
细胞生物学显微测量和细胞化学成分ppt课件.ppt
19页细胞的显微丈量与化学成分¯ 目的要求¯ 用品资料¯ 实验内容¯ 实验报告¯ 复习预习细胞的显微丈量与化学成分目的要求目的要求v 掌握细胞显微丈量的方法;v 掌握生物大分子在细胞内的存在部位;v 熟习细胞显微丈量的原理;v 熟习细胞化学成分的显示原理;v 了解细胞内化学成分的检测方法细胞的显微丈量与化学成分用品用品资资料料v实验器材v 显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、载玻片、盖玻片、酒v 精灯、火柴、刀片、小烧杯、剪刀、镊子、吸管、吸水纸v实验试剂v 碘液、乙醚、95%乙醇、甲基绿-派洛宁液、2 %过氧化氢v 液、5 %三氯醋酸液、联苯胺混合液、1 %番红液、0.1 %v 酸性固绿液、0.1 %碱性固绿液、0.5 %硫酸铜液v实验资料v 蛙血涂片、动物肝糖原切片、马铃薯、蟾蜍、小鼠v 细胞的显微丈量v 细胞的化学成分细胞的显微丈量与化学成分实验实验内容内容细胞的显微丈量与化学成分实验实验内容内容第一部分第一部分细胞的胞的显微丈量微丈量前往上一层前往上一层 细胞的显微丈量需求以目镜测微尺来进展,但其分度值随着放大倍数的变化而变化,长度也不一样,因此需求事先进展标定。
而镜台测微尺的长度是知的,目镜测微尺的标定是经过镜台测微尺来进展的0.01mm01234012345678目镜测微尺(长度随放大倍数发生改动)镜台测微尺(每一大刻度值为0.1mm,小刻度值为0.01mm)目目镜测微尺与微尺与镜台台测微尺微尺目目目目镜测镜测微尺的微尺的微尺的微尺的标标定定定定放镜台测微尺于载物台调理使镜台测微尺与目镜测微尺平行取下镜台测微尺*装入目镜测微尺记录二者在重合线之间的刻度计算标定值如在低倍镜下重合线之间目镜测微尺的长度为50格 镜台测微尺的长度为68格那么: 50:68=1:x x=1.36格,即目镜测微尺的1小格相当于镜台测微尺的1.36格,而镜台测微尺每1小格的长度为10um,那么目镜测微尺每1小格的长度为13.6um• 标定时必需严厉按照操作规程,以免损坏测微尺;• 重合线的判别应在二者刻度线完全重合;• 比例式的计算;• 标定值只能在同一放大倍数下进展丈量标定定时应留意留意的的问题蛙蛙蛙蛙红细红细胞的胞的胞的胞的显显微丈量微丈量微丈量微丈量目镜测微尺短轴长轴转动目镜镜筒细胞的显微丈量与化学成分实验实验内容内容第二部分第二部分细胞的化学成分胞的化学成分前往上一层前往上一层v 细胞内多糖物质的察看v 细胞内DNA/RNA的显示v 酸性、碱性蛋白的显示v 细胞内过氧化氢酶显示细细胞内多糖物胞内多糖物胞内多糖物胞内多糖物质质的的的的显显示示示示 植物淀粉有直链淀粉和支链淀粉之分,遇碘液显示蓝色反响,加热时蓝色消逝,冷却时蓝色又重新出现。
蓝色的产生是由于直链淀粉遇碘构成不稳定的蓝色化合物——碘化淀粉的缘故• 取载玻片• 徒手切片• 碘液染色• 盖盖玻片• 镜检察看马铃薯块茎内淀粉显示(表示图)(蓝色或蓝紫色,颗粒大小不一)小鼠细胞内的肝糖原(紫红色,PAS反响)细胞内多糖物胞内多糖物质的的显示示细细胞内胞内胞内胞内DNA/RNADNA/RNA的的的的显显示示示示 细胞化学方法显示细胞内的DNA和RNA有两种方法:Bratchet反响和Feulgen反响本实验主要引见Bratchet反响Bratchet反响显示细胞内的DNA和RNA是经过Unna试剂来实现的Unna试剂甲基绿甲基绿(绿色绿色)派洛宁派洛宁(红色红色) DNARNAüü 蟾蜍蟾蜍红细胞内胞内DNA、、RNA的的显示示(红色区域示色区域示RNA,,蓝色示色示DNA)细细胞内酸性胞内酸性胞内酸性胞内酸性/ /碱性蛋白的碱性蛋白的碱性蛋白的碱性蛋白的显显示示示示 以酸性氨基酸为主要成分的蛋白质为酸性蛋白;以碱性氨基酸为主要成分的蛋白质为碱性蛋白细胞核内有组蛋白(碱性蛋白)及少量酸性蛋白,细胞质中主要为酸性蛋白,标本经三氯醋酸处置抽提掉核酸后,用不同pH值的固绿分别染色,使细胞内的酸性蛋白和碱性蛋白显示出来。
蟾蜍细胞内酸性蛋白的显示(pH2.2固绿染色)蟾蜍细胞内碱性蛋白的显示(pH8.0固绿染色)蟾蜍蟾蜍红细胞内酸性蛋白和碱性蛋白的胞内酸性蛋白和碱性蛋白的显示示(绿色分色分别示酸性和碱性蛋白在示酸性和碱性蛋白在细胞内的存在胞内的存在部位部位)小鼠小鼠小鼠小鼠细细胞内胞内胞内胞内过过氧化氧化氧化氧化氢酶氢酶的的的的显显示示示示 在生物体内,细胞代谢过程会产生对机体有害的过氧化氢存在于动、植物组织细胞中的过氧化氢酶,能使过氧化氢分解,构成水和氧气,对机体起维护作用过氧化氢酶系还能把许多胺类物质氧化为有色化合物假设用联苯胺混合液处置标本,细胞内的过氧化氢酶能把联苯胺氧化为蓝色的联苯胺蓝,后者不稳定,可迅速转变成棕色的联苯胺棕• 取载玻 片• 血涂片• 自 然 枯 燥• 硫酸铜固定• 联苯胺染色• 番红复 染• 水 洗 晾 干• 镜 检察 看人血细胞(红箭头示白细胞,蓝箭头示红细胞)小鼠骨髓细胞(箭头棕色物质示过氧化氢存在部位)细胞内胞内过氧化物氧化物酶的的显示示细胞的显微丈量与化学成分实验报实验报告告? 记录蛙红细胞显微丈量的结果? 绘图表示蛙红细胞内酸性蛋白的显示分别记录5个蛙红细胞的长径和短径,并计算平均值。
蛙红细胞丈量结果单位:m12345平均长径短径生物学绘图的要求和方法1.生物学绘图根本工具:铅笔(HB或2B)、直尺、橡皮、实验报告纸;2.生物学绘图必需真实、客观,应选择有代表性的标本,按照实践察看到的外形、比例、位置和毗邻关系等进展绘制;3.留意比例、规划,大小适中,图下方标注图的称号;4.图的注释应以程度直线引出,构造称号写于引示线末端;5.图的明暗和立体感以细圆点的疏密度来表示,必要时可用彩色描出标本的颜色6.请参阅实验指点第9页细胞的显微丈量与化学成分复复习预习习预习v 预习第三次实验“细胞的某些生理活动〞(p12)v 复习 “生物绘图的要求及方法(p9)〞 。












