非洲紫罗兰组织离体培养及快速繁殖.doc

非洲紫罗兰组织离体培养及快速繁殖摘要：以MS为基本培养基研究了离体条件下非洲紫罗兰外植体的 快速繁殖技术结果表明：BA诱导外植体出芽的效率明显优于KT,切 BAO.lmg/L诱导外植体出芽的效率优于BA0.2mg/L o 1/2MS加NAA 0. 2 mg/L的培养基诱导生根最为适宜，生根率较高关键词 非洲紫罗兰(Saintp aulia ionantha);离体培养；快速繁殖导外植体出芽的效率明显优于KT和ZTz其中6- BA 0. 5 mg#L-1+ NAA0. 5 mg#L-1的组合诱导效率最高，诱导频率可达100%; 1/2MS附加NAA 0. 2 mg#L-1并添加0. 2%活性炭的培养 基诱导生根最为适宜，生根率达100%o英文摘要：Taking MS as basic culture medium of rapid propagationtech no logy Africa violetexpla nts in vitro. Results: BA in duced Theexplants sprouting efficiency is superior to KT； BAO.lmg/L cutting the explantsprouting efficiency is better than that of BA0.2mg/L. Medium 1/ 2MS plus NAA0.2 mg/L induced rooting is most suitable, rooting rate. 关键i司 洲紫罗兰；离体培养；快速繁殖；组织培养；外植体引言:非洲紫罗Saintpaulia ionantha),别名非洲堇、非洲紫苣苔、 大花非洲苦苣苔，属苦苣苔科非洲紫罗兰属。

原产热带非洲的巴西、坦桑 尼亚，是一种具有较高观赏价值的室内盆栽花卉在欧洲和美洲栽培十分 普遍，深受人们的喜爱以往，非洲紫罗兰多采用插叶法繁殖，该方法繁殖 系数低、周期长，而且容易携带病菌而组织培养非洲紫罗兰，取材方便、 经济，可在短吋间内获得繁殖成功的试管苗本项研究探讨了利用组织培 养技术快速繁殖非洲紫罗兰的可行方案，为扩大非洲紫罗兰的繁殖及在较 短时间内获得大量优良组培种苗提供科学依据1材料与方法1.1材料：非洲紫罗兰的叶片1.2方法:1.2.1叶片处理方法：取健壮的非洲紫罗兰幼叶，在自来水下冲洗30 min后，在无菌室的超净工作台上用75%酒精浸泡，用无菌水冲洗1次， 放入加几滴吐温的0. 2%升汞溶液中振荡灭菌5~ 6 min,无菌水冲洗5~ 6 次无菌条件下，用灭菌的吸水纸吸干材料表面的水分，然后将材料切成 0. 5 cm * 0. 5 cm左右的小块，作为供试外植体材料进行芽的诱导1.2.2初代培养：将切成小块的无菌叶片外植体平放于下列四种诱导培 养基上进行初代培养每瓶培养基接种2~4片外植体材料，正面向上Fl MS+KT0.1+NAA0.1+30g 蔗糖+6g 琼脂F2MS+KT0.2+NAA0.1+30g 蔗糖+6g 琼脂F3MS+BA0.2+NAA0.1+30g 蔗糖+6g 琼脂F4MS+BA0.1+NAA0.1+30g 蔗糖+6g 琼脂1.2.3继代培养：将初代培养较好的叶片外植体切割成若干块，接种于 继代培养基上进行继代培养“继代培养培养基如下：MS+BA0.1+NAA0.1+30g 蔗糖+6g 琼脂1.2.4生根培养：选取健壮的试管苗进行生根诱导，生根培养基如下:G1 l/2MS+NAA0.1+30g 蔗糖+6g 琼脂G2 l/2MS+NAA0.2+30g 蔗糖+6g 琼脂1.2.5生长环境：将上述植入材料的培养基放于光照培养室内，在26C 左右，光照1000・1500lx,湿度保持在90%以上。

光照时间16h左右进行培养2结果与分析2. 1外植体消毒如果不是取自现成的无菌培养物而是来自温室或田问开放培养的种 子、幼苗、器官等，外植体…般均带有微生物，在培养前必须进行严格的 消毒处理常用的植物消毒灭菌剂有次氯酸盐、和升汞次氯酸盐一般用 于一些较软和较幼嫩的组织消毒，消毒吋间一般为5~30mino氯化汞灭菌 效果最好，一般用于种子、块根、块茎及较硬的组织的灭菌，但其残留液 最难去除，而且对植物组织的伤害亦较大，因此，必须严格控制好消毒时 间，一般不超过lOmin,使用浓度为0. 1%〜o. 2%同口寸，氯化汞消毒 处理的方法也因植物种类和器官不同而异所用消毒剂的种类和处理时间 及其方法是否得当，不仅影响灭菌效果，同吋也影响外植体的生活力，进 而影响培养效果因此，外植体的消毒处理，必须根据植物材料的性质， 确定和优化消毒条件2.2植物激素对非洲紫罗兰初代培养的影响植物激素是由植物自身代谢产生的一类有机物质，并0产生部位移动 到作用部位，在极低浓度下就冇明显的生理效应的微量物质，也被称为植 物天然激素或植物内源激素生长素能促进细胞伸长的主要原因，在于它能使细胞壁环境酸化、水解酶的活性增加，从而使细胞壁的结构松弛、可塑性增加，有利于细胞体 积增大。

