河北省沙河市二十冶综合学校高中分校高中生物 1.1DNA重组技术的基本工具 第1课时导学案（无答案）新人教版选修3.doc

1.1《DNA重组技术的基本工具》学法指导:设置问题情境，引导学生在思索中学习新知识学习目标：1、简述基因工程的原理及基本操作程序2、尝试设计某一转基因生物的研制过程学习重点：基因工程基本操作程序的四个步骤学习难点：（1）从基因文库中获取目的基因（2）利用PCR技术扩增目的基因自学过程：基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：　             　、　                  、            　、　                　 学点一、目的基因的获取： 1．目的基因：符合人们需要的，编码蛋白质的      也可以是一些具有      的因子 2．获取目的基因的方法 (1)从基因文库中获取目的基因 ①基因文库：将含有某种生物不同基因的许多            ，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库 ②种类 基因组文库：含有一种生物的       基因 部分基因文库：含有一种生物的           基因，如cDNA文库 ③目的基因的获取依据： 根据基因的有关信息：基因的          序列、基因在        上的位置、基因的       产物mRNA、基因的翻译产物蛋白质等特性获取目的基因。

  (2)利用PCR技术扩增目的基因 ①PCR含义：是一项在生物体外       特定DNA片段的核酸合成技术 ②PCR原理：DNA          ③条件：有一段已知目的基因的       序列，以便根据这一序列合成         ④过程：目的基因DNA受热形成          ，与          结合，然后在_____      ____的作用下进行延伸形成DNA ⑤方式：每次循环后目的基因的量增加一倍，即成       扩增=2n(n为扩增循环的次数) (3)人工合成法：如果        ，        已知，可以通过            用化学方法人工合成     学点二、基因表达载体的构建──基因工程的核心 1．表达载体的组成：          +          +          +          等 2．启动子：位于基因的        ，它是            和结合的部位，驱动基因转录产生mRNA，最终获得所需的        3．终止子：也是一段有特殊结构的        ，位于基因的             ，终止      4．标记基因：鉴别受体细胞是否含有目的基因，从而将              筛选出来。

常用的标记基因是           5．表达载体的功能：使目的基因在受体细胞中       ，并且         给下一代；同时使目的基因能够_      __和         作用 6．不同的受体细胞及目的基因导入受体细胞的方法不同，基因表达载体的构建上也会有所差别 学点三、将目的基因导入受体细胞 (一)转化的概念：目的基因进人受体细胞内，并在受体细胞内         和          过程 (二) 常用的转化方法： 1．将目的基因导入植物细胞 (1)农杆菌转化法 ①农杆菌特点：易感染       植物和裸子植物，对____ ___植物没有感染力；Ti质粒的          可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上 ②转化过程：目的基因插人       农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达 (2)基因枪法 基因枪法：是单子叶植物中常用的一种基因转化方法，但是成本较高  (3)花粉管通道法 花粉管通道法：这是我国科学家独创的一种方法，是一种十分简便经济的方法（我的的转基因抗虫棉就是用此种方法获得的）植物花粉在柱头上萌发后，花粉管要穿过花柱直通胚囊。

花粉管通道法就是在植物受粉后，花粉形成的花粉管还未愈合前，剪去柱头，然后，滴加DNA（含目的基因），使目的基因借助花粉管通道进入受体细胞 2．将目的基因导入动物细胞 (1)方法：显微注射技术 (2)操作程序：目的基因表达载体          →取卵(受精卵) →显微注射→注射了目的基因的受精卵移植到__ __性动物的_____   __内发育→新性状动物 3．将目的基因导入微生物细胞 (1)原核生物特点：           、多为         、               相对较少等 (2)大肠杆菌最常用的转化方法是：        处理细胞→         细胞→表达载体与感受态细胞混合→ ___ __ 细胞吸收DNA分子 学点四、目的基因的检测与鉴定 1．检测 ①．首先要检测                           ，方法是采用                            ②其次还要检测                           ，方法是采用                           ③最后检测                              ，方法是从转基因生物中提取               ，用相应的                    进行                  。

 2．鉴定：进行                   的鉴定如                                      [合作探究、展示点评] 1、正确表示基因工程顺序操作的四个步骤的是    (    ) A．获取目的基因→将目的基因导入受体细胞→基因表达载体的构建→目的基因的检测与鉴定 B．目的基因的检测与鉴定→获取目的基因→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞 C．获取目的基因→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定 D．基因表达载体的构建→获取目的基因→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定4。