子和有机酸阴离子的分离被怀疑止承受尿酸过多症痛苦的病人（这种情况 可导致痛风），其尿酸会被以尿酸盐的形式进行监测尿酸也在治疗中的慢性骨髓性白血病 病人中被监测图3所示的分离提示它可以与HPLC方法竞争，有可比较的选择性和灵敏 度在这篇文献中所提到的方法并不推荐川于草酸的检测，因为氢氧化钠淋洗液能降解尿中 的抗坏血酸形成草酸几个研究确定了亚硝酸和硝酸在哺乳动物急性中毒中的角色［2卜［5］ 这些研究包括硝酸和亚硝酸的牛物转化及其后果：高铁血红蛋白症和贫血性组织缺氧氯离子可以作为血液中电解质异常的检测手段来进行监测，它通常可以平行的转换为 钠离子的浓度血液中氯离子浓度在脱水情况下升高，在水肿、充血性心脏病、Addison氏 病以及其他水钠平衡失调的情况下降低离子色谱是氯离子分析的一种是一种很成熟的技 术图2显示了氯离子在复杂的血清基体中的分离离子交换作为这种方法的分离过程，不同的化合价离子间呈现出的保留行为有很大差 异相应的，也要川大浓度范围的淋洗液来获得满意的分离效果在这方法中，IonPacASll 与能显苦降低淋洗液电导的自再生阴离子抑制器（ASRS）联川，因此就允许川快速提高的 氢氧根梯度來在一次进样分离从一价到三价的无机阴离子和有机酸阴离子的基团（见图3、 图4）。

IonPac AS 11柱的选择性和容量与抑制型电导结合使这方法冇高的灵敏度和选择性最岳切觀艸早唯土趨由唯乞•【raOl5s?Qsi0COl0e□0PL(6t001060郁nrnrruw^wi软0|纳玄 寿㈣即1 X 勺朗堆・厂& we$ Tl ^fkiio FL 91CJUN IL♦IU0 用 *91 訂*4M4U小d 9|jiin n 艸 IMQ 101「冈即new砂M L IJO^H sp •；01 01 01 QI 0101QI刊UES| Q 可的PM冲丄蕈 那期3住 nj0JM3 e? ”训妙巧•妥WFqiW 12 別Fjujun］賀 V|pix|r i i|i^ ：7 哪XO R 詡巧TZ? eelm用 715 弓网开omps”|L? 咖用|UA ‘01$ &!场9 ■&5 吧叭E5 K^3iuuiin$/ywfl 7$ ^ctnioj *95 轉uqctojy *S5 知肌砒＞l 伸i㈣d •5 |Biiiit) ?}Gu piJG JiiwqdHiid心nXiiijdau i图2.血清中阴离子和有机酸的分析图3・尿液中阴离子和仃机酸的分析Zs：1.Fluor iije 1 n^lZCWoncte 1351 Nitrale 0.034. Malooale 335. Sulfate 0 886. Phosphate 1.87. Uricxid 0248. Citrate 1109 c/$ Aconitate 060Peaks：1.Flucdde2.6 martX).Sulfate66 mg/L2.Acetate28 11Oxalate0.15 =Peaks:IFormate02912.Phosphate941 Fluor6.4 mat8.Sultate0.51 im>tI.Unknown—11Uricacid1.82. Acetate129.Pthalate0.50>.Pyiuvate0.8914.Citrate183. Formate4310.Phosphate22人Bronate1215.Isochraie0244 Chkride1S411.CitrateSBJ.Chlorkte16.c/s-Aconiwe1.45 Selefiite1.712.IsocitrateOjQSi.Unknown—17.rrans-Accxiitate0.726 Malonale4913.“曲$4coni(aie 0.53JNitrate0.377 Maleate1.1图4・血浆中阴离子和有机酸的分析2.2尿,血浆和血清中阳离子的分析碱金属和碱土金属的检测在临床化学中也是非常重要的。

采用本方法条件，一价和二 价阳离子例如锂、钠、镀、钾、镁和钙都很容易被检测出來（见图5）离子色谱的方法比 起传统的分析方法例如原子吸收光谱、火焰喷射、气相色谱和离子选择电极有更高的灵敏度、 特异性、准确性和可靠性在临床阳离子监测中常包扌舌锂，它在处方中用于控制分裂型精神 病或狂躁型抑郁症病人的狂躁期钙离子的检测就主要在大型的外科手术过程中进行，例如 开放性心脏手术、肝脏移植和其他需耍大量加有柠檬酸作抗凝剂的血液手术决定所提供的 钙的补充量要基于钙离子的检测镁也是体液中常被检测的二价阳离子缺镁症和镁过多症 就要监测镁饮在Rye氏综合症的诊断中很有用，因为血中钱的提高通常在肝酶之前肌 酸的测量用于评估肾功能检测肌酸可用这方法辅以吸光度检测器（210nm）來进行（见图 6）这篇文献所用的IonPac CS12A阳离子交换柱提供了快速、等度的对锂、钠、锻、钾、 镁、钙的分离，用稀释的硫酸淋洗液可在12分钟内完成（见图5）然而，在复朵基体例如 体液中，高浓度的某种分析物可遮盖相邻的峰，那就要用更稀的淋洗液图7到图9显示了 用更稀的淋洗液分离阳离子的情况阳离子交换基体用竣酸和磷酸基功能团化，这样允许用 稀的氢离子淋洗液例如硫酸或甲基磺酸來洗脱一价和二价阳离子。

淋洗液在进电导检测器前 要进入白再生阳离子抑制器（CSRS）进行抑制图6.尿液中肌酸的分析Pwks1. Satan2 Poossium3.4. CakMim89书130.3212I r5 10 15MhutesI20"rates1520iiwColumnloiPac