生长素还能促进RNA和蛋白质的合成，促进细胞的分裂与分化 生长素具有双重性，不仅能促进植物生长，也能抑制植物生长低浓度的 生长素促进植物生长，过高浓度的生长素抑制植物生长细胞分裂素的主要生理作用是促进细胞分裂和防止叶子衰老细胞分 裂素还可促进芽的分化在组织培养中当它们的含量大于生长素时，愈伤 组织容易生芽；反之容易生根Fl MS+KT0.1+NAA0.1+30g 蔗糖+6g 琼脂芽少根多F2MS+KT0.2+NAA0.1+30g 蔗糖+6g 琼脂芽根同长F3MS+BA0.2+NAA0.1+30g 蔗糖+6g 琼脂芽多（小）根少F4MS+BA0.1+NAA0.1+30g 蔗糖+6g 琼脂芽多（大）根少（1） F1F2和F3F4相比，它们细胞分裂素的种类不同，两组比较可知 BA更有利于芽的生成2） F1与F2相比,F1F2的生长状况大致相同3） F3与F4相比,BA0.1更有利于芽的生长（BA的浓度不同）2.3继代培养愈伤组织在培养基上生长一段时间后，营养物枯竭，水分散失，并已 经积累了一些代谢产物，此时需耍将这些组织转移到新的培养基上，这种 转移称为继代培养或传代培养进行继代培养的非洲紫罗兰生长状况良好，长出新芽并生根，由于进 行继代培养的非洲紫罗兰的大小长势不同，从而导致继代培养的结果存在 一定的差异性。

筛选时应避免接种差异较大植株2.4生根培养当生长素含量大于细胞分裂素的含量时有利于根的生长：观察比较试验结果，G2的生长情况好于G1比较培养基成分可知当 生长素浓度为0.2时更有利于非洲紫罗兰生根3参考文献刘士旺主编•细胞工程•科学出版社,2013.02.陈扬春不同激素对非洲紫罗兰体细胞培养中形态发生途径的影响［J］ 园艺学报常晋淑 非洲紫罗兰试管快速繁殖［J］植物生理学通讯,1985, ( 5):34-36曾宋君 非洲紫罗兰快速繁殖［J］ 园林,1998, ( 5) : 29江鼎康.家庭花卉栽培.上海：上海科技文献出版社,1998. 391 -393曹孜义，刘国民.实用植物组织培养技术，兰州：甘肃科技出版社,1996.心得体会这次实验着实让我很费了一番脑子，不仅要深入的去了解了个中原理, 实验操作的机理，同时还让我认识到自己以前的迷糊与不负责任，也讣我 体会到全身心的投入到一件事中，是如此快乐和满足，还得到了好多在课 堂上永远无法获得的知识下面，具体说说看我的几件不小的收获首先，我学会了配置许多的试剂，知道了不同的试剂配置需要注意的问题，巩固了某些药品相关的知识，并且在多次配置时，得出了一个结论: 如果不是很熟悉的试剂配方，最好是拿一个专门的本子记录下来，以备不 时之需，这样一来，以后实验也不会因为试剂的问题而手忙脚乱。

还有, 实验步骤需要仔细的斟酌其中的奥秘，每一步如此走，自然有前人的用意, 毕竞这些实验都是过去的科学家研究出来的精华继承，理解了他们的意图 和原由，做起实验來会更加的得心应手也不易遗忘或出错最后，我想说： 在决定要做的事情后，最好考虑清楚行动时会需要用些什么，做些什么, 将准备工作做好，为后续行动铺垫，按英规律列好清单，会使得实验或者 任何别的事情做得更加顺利，冇条理，排除做过多无用功的可能性，提高 了效率的同时还降低错误失误的出现概率，成功率也会增高这就是我 从植物细胞工程大实验里得到的一些心得我希望以后，我能将自己从这 里得到的心得，学习应用到其他的实验甚至是学习生活中去，扩充自己的 知识，拓宽自己的视野，增厚自己的底蕴，加强自己的能力。